李闰婷 作品数:25 被引量:11 H指数:2 供职机构: 郑州师范学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省自然科学基金 国家级大学生创新创业训练计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
一种抗艰难梭菌肠毒素A的抗体 本申请属于抗体制备技术领域,具体涉及一种抗艰难梭菌肠毒素A的抗体。该抗体为结合艰难梭菌毒素A的全人源抗体,由人源轻链可变区VL和重链可变区VH构成。基于现有噬菌体抗体库技术的成熟发展,本申请筛选获得了一个对艰难梭菌毒素A... 王林青 宋月 张艺璇 李闰婷 张丽萌 陈龙欣文献传递 绵羊粒细胞集落刺激因子原核表达与提纯及用于颗粒细胞培养的效果 被引量:1 2020年 文中旨在研究粒细胞集落刺激因子(Granule cell stimulating factor,GCSF)对绵羊颗粒细胞体外培养过程中细胞增殖和凋亡的影响,明确GCSF对绵羊颗粒细胞生存的调节作用,为今后该蛋白用于羊繁育方面的研究奠定基础。原核克隆表达纯化羊GCSF蛋白,纯化的蛋白用M-NSF60细胞检测生物学活性,将纯化的GCSF添加到颗粒细胞培养基中作为试验组,以培养基中未添加GCSF的细胞为对照,利用Alarmarblue检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化。结果表明,羊GCSF可以原核表达并纯化,并且具有生物学活性。在24 h和48 h时,在0.06–600 ng/mL的范围内随着加入GCSF的终浓度增加,细胞活力升高。试验组颗粒细胞体外培养24 h后,与阴性对照相比,细胞周期的分布显著改变,S期细胞比例显著减少(P<0.05),G2/M期细胞比例显著增多(P<0.05)。试验组凋亡率和对照组相比,48 h检测时凋亡率显著降低(P<0.05)。综上表明,GCSF在体外培养的绵羊颗粒细胞中,可调控绵羊颗粒细胞周期,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。 李闰婷 李闰婷 陈龙欣 何海迎 张丽萌 杨若晨 王泳 刘月琴 段春辉 刘月琴关键词:粒细胞集落刺激因子 颗粒细胞 细胞活力 细胞周期 一种抗小鼠RCN3蛋白单克隆ScFv抗体及其淘选方法 本发明属于生物技术领域,涉及一种抗体及抗体的开发和生产,具体涉及一种抗小鼠RCN3蛋白单克隆ScFv抗体噬菌体文库及其淘选方法。所述单克隆ScFv抗体的碱基序列如SEQ ID NO:10所示,所述碱基序列对应的氨基酸序列... 马润林 姜远达 李闰婷 陈龙欣 张丽萌 兰燕虎 李永超文献传递 进行抗体表达和组装的重组系统及应用 本发明属于分子生物学和蛋白质技术领域,具体涉及抗体表达和组装的重组系统及应用,公开一种表达抗体重链和轻链的真核表达载体,其目的是提供一种重组真核表达载体及其构建方法,便于表达各类抗体。本发明还公开了pRTL1‑HC和pR... 李闰婷 张丽萌 陈龙欣 张捷 王峰 马润林文献传递 一种抗蝗虫微孢子虫AlocSWP2孢壁蛋白ScFv单克隆抗体及其淘选方法 本发明属于生物技术领域,涉及一种抗体及抗体药物的开发和生产,具体涉及一种抗蝗虫微孢子虫<I>Aloc</I>SWP2孢壁蛋白ScFv单克隆抗体及其淘选方法。所述ScFv单克隆抗体由轻链可变区V<Sub>L</Sub>和重... 陈龙欣 李闰婷 马润林 张丽萌 张龙 兰燕虎文献传递 绵羊FHL2蛋白原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备 被引量:2 2021年 通过表达和纯化重组的绵羊FHL2抗原蛋白和制备其多克隆抗体,用于研究该蛋白的生物学功能及绵羊繁殖调控的作用机制。研究采用PCR技术扩增绵羊FHL2蛋白的编码序列,利用限制性内切酶双酶切后插入pET28a-sumo中,加入0.5 M IPTG诱导蛋白表达,利用Ni-NTA纯化获得48 ku的重组FHL2蛋白。