2025年1月24日
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孙娜娜
作品数:
5
被引量:20
H指数:3
供职机构:
南方医科大学南方医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
孟莹
南方医科大学南方医院
潘妙霞
南方医科大学南方医院
张月
南方医科大学南方医院
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机构
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南方医科大学...
作者
5篇
孟莹
5篇
孙娜娜
2篇
潘妙霞
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张月
传媒
3篇
中华医学杂志
年份
1篇
2018
3篇
2017
1篇
2016
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巨噬细胞来源的外泌体改变肺局部RAS微环境促进肺纤维化
目的:探讨巨噬细胞来源的外泌体对小鼠肺成纤维细胞胶原合成及博来霉素(BLM)诱导小鼠肺纤维化中的作用及其机制.材料与方法:收集RAW264.7细胞培养分离鉴定外泌体.体外:小鼠肺成纤维细胞与外泌体共培养及加入IR(AT1...
孙娜娜
孟莹
关键词:
巨噬细胞
外泌体
肺纤维化
RAS
血管紧张素转化酶2过表达改善肺部胶原合成的机制
被引量:6
2017年
目的探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)过表达改善肺部胶原合成的机制。方法体外分离培养ACE2基因过表达(ACE2+/+)小鼠及野生型(WT)小鼠的肺成纤维细胞,设置WT-对照组、WT-血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、ACE2+/+-对照组、ACE2+/+-AngⅡ组、ACE2+/+-AngⅡ+A779组。Western印迹法检测各组ACE2、Ⅰ型胶原、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体蛋白3(NLRP3)、自噬蛋白Beclin1、泛素结合蛋白P62、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白相对表达量,并对三磷酸腺苷(ATP)含量进行检测。对ACE2+/+细胞进行自噬抑制剂干预,设置ACE2+/+-对照组,ACE2+/+-AngⅡ组,ACE2+/+-AngⅡ+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,ACE2+/+-3-MA组。Western印迹法检测Ⅰ型胶原、P62、LC3-Ⅱ蛋白相对表达量。体内实验将WT和ACE2+/+小鼠随机分为四组:WT-对照组、WT-博来霉素(BLM)组、ACE2+/+-对照组、ACE2+/+-BLM组。BLM组的处理方法为BLM(3.5 mg/kg)气管内滴注,对照组为相同体积生理盐水气管内滴注,28 d后处死,取肺组织进行HE、Masson染色以及NOX4、P62和LC3的免疫组化评价。结果体外分离的肺成纤维细胞的波形蛋白免疫组化和免疫荧光为阳性。ACE2+/+-对照组的ACE2蛋白相对表达量显著高于WT-对照组(0.202±0.062比0.067±0.040,P〈0.05)。WT-AngⅡ组的Ⅰ型胶原、NOX4和NLRP3蛋白相对表达量均显著高于WT-对照组(0.861±0.129比0.417±0.076、0.432±0.036比0.318±0.058、0.367±0.125比0.045±0.012,均P〈0.05)。ACE2+/+-AngⅡ组的Ⅰ型胶原和NLRP3蛋白相对表达量与ACE2+/+-对照组差异均无统计学意义(均P〉0.05),ACE2+/+-AngⅡ+A779组的Ⅰ型胶原和NOX4蛋白相对表达量均显著高于ACE2+/+-AngⅡ组(0.707±0.155比0.458±0.108、0.29
阳倩捷
郑伯俊
孙娜娜
潘妙霞
郑泽茂
孟莹
关键词:
肺纤维化
肽基二肽酶A
胶原
氧化性应激
Yes相关蛋白1在血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肺纤维化中的作用及其机制
被引量:5
2017年
