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史新竹
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2
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H指数:1
供职机构:
哈尔滨医科大学地方病控制中心碘缺乏病防治研究所
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国家自然科学基金
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相关领域:
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申红梅
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甲基乙基酮-细胞外信号调节蛋白激酶信号传导通路在哺乳期乳腺摄碘中的作用
2016年
目的观察不同浓度17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)或甲基乙基酮(MEK)信号通路抑制剂U0126对小鼠哺乳期乳腺细胞MEK、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)和钠/碘同向转运体(NIS)mRNA和蛋白表达,探讨MEK-ERK信号传导通路在哺乳期乳腺细胞摄碘中的作用。方法采用细胞体外培养的方法,对Balb/C小鼠哺乳期乳腺细胞进行传代培养,观察不同含量(0.0008、0.0040、0.0200、0.1000、0.5000mg/L)E2刺激后,小鼠哺乳期乳腺细胞MEK、ERK和NISmRNA表达;细胞分组为U0126+E2组[加入MEK的抑制剂U0126(20μmmol/L)30min后,再加入E2(0.1mg/L)]、E2组和对照组,培养24h后,收集样本。用实时荧光定量PCR方法检测小鼠乳腺原代细胞中MEK、ERK和NISmRNA表达:蛋白质免疫印迹(Westernblot)方法检测小鼠乳腺原代细胞总ERK、磷酸化ERK和NIS蛋白表达。结果在E2刺激试验中,随着E2含量的不断升高,哺乳期乳腺细胞ERK、NISmRNA的表达量逐渐增加(F=28.23、18.37,P均〈0.05)。在MEK抑制实验中,E2组NISmRNA的表达量(1.90±1.36)较U0126+E2组(0.90±0.39)和对照组(0.76±0.18)高.组间比较差异均有统计学意义(t=3.218、2.737,P均〈0.05);在总ERK蛋白表达中,E2组(1.62±0.30)最高,与U0126+E2组(1.19±0.32)和对照组(1.25±0.27)比较,差异均有统计学意义(t=2.401、2.246,P均〈0.05);ERK磷酸化后.E2组磷酸化ERK蛋白表达(0.97±0.02)比U0126+E2组(0.76±0.18)高,组间比较差异有统计学意义(t=-2.840,P〈0.05);E2组NIS蛋白表达(0.49±0.08)比U0126+E2抑制组(0.37±0.04)和对照组(0.41±0.03)高,组间比较差异均有统计学意义(t=3.286、2.294,P均〈0.05)。结论E2激活MEK-ERK信号通路,上调哺乳期乳腺细胞ERK、NISmRNA及蛋白的表达。抑制该通路后,
徐朋
金星
史新竹
刘丽香
申红梅
关键词:
哺乳期
乳腺细胞
雌二醇
细胞外信号调节蛋白激酶
磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白激酶B信号通路在哺乳期乳腺细胞钠碘转运体表达中的作用
被引量:2
2017年
目的探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,P13K).蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路在调节哺乳期乳腺细胞钠碘转运体(Na+-I^-symporter,NIS)表达中的作用,以及不同碘水平对该通路的影响。方法将原代培养的小鼠哺乳期乳腺细胞分为3组:①对照组[0μmol/LP13K抑制剂LY294002+0μg/L胰岛素样生长因子I(insulin—like growth factorI,IGF—I)];②刺激组(50μg/LIGF—I);③抑制组(40μmol/LLY294002+50μg/LIGF—I)。此外,将原代培养的小鼠哺乳期乳腺细胞按不同碘水平(0、5、50、1000、3000μg/L)处理分为低碘1、2组,适碘组,高碘1、2组,并加入IGF-I(50μg/L)刺激。采用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测上述各组细胞中AKT、NISmRNA及蛋白表达水平。结果刺激组AKTmRNA表达水平(1.497±0.550)高于抑制组(0.777±0.108,P〈0.05),而刺激组NISmRNA及蛋白表达水平(0.783±0.187、0.618±0.103)均低于抑制组(2.430±1.423、1.417±0.250,P均〈0.05)。随着碘水平的增加,除高碘1组(1.090±0.356)外,低碘1、2组,适碘组,高碘2组AKTmRNA表达水平(1.758±0.893、1.320±0.538、1.003±0.006、0.745±0.307)为逐渐下降趋势;低碘1、2组,适碘组,高碘1、2组NISmRNA(2.259±0.682、1.823±0.332、1.409±0.366、1.321±0.405、1.150±0.454)及总AKT蛋白(0.640±0.106、0.601±0.081、0.583±0.089、0.555±0.097、0.532±0.023)表达水平均呈下降趋势;除低碘2组(0.484±0.179)外,NIS蛋白表达水平(0.556±0.199、0.502±0.179、0.455±0.126、0.435±0.138)呈下降趋势;除低碘2组(0.076±0.045)外,p-AKT蛋白表达水平(0.078±0.049、0.079±0.040、0.085±0.055、0.095±0.051)呈上升趋势。结论PI3K—AKT信号通路在调节哺乳期乳腺�
金星
史新竹
刘丽香
庞怡
关云凤
申红梅
关键词:
碘
钠碘转运体
胰岛素样生长因子I
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