张箭
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
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- Sulforaphane抑制热灭活大肠杆菌诱导的HeLa细胞凋亡被引量：1
- 2019年
- 目的研究Sulforaphane(SFN)对细胞凋亡的抑制作用及其在脓毒症中对细胞的保护作用。方法将HeLa细胞分为4组:对照组、热灭活大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)处理组、SFN处理组(SFN组)和热灭活E.coli+SFN组。酶联免疫反应检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α;流式细胞术(annexin V/propidium iodide双染)检测细胞凋亡;免疫荧光检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量及线粒体膜电位的变化;Western blot检测活化的caspase 3、bax和bcl-2水平。结果热灭活E.coli处理后,细胞产生的炎症因子IL-1β[(121.13±8.44)pg/mL比(36.67±5.82)pg/mL,P<0.05]和TNF-α[(123.83±7.32)pg/mL比(20.63±1.91)pg/mL,P<0.05]明显升高、凋亡细胞数明显增加[(32.49±3.96)%比(12.52±1.37)%,P<0.05]、活化的caspase 3[(2.28±0.19)比(1.01±0.19),P<0.05)]和BAX[(4.81±0.80)比(1.04±0.25),P<0.05)]水平明显升高,而bcl-2[(0.27±0.08)比(0.96±0.18),P<0.05)]水平明显降低。用SFN处理后(包括SFN组、热灭活E.coli+SFN组),IL-1β[(45.41±13.16)pg/mL比(121.13±8.44)pg/mL,P<0.05],TNF-α[(30.3±6.0)pg/mL比(123.8±7.3)pg/mL,P<0.05]水平明显降低、凋亡细胞明显减少[(11.34±2.05)%比(32.49±3.96)%,P<0.05]、活化的caspase3[(1.01±0.07)比(2.282±0.19),P<0.05)]、BAX[(2.15±0.14)比(4.81±0.80),P<0.05)]明显减少,而bcl-2[(1.34±0.18)比(0.27±0.08),P<0.05)]水平明显增加。与此相对应,与灭活E.coli处理的细胞相比较,加入SFN(包括SFN组和热灭活E.coli+SFN组),ROS水平明显下降[(1.27±0.17)比(6.30±1.50),P<0.05)],而线粒体膜电位明显上升[(1.18±0.10)比(0.14±0.01),P<0.05)]。结论SFN可有效抑制热灭活E.coli诱导的HeLa细胞调亡、稳定线粒体膜电位、降低ROS、抑制炎性因子的产生。因此,SFN可能作为脓毒血症时保护细胞的药物。
- 张箭张箭瞿丛王瑶王瑶赵文然
- 关键词：SULFORAPHANE细胞凋亡活性氧炎症因子
- 心肌缺血动物实验技术方法在机能实验教学中的创新
- 2020年
- 心肌缺血动物实验技术方法是目前教学中较为常见的教学方法,应用相对广泛。心肌缺血动物实验技术方法的准备方式有很多种,其中最为常见的是结扎左冠状动脉前降支复制心肌缺血模型。经过多年的不断探索和创新,心肌缺血动物实验技术在机能实验教学中的应用也在不断更新。接下来,我们主要探讨心肌缺血动物实验技术方法在机能实验教学中创新方法。
- 谷东方张箭刘妍妍任康悦任珊
- 关键词：心肌缺血动物实验实验教学
- 抗B组柯萨奇病毒3型3C蛋白多克隆抗体的制备及初步应用
- 2023年
- 目的制备抗B组柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CVB)3C蛋白的多克隆抗体。方法通过聚合酶链式反应从pcDNA3.1(+)-EGFP-3C中扩增编码3C的DNA片段,构建pET28a(+)-3C-6His表达载体,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli,E.Coli)BL21(DE3)以表达3C重组蛋白。优化表达条件及菌体蛋白的提取方法,经超声破碎制备菌体总蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后,用氯化钾进行胶染色,切胶回收相对分子质量为26000的蛋白,即纯化的3C重组蛋白(3C-6His的相对分子质量为26000)。用纯化的1 mg 3C重组蛋白加等量弗氏佐剂免疫新西兰大白兔,共免疫5次,每次间隔1周,免疫结束后1周取兔血清,检测抗体的特异性。结果在相对分子质量为26000的位置检测到了3C-6His融合蛋白的表达,成功构建了高效表达带His标签的3C重组蛋白载体。重组3C蛋白原核优化表达条件为37℃培养细菌6 h,加0.05 mmol/L异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导。经SDS-PAGE分离菌体总蛋白,得到了纯化的3C重组蛋白。获得的兔免疫血清可以结合E.Coli及HeLa细胞表达的3C蛋白,还能识别感染CVB3或肠道病毒A71的HeLa细胞中表达的3C蛋白。结论获得了抗CVB33C蛋白酶的多克隆抗体,这一抗体可特异结合肠道病毒的3C蛋白酶,为进一步研究3C蛋白酶在肠道病毒致病机制中的作用奠定了基础。
- 牛孙敏张箭王立鑫王瑶赵朔暄邵恩泽沃晓嫚赵文然
- 关键词：B组柯萨奇病毒多克隆抗体
- 一种超声波强度实时监测装置
- 本实用新型公开了一种超声波强度实时监测装置，其包括：超声波发生装置、超声波转换装置和超声波强度输出装置，超声波转换装置包括铝柱、比色皿、暗盒、检测光纤、波分复用器、解调器、泵浦光源、驱动电路和隔离器，其中，超声波发生装置...
- 田野张箭陈海波郭淑媛田振
- 文献传递
- 兔肾血管性高血压模型的建立
- 张箭姚剑挺田野
- 一种用于治疗心肌缺血再灌注损伤的新型纳米马达的制备方法及应用
- 一种用于治疗心肌缺血再灌注损伤的新型纳米马达的制备方法及应用，属于生物医学技术和纳米材料的交叉领域。本发明具体涉及通过修饰介孔二氧化硅连接PSGL1(P‑选择素配体)和脂肪酶，获得了脂马达LNMs‑P，通过提高线粒体功能...
- 张箭王继航马浩然孙佳旭任康悦赵丰俊周佳怡