目的 探讨Yes相关蛋白1(Yap1)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠肺纤维化中的作用及其机制。方法 体内实验将18只Wistar大鼠按随机数字表法分成对照组、博来霉素(BLM)组、BLM+AngⅡ组各6只;造模后28 d后取肺组织行HE、Masson染色及Yap1免疫组化评价。体外分离培养原代肺成纤维细胞,予10-7 mmol/L AngⅡ或AngⅡ拮抗剂伊贝沙坦作用后,PCR及Western印迹法检测不同时间段Yap1、PDZ结合相关性转录共激活因子(TAZ)、Ⅰ型胶原的mRNA、蛋白相对表达量及Yap1、TAZ核质转位情况。随后设置空载质粒(vector)、vector+AngⅡ、Yap1 RNA干扰(shRNA)、Yap1 shRNA+AngⅡ四个组,Western印迹法检测Yap1、TAZ、Smad3、Ⅰ型胶原等蛋白相对表达量,CCK-8及EdU实验检测细胞增殖力。结果 BLM组肺纤维化明显,Yap1免疫组化表达增加,BLM+AngⅡ组肺纤维化程度和Yap1表达均高于BLM组(均P〈0.05)。体外实验中,AngⅡ不同刺激时间组Yap1、TAZ及Ⅰ型胶原的mRNA及蛋白相对表达量均显著高于0 h(均P〈0.05);其中,磷酸化Yap1蛋白相对表达量在2 h时达峰值。核质转位方面,24 h时AngⅡ组胞核中Yap1、TAZ相对表达量显著高于空白组(0.382±0.007比0.031±0.001,1.097±0.030比0.357±0.015),胞质中相对表达量显著低于空白组(0.323±0.058比0.418±0.044,0.858±0.059比1.201±0.015),AngⅡ+伊贝沙坦组胞核中Yap1、TAZ相对表达量显著低于AngⅡ组(0.323±0.058比0.418±0.044,0.858±0.059比1.201±0.015),胞质中相对表达量显著高于AngⅡ组(0.598±0.060比0.323±0.058,1.495±0.052比0.858±0.059)(均P〈0.05)。Yap1 shRNA+AngⅡ组Yap1、TAZ、Smad3及Ⅰ型胶原蛋白相对表达量均显著低于vector+AngⅡ组(均P〈0.05)。vector+AngⅡ组吸光度、EdU阳性细胞百分比均显著高于vector组,Yap1 shRNA+AngⅡ组吸光度、EdU阳性细胞百分比均显著低于vector+AngⅡ组
潘妙霞
郑伯俊
孙娜娜
郑泽茂
阳倩捷
孟莹
关键词:
肺纤维化
脂多糖诱导巨噬细胞释放的外泌体在小鼠急性肺损伤中的作用及其机制
被引量:10
2018年
目的探讨脂多糖诱导巨噬细胞(RAW264.7细胞)释放的外泌体在小鼠急性肺损伤中的作用及其机制。方法体外培养RAW264.7细胞,设置对照组和脂多糖刺激组,超速离心法提取两组细胞的外泌体,分别命名为对照EXO组和脂多糖EXO组。(1)体内实验:将18只C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法随机均分成正常对照组、正常外泌体组、脂多糖刺激外泌体组各6只,造模12h后放血处死,取肺组织行HE染色;行白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的免疫组化评价;Western印迹检测各组IL-1β、TNF-α、β-链蛋白、E-钙黏蛋白、紧密连接蛋白l(ZO-1)和封闭蛋白的相对表达量;行组织切片免疫荧光对比各组间封闭蛋白的表达差异。(2)体外实验:将磷酸缓冲盐溶液(PBS)、对照EXO组和脂多糖EXO组外泌体与小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(MLE-12细胞)共培养,设置空白对照组、对照EXO刺激组、脂多糖EXO刺激组。12h后检测胞中IL-1β、TNF-α和封闭蛋白的相对表达量。结果对照EXO组和脂多糖EXO组鉴定为外泌体。(1)体内实验:脂多糖刺激外泌体组肺组织出现肺泡腔及问质内广泛炎症细胞浸润,肺泡腔内有渗出液,肺泡隔增厚,肺泡及问质充血、出血,部分肺泡塌陷、不张等肺损伤表现;脂多糖刺激外泌体组肺组织中IL-18和TNF-α蛋白相对表达量均显著高于正常对照组、正常外泌体组(1.331±0.203比0.274±0.018、0.892±0.074;0.800±0.096比0.5964-0.025、0.441±0.061;均P〈0.05),脂多糖刺激外泌体组肺组织中封闭蛋白相对表达量均显著低于正常对照组、正常外泌体组(0.2514-0.021比0.862±0.029、0.453±O.013;均P〈0.05)。(2)体外实验:脂多糖EXO刺激组中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量均显著高于空白对照组、对照EXO刺激组(0.900±0.033比0.320±0.030、0.661
郑伯俊
张月
孙娜娜
黄文慧
孟莹
关键词:
急性肺损伤
巨噬细胞
外泌体
脂多糖
自噬对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化改善作用
目的 探讨博来霉素(Bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化中,自噬诱导剂rapamycin和自噬阻断剂3-Methyladenine对肺纤维化的影响.方法 6-8周C57小鼠随机分为4组,每组12只,分别为对照组...
阳倩捷
郑伯俊
孙娜娜
孟莹
关键词:
肺纤维化
自噬
氧化应激
博来霉素
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