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张端阳
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
徐州医科大学附属淮海医院
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发文基金:
江苏省自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
邱伟
徐州医科大学附属淮海医院
王朋
徐州医科大学附属淮海医院
张盼
徐州医科大学附属淮海医院
潘晓峰
徐州医科大学附属淮海医院
孙勇
徐州医科大学附属淮海医院
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徐州医科大学
作者
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孙勇
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潘晓峰
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张盼
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张端阳
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王朋
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邱伟
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中华烧伤杂志
年份
1篇
2016
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Spl对肠三叶因子启动子基础转录活性的影响
被引量:1
2016年
目的寻找维持肠三叶因子(ITF)启动子基础转录活性的反应元件。方法以ITF启动子序列为模板,采用PCR方法获取不同长度及突变的ITF基因5’侧翼序列,插入pGL3-basle质粒,构建截短及突变荧光报告载体,进行以下实验。(1)按照随机数字表法(分组方法下同)将人胚胎肾293(HEK293)细胞分为pGL3-basic组、pGL3—300组、pGL3-280组、pGL3—260组、pGL3-240组、pGL3—220组、pGL3—200组,每组3孔,分别转染对应的质粒500ng及15ng海肾荧光素酶报告质粒pRL—TK,培养48h,单管型多功能检测仪检测细胞荧光素酶相对活性。(2)另取HEK293细胞,分为pGL3-basic组、pCL3—300组及突变体1、2、3、4组,每组3孔,分别转染pGL3-basic、pGL3—300及突变体1、2、3、4质粒500ng及15ngpRL—TK质粒。培养48h,同(1)检测荧光素酶相对活性。(3)另取HEK293细胞,分为空白对照组及10、50μmol/L光神霉素组,每组3孔,转染500ngpGL3—300质粒及15ngpRL·TK质粒后,空白对照组不加,后2组分别加10、50μmol/L光神霉素,培养24h,同(1)检测荧光素酶相对活性。(4)另取HEK293细胞,分为空白对照组及0.1、0.2、0.3μgpeDNA3.1-Spl组,每组3孔,转染500ngpGL3-300质粒及15ngpRL—TK质粒后,空白对照组不转染,后3组分别转染0.1、0.2、0.3μgpcDNA3.1-Spl质粒。培养48h,同(1)检测荧光素酶相对活性。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果(1)pGL3-basic组、pGL3-300组、pGL3.280组、pGL3—260组、pCL3-240组、pGL3—220组、pGL3—200组细胞荧光素酶相对活性分别为1.00、7.99±0.51、2.03±0.55、2.50±0.40、2.50±0.15、1.72±0.19、2.10±0.21,pGL3—280组、pGL3—260组、pGL3—240组、pGL3—220组、pGL3—200组细胞荧光素酶相对活性较pGL3—300组显著下降(P值均小于O.01)。(2)pGL3-basic组、pGL3.300组及突变体1、2、3、4�
孙勇
张盼
潘晓峰
张端阳
邱伟
王朋
关键词:
转录启动子
肠三叶因子
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