梁巍巍
- 作品数：8 被引量：4H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省产业技术研究与开发资金计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学理学更多>>
- 微小核糖核酸miR-766通过靶向调控环腺苷酸活化交换蛋白1促进高糖培养下心肌细胞凋亡被引量：2
- 2018年
- 目的探讨微小核糖核酸miR-766在不同葡萄糖浓度培养的心肌细胞中的表达水平，明确其对心肌细胞凋亡的影响及相关分子机制。方法在不同葡萄糖浓度条件下（正常糖5mmol／L、高糖15、25及35mmol／L）培养的心肌细胞中，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测miR-766的表达差异，以流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡情况，Western blot法检测各组环腺苷酸活化交换蛋白l（Epac-1）、Bax蛋白、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（caspase-3）活化片段蛋白表达水平。采用生物信息学预测miR-766的靶基因，并进一步采用双荧光素酶报告基因法进行验证。组间数据比较采用t检验。结果与5mmol／L相比，miR-766在15、25及35mmol／L组的心肌细胞中表达上调（3．40±0．38，4．61±0．34，6．17±0．42比0．97±0．04，t=11．13l-21．493，P〈0．05），而转染miR-766抑制剂后，细胞的凋亡率明显降低[（16．43±0．31）％比（26．45±0-31）％，t=39．566，P〈0．05]；Western blot结果表明，在人心肌细胞中miR-766高表达者Epac-1的蛋白表达减少（0．48±0．07比1．00±O．12，t=6．695，P〈0．05），而抑制miR-766的表达后Epac-1的表达增加（1．23±0．12比0．70±0．10，t=5．884，P〈0．05）；荧光素酶报告基因结果表明，miR-766模拟物或抑制剂与Epae-1基因3＇-非翻译区野生型报告基因共转染时，报告基因荧光素酶活性明显变化（3．22±0．07比5．01±0．96，6．98±0．61比5．01±O．96，t=-3．239～-3．008，P〈0．05）；在高糖培养条件下抑制miR-766表达能够部分拮抗高糖对Epac-1蛋白表达的抑制作用（0．80±0．05比0．53±0．05，t=6．810，P〈0．05）；在miR-766模拟物处理的H9e2细胞中回补Epae-1，easpase-3活化片段蛋白的表达则明显降低（O．67±0．07比1．07±0．12，t=-5．050，P〈0．05）。结论在高糖培养的心肌细胞中高表达的miR-7
- 孙振华梁巍巍管洪宇李海何筱莹刘娟刘烈华李延兵
- 关键词：微RNAS
- Nr2a1对棕榈酸诱导的Min6细胞凋亡的影响及分子机制
- 管洪宇郭衍李海梁巍巍何筱莹李延兵
- 人胰岛素受体基因R1174W错义突变的体外功能学研究
- 目的 人胰岛素受体基因(HIRWT)突变是导致A型胰岛素抵抗的遗传基础之一，我们先前的研究提示该基因突变所致严重胰岛素抵抗可能与肌肉糖原合成障碍有关。本研究采用体外细胞实验，探讨人胰岛素受体基因R1174W错义突变对胰岛...
