李影
- 作品数:6 被引量:26H指数:2
- 供职机构:东北林业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- RNAi载体构建新方法及其在植物次生代谢调控中的应用被引量:2
- 2017年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术具有专一性强、抑制效率高、可大规模操作、重复性好及在植物中可以孟德尔方式遗传等优点,被广泛应用于基因功能验证、代谢调控等方面。在植物代谢工程中,可通过RNAi方法抑制分支途径产物合成及改变代谢流的分配,调控目标物质的合成。对RNAi技术发生机制、高效RNAi载体构建方法及其在代谢调控中的应用进展进行系统概述,以期为利用RNAi技术进行代谢工程调控研究奠定理论基础和提供技术参考。
- 曲子越李影李林夕王朝焕王敏尹静
- 关键词:RNAI代谢调控次生代谢
- 山皂荚GjCYP71D1基因表达分析及在三萜合成中的功能鉴定
- 2023年
- 皂荚树含有重要的五环三萜化合物,因其广泛的药理活性而具有重要价值。本研究以山皂荚组培苗叶片为材料,通过RT-PCR方法克隆了一个CYP450新基因,并对其进行一系列生物信息学分析;采用qRT-PCR方法检测该CYP450基因、GjLus(羽扇豆醇合酶)基因在不同处理下(10μmol·L^(-1)ABA、100mg·L^(-1)GA3、50 mg·L^(-1)SA、100μmol·L^(-1)MeJA、5μmol·L^(-1)乙烯利和机械伤害)及不同组织部位的表达模式。研究结果表明,该CYP450为新基因,基因开放阅读框(ORF)为1533 bp,编码含有510个氨基酸,与决明(Senna tora)CYP71D10的相似度最高,为75.8%,暂命名为GjCYP71D1。GjCYP71D1的表达具有组织特异性,该基因在茎中和叶中表达量分别是根中的87.0%和89.9%。GjCYP71D1和GjLus响应不同生长调节物质的诱导,在MeJA、SA、GA3、ABA、乙烯利和机械伤害诱导下,均表现出相似的表达模式。通过瞬时侵染本氏烟草(Nicotiana benthamiana)发现GjCYP71D1具有催化白桦脂醇合成的功能,为山皂荚CYP450基因功能挖掘及鉴定奠定基础。
- 董明张玉琦李影武文博王硕孟春雨刘梦轻尹静
- 关键词:CYP450三萜化合物基因功能
- 3个白桦细胞色素P450基因生物信息学及表达分析被引量:4
- 2018年
- 【目的】研究白桦细胞色素P450基因表达的组织特异性,以及在茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、乙烯利和伤害处理下的基因表达模式。【方法】筛选白桦转录组,获得3个BpCYP450基因,分别命名为BpCYP4、BpCYP5、BpCYP14,利用生物信息学分析BpCYP450蛋白的分子结构特征及其与其他物种CYP450蛋白的亲缘关系。采用QRT-PCR技术,对白桦BpCYP450组织特异性、激素信号及伤害诱导下的表达特征进行分析。【结果】生物信息学结果表明BpCYP4、BpCYP5、BpCYP14 cDNA序列长度分别为1 569、1 584和1 530 bp,具有完整的开放阅读框(ORF),分别编码522、527和509个氨基酸,均为亲水性跨膜蛋白,主要定位于叶绿体。白桦BpCYP450与百脉根、扁豆及豌豆等豆科植物CYP450蛋白亲缘性较高。组织特异性分析结果显示,3个BpCYP450基因在叶和根中表达较高,茎中较低。激素信号及伤害诱导结果表明,3个BpCYP450基因不同程度地响应Me JA、SA、GA3、ABA、乙烯利激素信号及伤害诱导。【结论】3个BpCYP450基因均为CYP450基因家族的新成员,具有组织特异性及激素诱导表达特性,可能在白桦生长发育、抵御胁迫及代谢物合成中发挥重要作用。
- 杨杰孙璐王思瑶李影翟睿林香雨詹亚光尹静
- 关键词:白桦生物信息学分析
- 白桦BpMYB21基因的克隆及其表达模式分析被引量:2
- 2018年
