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金属硫蛋白1H在儿童和青少年骨肉瘤血清中的表达及其对细胞增殖的影响被引量：7: 2017年; 目的检测金属硫蛋白1H（MT1H）在儿童和青少年骨肉瘤血清中的表达，分析MT1H与临床病理特征的关系，并探讨MT1H对人骨肉瘤细胞U2OS增殖能力的影响及其机制。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测MT1H在儿童和青少年骨肉瘤和骨良性疾病中表达情况，分析MT1H表达和骨肉瘤临床病理特征之间的关系。在体外将MT1H基因转染人骨肉瘤细胞U2OS，采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）和Wes－tern blot方法检测MT1H mRNA和蛋白的表达情况，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖，采用Western blot方法检测核因子（NF）－κB、抑制性κB（IκB）－α蛋白表达情况。结果MT1H在骨良性疾病和骨肉瘤血清中的表达水平分别为（0.51±0.52） μg/L和（2.17±0.78） μg/L，其在骨肉瘤血清中的表达水平明显升高（t＝－8.966，P〈0.05）。MT1H在Ⅰ～ⅡA期、ⅡB～Ⅲ期骨肉瘤血清中的表达水平分别为（1.98±0.69） μg/L、（2.45±0.82） μg/L，其表达水平呈逐渐升高趋势，差异有统计学意义（t＝－2.343，P〈0.05）。转染MT1H基因后，骨肉瘤细胞MT1H mRNA和蛋白表达均升高（均P〈0.05）。MTT结果显示，与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H真核质粒转染骨肉瘤细胞系U2OS 72 h后，细胞增殖加快。空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组A值分别为0.38±0.03、0.36±0.03、0.42±0.03；与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H转染组A值升高（F＝4.213，P〈0.05）。Western blot检测显示，空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组细胞中NF－κB的相对表达量分为0.56±0.05、0.53±0.05、0.92±0.07，IκB－α蛋白的相对表达量分别为0.64±0.06、0.62±0.09、0.34±0.08，与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H转染组NF－κB蛋白表达上调、IκB－α蛋白表达下调（F＝44.581、14.927，均P〈0.05）。结论MT1H在儿童和青少年骨肉瘤血清中表�; 侯新芳李帅吴晨徐淑宁李克王居峰; 关键词：骨肉瘤酶联免疫吸附试验增殖

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李帅

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