以重组FHL2蛋白为抗原,混合佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,获得抗FHL2的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示抗体效价达到16400。通过转染pEGFP-C1-FHL2质粒至HEK 293F细胞,提取细胞总蛋白,利用制备的抗FHL2多克隆抗体检测蛋白的结合力,具有良好的免疫原性,为研究FHL2蛋白的生物学功能及繁殖调控机制提供良好的基础材料。 聂晓宁 李闰婷 陈龙欣 李玉华 聂文营 张丽萌 王林青关键词:绵羊 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 绵羊FHL2基因酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定 被引量:2 2020年 为了利用绵羊卵巢酵母双杂交cDNA文库筛选与FHL2蛋白相互作用的宿主蛋白,构建重组诱饵载体pGBKT7-FHL2,试验从绵羊卵巢组织中提取总RNA并反转录为cDNA,依据FHL2基因核苷酸序列设计特异性引物,利用PCR技术扩增FHL2目的片段,连接到经限制性内切酶EocRⅠ和BamHⅠ酶切后的酵母空载体pGBKT7上,并转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,进行PCR鉴定及测序比对分析,将构建好的重组诱饵载体pGBKT7-FHL2转化到酵母Y2HGlod感受态细胞中,利用酵母双杂交系统检测其表达情况、自激活活性及细胞毒性。结果表明:PCR扩增出大小约为876 bp的目的条带;成功构建出重组诱饵载体pGBKT7-FHL2,测序结果与NCBI中预测的FHL2碱基序列同源性为100%;重组诱饵载体pGBKT7-FHL2可在酵母Y2HGold感受态细胞中表达FHL2蛋白,对酵母Y2HGold感受态细胞无自激活活性和毒性作用。说明试验成功构建出重组诱饵载体pGBKT7-FHL2,通过检测证明该重组诱饵载体能够用于酵母双杂交系统筛选互作蛋白。 张丽萌 张丽萌 李闰婷 陈龙欣 李闰婷 陈龙欣 王林青 刘爱菊 田树军 刘爱菊关键词:FHL2 诱饵载体 酵母双杂交 毒性检测 非天然氨基酸pBpa在IL1β抗原表位的嵌入及其表征 2022年 为了探究表位中嵌入光敏型非天然氨基酸的蛋白质与其特异性抗体的光交联反应及其产物,基于基因密码子扩展技术,原核表达嵌入携带功能基团的非天然氨基酸蛋白质IL1β-L67pBpa,通过Western blot方法验证该突变体蛋白及其抗体的光交联功能.结果表明,本研究成功构建了pET28a-IL1β-L67TAG突变体质粒用于原核表达,在蛋白质的指定位点嵌入非天然氨基酸pBpa,并得到了高效表达的IL1β-L67pBpa.365 nm紫外光照射后,该突变体中的非天然氨基酸pBpa光敏基团与抗体中的氨基酸在空间距离靠近时,pBpa嵌合体能与其表位抗体(康纳单克隆抗体)通过共价键的光交联形成新的复合物.本研究证实了将非天然氨基酸(活性基团)插入到蛋白质特定位点的可行性. 李闰婷 马韩轲 张丽萌 聂晓宁 代冰雪 王林青 王林青关键词:非天然氨基酸 抗体 蛋白质相互作用 光交联 重组载体的构建方法及其构建的重组载体及应用 本发明涉及分子生物学和蛋白质技术领域,具体涉及重组载体的构建方法及其构建的重组载体及应用。本发明提供的构建方法操作简便,本发明提供的重组载体能够表达包括IgG抗体、Fab抗体、Fv抗体、人源化ScFv‑Fc抗体以及鼠/人... 李闰婷 陈龙欣 张丽萌 聂晓宁 马润林 王峰文献传递 一种全人源噬菌体ScFv天然抗体文库的构建方法及其应用 本发明涉及生物技术领域,公开了一种噬菌体ScFv抗体文库的构建方法及其应用,该构建方法包括:1)以cDNA为模板,利用PCR扩增ScFv抗体的重链可变区和引ScFv抗体的轻链可变区;2)以ScFv抗体的重链可变区和轻链可... 张丽萌 陈龙欣 李闰婷 聂晓宁 马润林 王峰