- 黄知敏何筱莹许丽娟管洪宇梁巍巍李延兵
- 长链非编码RNA AC244502.3-201对甲状腺乳头状癌细胞增殖和迁移的影响
- 2020年
- 目的分析长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)AC244502.3-201在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)中的表达并探讨其对PTC细胞增殖、侵袭迁移的影响以及可能的分子机制。方法利用TANRIC数据库分析及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测AC244502.3-201在PTC中的表达情况。Coding Potential Calculator软件预测编码能力,qRT-PCR检测亚细胞定位。Smart Silencer敲低细胞内AC244502.3-201表达后,CCK-8法、EdU实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测侵袭迁移能力。qRT-PCR检测对NF-κB下游基因的影响,双荧光素酶报告实验和Western Blot实验检测NF-κB通路激活情况。结果在PTC中AC244502.3-201的表达显著升高。AC244502.3-201不具有编码蛋白的能力,主要定位于细胞浆(P<0.05)。敲低AC244502.3-201能抑制细胞增殖、侵袭和迁移(P<0.05)。敲低AC244502.3-201抑制了p65入核、NF-κB信号通路活性以及下游基因表达。结论在PTC中AC244502.3-201表达升高。敲低AC244502.3-201抑制了NF-κB通路激活及下游基因表达,最终抑制PTC细胞的增殖、侵袭迁移能力。
- 向涛梁巍巍柯文徐梓筠修玲玲卫国红
- 关键词：甲状腺乳头状癌NF-ΚB增殖迁移
- 孤儿核受体Nr2al对棕櫚酸诱导的Min6细胞凋亡的影响及其可能机制被引量：2
- 2019年
- 目的探讨孤儿核受体Nr2al对棕桐酸诱导的小鼠胰岛|3细胞系Min6凋亡的影响及可能机制。方法通过脂质体转染体系在小鼠胰岛B细胞系Min6中转染Nr2al的过表达质粒,研究Nr2al在棕櫚酸诱导P细胞凋亡中的作用。将细胞分为对照组Sector组、棕植1酸+Vector组和棕桐酸+Nr2al组,采用实时荧光定量PCR及免疫印迹检测棕桐酸对Nr2al及刺激因子过氧化物酶体增殖激活受体Y共刺激因子1型a(PGCla)表达的影响。通过Hoechst 33258对细胞核染色检测各组的细胞核形态,结合细胞凋亡蛋白酶3(Caspase-3)活性检测及免疫印迹分析细胞凋亡情况。进一步通过转染小干扰RNA抑制PGCla表达后检测对Min6细胞凋亡的影响。结果采用t检验进行统计分析。结果与Vector组相比,棕植]酸+Vector组活化的Caspase-3蛋白表达显示棕徊酸+Vector组较Vector组上升(3.158±0.105比1.000±0.096,<=-21.407,P<0.01);Nr2a 1表达明显下降(0.184±0.015比1.000+0.069,16.386,P<0.01),蛋白水平也明显下降(0.446±0.050比1,000±0.097,/=7.179,P<0.01);其共刺激因子PGC1 a的mRNA水平明显下降(0.625+0.047比1.000+0.090,t=5.242,P<0.01),蛋白水平也下降(0.505±0.044比1,000±0.027,1=13.499,P<0.01);过表达Nr2a 1可以部分逆转棕桐酸诱导的Min6细胞凋亡,其活性Caspase-3的表达下降(0.418±0.011比1.000±0.007"=63.739,P<0.01),且使得共刺激因子PGC 1 a在mRNA及蛋白水平分别均上升(1.961±0.198比1.000±0.072"=-6.453,P<0.01;2.203+0.157比1,000±0.079,/=-9.688,P<0.01),而过表达Nr2a1的Min6细胞中抑制PGCla表达后Cleaved caspase-3的表达较对照组上升(1.371±0.100比1,000±0.060,t=-4.514,P<0.05),差异均有统计学意义。结论Nr2al对棕桐酸诱导的小鼠胰岛0细胞系Min6细胞的凋亡有保护作用,PGCla促进Nr2al对Min6的保护作用。
- 郭衍李海管洪宇梁巍巍何筱莹李延兵
- 关键词：胰岛素分泌细胞凋亡
- TACSTD2通过ERK和JNK通路上调MMP2进而促进甲状腺癌细胞的侵袭
- 目的 探讨TACSTD2在甲状腺癌组织中的表达情况及与患者相关病理特征的关系。探讨在甲状腺癌细胞中异常表达TACSTD2对甲状腺癌细胞生物学功能的影响及可能的分子机制。方法 利用在线数据库TCGA的数据分析TACSTD2...
- 梁巍巍管洪宇李海卫国红何筱莹肖海鹏李延兵
- 维生素D受体对脂多糖诱导小鼠足细胞炎症反应、迁移能力和凋亡的影响
- 目的 足细胞在糖尿病肾病尿蛋白的发生和发展过程中起关键作用,我们使用脂多糖(LPS)刺激足细胞模拟糖尿病肾病时的炎症状态,观察维生素D受体(VDR)对LPS诱导的足细胞炎症反应、迁移能力和凋亡的影响,并初步探讨相关机制.
- 许丽娟管洪宇黄知敏方冬虹梁巍巍肖海鹏李延兵
- 人胰岛素受体基因R1174W错义突变的体外功能学研究
- 目的:本研究采用体外细胞实验,探讨人胰岛素受体基因(HIRWT)R1174W错义突变对胰岛素受体后信号转导通路功能的影响。方法:采用重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)获得包含R1174W突变的人胰岛素受体基因cDNA片...
- 黄知敏何筱莹许丽娟管洪宇梁巍巍李延兵
