李丹洋
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：云南省第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- CIK细胞作为载体介导重组溶瘤痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+靶向治疗大肠癌的体外实验研究
- 大肠癌包括结肠癌和直肠癌,是临床上最常见的消化道恶性肿瘤之一。手术切除是治疗大肠癌最有效、最重要的手段;但是,大肠癌的起病隐匿,早期无特殊的临床表现,所以当大肠癌患者发现时多为进展期。生物免疫治疗作为肿瘤综合治疗的组成部...
- 李丹洋
- 关键词：大肠癌CIK细胞CCL5SSTR2
- 含CCL5和SSTR2基因的重组痘病毒及其制备方法
- 本发明公开了一种用同源重组方法构建的含CCL5和SSTR2基因的重组痘病毒rVV‑CCL5‑SSTR2‑Luc+，该痘病毒的构建利用含人CCL5、SSTR2目的基因和Luciferase荧光素酶报告基因的穿梭质粒pSC6...
- 唐慧李丹洋张锦锦方敬敬严新民郭强
- 基因改造的溶瘤痘病毒在肿瘤治疗中的研究进展被引量：2
- 2016年
- 目前,肿瘤的标准治疗包括手术、放射疗法、化学疗法、温热疗法和生物/免疫疗法。溶瘤病毒治疗,即利用病毒的复制能力,选择性感染和破坏肿瘤细胞,同时保留正常细胞和组织,是肿瘤生物/免疫治疗的一个新疗法。基因治疗一直是肿瘤生物治疗的重要策略,利用基因工程策略在溶瘤病毒载体上插入抗癌基因,将病毒治疗与基因治疗有机结合,成为具有很强杀伤作用的基因–病毒治疗手段。近年来,以溶瘤痘病毒为载体的肿瘤基因治疗受到较多关注,通过基因工程策略对痘病毒进行改造是提高其抗肿瘤作用的重要策略。目前,用于基因工程改造的溶瘤痘病毒主要有Wyeth株、WR(Western Reverse)株、Lister株、Copenhagen株和天坛株。该文就目前对痘病毒进行基因工程改造的常见形式以及经基因工程改造的痘病毒用于治疗肿瘤的研究进展作一综述。
- 李丹洋唐慧
- 关键词：基因改造肿瘤治疗
- 含CCL5和SSTR2基因的重组痘病毒及其制备方法
- 本发明公开了一种用同源重组方法构建的含CCL5和SSTR2基因的重组痘病毒rVV‑CCL5‑SSTR2‑Luc+，该痘病毒的构建利用含人CCL5、SSTR2目的基因和Luciferase荧光素酶报告基因的穿梭质粒pSC6...
- 唐慧李丹洋张锦锦方敬敬严新民郭强
- 重组溶瘤痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+的构建及其杀瘤活性
- 2020年
- 目的在体外构建携带CCL5和SSTR2双基因的重组溶瘤痘病毒,并初步检测其溶瘤活性。方法利用基因工程策略,分步构建重组痘病毒真核表达质粒pSC65-CCL5-SSTR2-Luc+;经同源重组痘病毒Western Reverse(WR)株和23轮筛选纯化后,获得纯化的重组溶瘤痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+;经扩大培养及浓缩纯化后获得高滴度的重组溶瘤痘病毒,用ELISA和Western blot分别验证感染重组溶瘤痘病毒的HeLa细胞CCL5和SSTR2的表达变化;用CCK-8法检测了rVV-CCL5-SSTR2-Luc+对两株肿瘤细胞系的杀伤活力。结果成功构建了重组痘病毒真核表达质粒pSC65-CCL5-SSTR2-Luc+;经同源重组、筛选纯化和浓缩后,获得滴度为9.4×10^8 PFU/mL的重组溶瘤痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+;ELISA和Western blot结果表明,HeLa细胞感染rVV-CCL5-SSTR2-Luc+后,其CCL5和SSTR2蛋白表达水平显著高于对照组rVV-Luc+(分别为P<0.05和P<0.01);CCK8结果表明,rVV-CCL5-SSTR2-Luc+对人胚肾上皮细胞HEK293T杀伤活力极低,而rVV-CCL5-SSTR2-Luc+对两株肿瘤细胞系的杀伤活力均随感染时间逐渐增强。并且rVV-CCL5-SSTR2-Luc+对肿瘤细胞的杀伤活力较之对照组rVV-Luc+均显著升高(HCT116:感染48 h时P<0.05;Hela:感染48 h时P<0.05,72 h时P<0.01)。结论本研究成功构建并获得了纯化的重组痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+,并初步验证了其杀瘤活性,为开展后续体内外实验奠定了实验基础。
- 李丹洋方敬敬唐慧
- 关键词：同源重组CCL5SSTR2
