刘青芝
- 作品数：7 被引量：56H指数：4
- 供职机构：南京中医药大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 初均速法预测不同包装金银花药材的有效期被引量：4
- 2017年
- 目的:采用初均速法研究温度和湿度对金银花稳定性的影响,预测不同包装条件下金银花药材的有效期,探讨金银花适宜的包装及贮藏条件。方法:通过温度和湿度加速试验,测定10种常用包装条件下金银花中绿原酸含量,分析不同包装金银花的降解动力学参数,以初均速法预测样品的有效期,并结合两年的留样贮藏试验判断结果的可靠性。结果:温度和湿度加速试验表明初均速lnv0i与1/T及Hr线性关系良好,预测得到常温常湿下不同包装金银花的有效期:玻璃瓶(棕色4.17年,透明4.01年);透明聚乙烯塑料薄膜袋(15丝3.62年,10丝1.52年,6丝0.84年);透明塑料瓶3.67年;白色塑料编织袋0.86年;编织袋内衬聚乙烯薄膜袋(加10丝2.82年,加6丝1.39年);无包装0.46年。两年留样观察的结果与初均速法预测结果基本相符。结论:初均速法可应用于预测多因子作用下金银花的有效期;大量金银花仓储时包装宜选用较厚的聚乙烯薄膜袋或编织袋内衬聚乙烯薄膜袋,家庭日常贮藏宜选择棕色玻璃瓶;贮藏时需置于阴凉干燥处,以保证其质量。
- 韩赟谷巍沈夕坤巢建国刘青芝桑晓华蒋玲
- 关键词：初均速法金银花贮藏有效期
- 不同产地金银花及其掺杂叶中活性成分比较研究被引量：11
- 2017年
- 目的比较研究三大产地5个品种金银花及其掺杂叶活性成分含量及指纹图谱相似度,为其优质优价采购以及资源综合利用提供参考。方法采集山东大毛花、鸡爪花和四季花、河南豫封一号和河北巨花一号不同茬次的金银花,分离其掺杂叶,测定并比较92份样品中活性成分的含量和HPLC指纹图谱相似度。结果 5个品种金银花活性成分含量均随采收时间呈先降后升趋势,头茬花含量最高,二茬花含量最低;绿原酸含量头茬花大毛花最高,四茬花巨花一号最高,木犀草苷含量不同品种间未体现差异;不同品种金银花HPLC指纹图谱相似度在0.9以上,豫封一号与其它品种相似度相对较低;掺杂叶的绿原酸和木犀草苷含量均高于金银花,HPLC指纹图谱与金银花相似度为0.815~0.892。结论头茬花和四茬花品质较高,头茬花以大毛花质量为优,四茬花以巨花一号质量较佳;掺杂叶不能与金银花混用,但其活性成分含量高于金银花。本研究为金银花品质评价和掺杂叶的开发利用提供了科学依据。
- 韩赟谷巍沈夕坤蒋玲桑晓华刘青芝
- 关键词：金银花绿原酸木犀草苷指纹图谱
- 建泽泻鲨烯合酶原核表达、功能验证及其免疫检测研究被引量：4
- 2017年
- 泽泻鲨烯合酶(Ao SS)催化法呢基焦磷酸[(farnesyl diphosphate,FPP)]合成鲨烯,是碳源流向原萜烷型三萜生物合成的关键调节酶。为深入研究Ao SS基因的功能及表达,课题组将前期克隆获得的建泽泻鲨烯合酶基因(accession No.JX866770)的开放阅读框(ORF)构建到原核表达载体p Czn1上,并在大肠杆菌BL21(Roseta)中进行诱导表达,诱导表达出的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,经纯化获得高纯度的目的蛋白;以此目的蛋白进行体外酶促反应验证其功能,其结果显示该目的蛋白具有催化法呢基焦磷酸生成鲨烯的活性;为进一步研究其表达规律,在此基础上,利用该蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体并纯化,ELISA检测抗体效价大于1∶51 200,Western blotting检测表明其具有较好的特异性;用制备得到的抗体免疫检测建泽泻Ao SS在不同组织中的表达情况,结果显示建泽泻块茎中Ao SS表达最高,其次为叶,根中表达甚微。原核表达载体的成功构建、基因功能的进一步验证及快速免疫检测方法的建立,为进一步开展Ao SS基因功能及其调控的研究奠定基础,为泽泻资源性成分原萜烷型三萜的合成生物学应用提供科学依据。
- 刘青芝谷巍吴启南巢建国桑晓华刘琪王小浩
- 关键词：鲨烯合酶原核表达免疫检测
- 茅苍术内参基因筛选及其在活性成分生物合成研究中的应用被引量：14
- 2017年