- 【目的】研究了白桦(Betula platyphylla Suk.)MYB基因功能,分析其在茉莉酸(Me JA)和水杨酸(SA)诱导下的表达特性。【方法】以白桦为试材,通过RT-PCR等方法克隆得到1条白桦MYB转录因子家族基因序列,运用生物信息学方法,分析其蛋白质性质和亲缘关系,通过实时荧光定量PCR分析Me JA和SA诱导处理下该基因的表达特性及组织特异性。【结果】获得了1条新的白桦MYB转录因子家族基因,命名为BpMYB21,包含完整的开放阅读框,长度为1 014 bp,编码337个氨基酸。BpMYB 21蛋白与其他植物MYB氨基酸同源性为51%~64%,其中与胡桃(Juglans regia)MYB30-Like的亲缘关系最近。BpMYB21在白桦根、茎、叶中均有表达,且在叶中的表达量高于茎和根,但差异不显著;与对照相比,100μmol/L Me JA和50 mg/L SA分别处理白桦苗6 h时,BpMYB21在茎和叶中的表达较高,处理12~48 h逐渐降低。【结论】BpMYB21为MYB转录因子家族新成员,与胡桃MYB基因亲缘关系较近。该基因响应激素诱导,推测其可能在白桦生长发育及在次生代谢过程发挥重要作用。
- 孙璐杨杰王思瑶李欣李影徐志强詹亚光尹静
- 关键词:白桦基因克隆
- 温度胁迫对白桦丛生苗次生产物合成及抗逆酶积累的影响被引量:2
- 2021年
- 【目的】探究温度胁迫对白桦丛生苗三萜、黄酮及抗逆酶积累的影响,为提高白桦次生代谢产物积累以及工厂化生产奠定基础。【方法】利用不同浓度(0.5、1.0、2.0和5.0 mg/L)的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA),诱导产生白桦丛生苗及建立悬浮培养体系,同时对丛生苗进行温度胁迫诱导次生产物合成。【结果】附加2.0 mg/L 6-BA的NT固体培养基可诱导白桦愈伤组织获得白桦丛生苗。2种温度(45和4℃)胁迫下,白桦丛生苗中总三萜含量均比对照(25℃)有所提高,其中45℃处理4 h,恢复培养6 h后,总三萜含量比对照提高5.03倍。4℃处理白桦丛生苗1 h,并在24 h时取样,齐墩果酸含量比对照提高了14.52倍,最高含量达2.33 mg/g。4℃处理白桦丛生苗4 h,在恢复培养48 h时,黄酮含量比对照提高38.37%。同时明确温度胁迫下,4℃胁迫4 h,恢复培养72 h,超氧化物歧化酶(SOD)活性最高,比对照提高69.77%。经4℃处理1 h的丛生苗在96 h时,过氧化氢酶(CAT)活性达到最高峰,是对照的1.81倍。4℃处理1 h的丛生苗在恢复培养6 h时抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性比对照提高55.29%。当胁迫时间延长至4 h,在45℃处理下,黄酮含量与APX酶,SOD与齐墩果酸含量均呈显著负相关(P<0.05);经4℃处理,总三萜与APX(P<0.01)、CAT(P<0.05)分别呈极显著正相关和显著正相关;黄酮与SOD含量呈显著负相关(P<0.05);CAT与APX(P<0.01)、SOD(P<0.05)相关性达极显著和显著水平,3种抗逆酶协调发挥作用共同参与次生产物合成。【结论】2.0 mg/L的6-BA能成功诱导白桦愈伤组织产生丛生苗,并建立悬浮培养系。短时间高温或低温胁迫均可以刺激3种防御酶发生显著变化,3种酶相互协调共同参与并促进白桦丛生苗总三萜和黄酮物质的合成与积累。
- 李可鑫赵微徐林琳李影张宝莲詹亚光尹静
- 关键词:白桦丛生苗6-BA防御酶
- bHLH转录因子在茉莉酸信号诱导植物次生产物合成中的作用及分子机制被引量:17
- 2017年
- 在茉莉酸(jasmonic acid,JA)信号途径中,植物通过转录激活子和转录抑制子之间的合理协调来调控适当的防御反应及生长发育过程,从而适应多变的环境,以刺激次生产物有效合成,其中b HLH(basic helix-loop-helix)转录因子在响应JA信号诱导植物次生产物萜类合成中起重要调控作用。本文结合植物中b HLH转录因子的结构特点和JA信号在萜类物质合成中的作用,系统地阐述了b HLH转录因子在响应JA信号诱导萜类合成中的调控作用及分子机制,并探讨了b HLH类转录因子与MYB类转录因子互作参与次生代谢调控的过程。本综述为进一步深入揭示b HLH在植物萜类合成代谢调控网络中的分子功能和药用植物活性成分代谢途径的遗传改良提供理论参考。
- 李欣李影曲子越孙璐王思瑶詹亚光尹静
- 关键词:BHLH茉莉酸萜类