- 本研究选取茅苍术转录组数据库中18S rRNA、β-Actin、EF-1α、GAPDH、UBQ1和UBQ2作为候选内参基因,运用实时荧光定量PCR技术分析6种候选内参基因在正常和干旱胁迫条件下不同组织中的表达,并用Delta CT、geNorm、Norm-Finder、Best Keeper及RefFinder等方法评价候选内参基因的表达稳定性。结果表明,UBQ2和EF-1α在正常条件下不同组织中的表达均较稳定,在干旱胁迫下EF-1α的表达最稳定。在此基础上,以UBQ2作为内参基因,研究正常条件下茅苍术活性成分生物合成关键酶HMGR、FPPS基因在其开花初期不同组织中的表达特性,结果显示花中HMGR、FPPS基因相对表达量均最高,根茎次之,茎和叶中相对表达量均较低。
- 桑晓华谷巍巢建国刘青芝蒋玲韩赟周乐章
- 关键词：茅苍术内参基因
- 濒危药用植物茅苍术法呢基焦磷酸合酶基因克隆及其表达分析被引量：14
- 2017年
- 目的克隆茅苍术Atractylodes lancea倍半萜类成分生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因全长并分析其表达规律。方法以茅苍术总RNA为模板,运用同源克隆法和RACE技术克隆茅苍术FPPS基因(Al FPPS)的c DNA全长,并进行生物信息学分析;用q RT-PCR和GC-MS分析不同生长阶段FPPS在茅苍术根茎中的表达及倍半萜类成分量变化,并分析二者的相关性。结果获得Al FPPS基因全长c DNA为1 320 bp(Gen Bank accession no.KX443242),含一个长1 029 bp的开放阅读框,编码342个氨基酸,包含5个保守功能域,其中2个富含天冬氨酸(DXXDD)。q RT-PCR及GC-MS结果显示不同时期茅苍术Al FPPS基因表达量与倍半萜类成分量呈显著正相关。结论首次克隆获得Al FPPS基因的全长c DNA,初步证明Al FPPS基因是茅苍术倍半萜类成分生物合成途径中的重要调控位点,为茅苍术倍半萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据。
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- 关键词：茅苍术基因克隆基因表达
- 卷柏复苏过程中抗氧化系统响应机制及海藻糖含量变化被引量：11
- 2016年
- 本文模拟卷柏复苏过程,检测在不同脱水和复水时间条件下卷柏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)含量、膜透性及海藻糖含量,研究卷柏复苏过程中抗氧化系统响应机制及海藻糖变化规律,并探讨其复苏机理。研究结果表明:卷柏在含水量极低的情况下,通过复苏作用可基本恢复至初始状态;SOD、CAT和POD活性,MDA含量以及细胞膜透性均随着脱水时间的延长而上升,随着复水时间的延长而下降;海藻糖含量亦随着脱水时间的延长而增加,随着复水时间的延长而减少。卷柏抗氧化系统在复苏过程中启动其保护酶防御机制抵抗水分胁迫,而海藻糖在卷柏保护生物分子过程中发挥着重要作用。
- 李红芳谷巍席彩彩孙红梅刘青芝
- 关键词：卷柏抗氧化系统海藻糖
- 东方泽泻实时荧光定量PCR内参基因的筛选及AoSS基因的组织表达特性分析被引量：4
- 2018年
- 【目的】筛选适用于东方泽泻实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的内参基因,并分析其鲨烯合酶基因(AoSS)的表达特性,为后续研究东方泽泻原萜烷型三萜生物合成调控及诱导机制打下基础。【方法】从东方泽泻转录组中选取内参基因18S rRNA、EF1α、GAPDH、ACT、UBQ和UBC,应用qRT-PCR检测其在不同组织和激素处理下的表达情况,并借助Delta CT、GeNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder对其表达稳定性进行分析评价。以筛选到的内参基因分析AoSS基因在不同组织中的表达情况。【结果】18S r RNA、GAPDH和EF1α基因在东方泽泻不同组织的表达稳定性较高,但18S rRNA、UBC和EF1α基因在不同激素处理下的表达稳定性均较高。以18S rRNA、GAPDH和EF1α基因为内参分析AoSS基因在东方泽泻不同组织中的表达量情况,结果显示,AoSS基因在东方泽泻不同组织中均有表达,其表达情况基本一致,均在东方泽泻块茎中表达量最高,其次是叶柄和叶,而在根中表达量最低。【结论】18S rRNA、GAPDH和EF1α基因是研究东方泽泻不同组织中基因表达分析的首选内参基因;18S rRNA、EF1α和UBC基因是研究激素处理下基因表达的首选内参基因。AoSS基因的表达具有组织特异性,其可能在东方泽泻的生长发育中发挥重要的调控功能。
- 刘青芝谷巍孙云飞吴启南巢建国桑晓华王小浩刘琪
- 关键词：内参基因
