- 鞘内注射Fyn-PSD-95拮抗剂对脊神经结扎大鼠的作用
- 2016年
- 目的：观察鞘内注射Fyn—PSD-95拮抗剂Tat—FynP对L5脊神经结扎（SNL）大鼠痛觉过敏行为的影响，并探讨其作用机制。方法：60只SD大鼠随机分为5组（n=12）：空白组（N）、假手术组（S）、SNL组（C）、mTat—FynP给药组（M）、Tat—FvnP给药组（T）。N组不做任何处理，S组只暴露L5脊神经，C、M、T组大鼠行SNL术。C、M、T组于造模后第3～6天每天鞘内给予3％DMSO、mTat—FynP、Tat—FvnP。测定造模前后各组大鼠的机械刺激缩足反应阈值（MWT）及热刺激缩足潜伏期（TWL），Western blot检测脊髓腰膨大p-NR2B水平，免疫共沉淀检测Fyn与PSD-95的相互作用。结果：与C组比较，T组大鼠脊髓背角p-NR2B蛋白含量明显降低（P〈0．01），MWT及TWL明显增高（P〈0．01），Tat—FynP抑制Fyn与PSD-95的结合。结论：鞘内注射Tat—FynP可通过抑制Fyn与PSD-95的相互作用降低p-NR2B水平，从而缓解神经病理性痛大鼠的痛觉过敏。
- 马彤彤王鹏吴昊澎屠伟峰陆建华
- 关键词：FYNPSD-95NR2B痛觉过敏
- 基于多肽阵列技术构建穿膜肽靶向抑制Fyn与突触后致密物蛋白95相互作用的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨基于多肽阵列技术合成的穿膜肽离体条件下抑制非受体酪氨酸激酶Fvn与突触后致密物蛋白（postsynaptic density protein，PSD）95相互作用，进而抑制含N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基（N-methyl D-aspartate receptor subtype2B，NR2B）的N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl D-aspartate receptor，NMDAR）过度磷酸化，减轻慢性疼痛的可行性。方法①通过多肽阵列技术的overlapping平台确定Fyn的SH2结构域与PSD95的PDZ3结构域相互作用的结合基序，合成含此结合基序的短肽FynP，并与人类免疫缺陷病毒human immunodeficiencv virus，HIV）．Tat蛋白转导结构域连接形成可进入细胞的穿膜肽FynP-Tat，同时合成乱序穿膜肽mFynP-Tat。②原代培养sD大鼠胎鼠脊髓背角神经元，通过免疫荧光检测不同浓度组（10、20、30μmol/L）多肽内化细胞的效率。③用CCK8法检测不同浓度（10、20、100μmol／L）穿膜肽分别孵育神经细胞（6、24、48h）的细胞毒性。④将神经细胞分为穿膜肽组（FynP-Tat组）、乱序穿膜肽组（mFynP-Tat组）和PBS组（对照组）进行孵育，用谷胱甘肽转移酶（glutathione S-transferase，GST）pull-down和Western blot验证抑制Fvn与PSD95相互作用的效率。结果①通过overlapping确定Fyn与PSD95相互作用的结合基序为KGAYSL。②与FynP-Tat10μmol／L组[（77．3±1．4）％]比较，FvnP-Tat20μmol／L组[（91．5±2．0）％]和FvnP-Tat30μmol／L组[（93．4±2．2）％]的内化效率较高，差异有统计学意义（P〈0．05）；与mFynP-Tat10μmol／L组[（75．0±3．6）％]比较，mFynP-Tat20μmol／L组[（91．4±1．3）％]和mFynP-Tat30μmol／L组[（92．7±2．1）％]的内化效率较高，差异有统计学意义（P〈0．05）；③与FynP-Tat（100μmol／L，6h）组[（82．5±3．0）％]比较，FynP．Tat（100μmol／L，24h）组和FynP-Tat（100μmol／L，48h）组细胞活力[（75．1±1．5）％和（68．5±1．2）％]降
- 杨秀环马彤彤李舒愉贾济彭捷陆建华屠伟峰
- 关键词：蛋白转导结构域
- 细胞穿膜肽Tat-FynP靶向抑制炎性痛大鼠NR2B磷酸化的实验研究
- 炎性疼痛是慢性疼痛产生的重要原因之一，人群患病率高，仍缺乏有效的治疗手段。研究表明，中枢敏化是慢性炎性疼痛发生发展的重要机制之一，其中脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate rece...
- 马彤彤
- 关键词：炎性疼痛磷酸化
- 文献传递
- 鞘内注射细胞穿膜肽Tat-FynP对大鼠炎性痛的影响
- 2016年
- 目的 评价鞘内注射细胞穿膜肽Tat-FynP对炎性痛大鼠的影响.方法 健康雄性SD大鼠80只,6～8周龄,体重180～ 220 g,采用随机数字表法分为5组（n=16）：对照组（C组）、炎性痛组（IP组）、短肽FynP组（FynP组）、Tat-FynP组和乱序细胞穿膜肽mTat-FynP组（mTat-FynP组）.IP组、FynP组、Tat-FynP组和mTat-FynP组采用右后足趾皮下注射完全弗氏佐剂100μl的方法制备大鼠炎性痛模型,C组给予等容量生理盐水.于造模后1d时,FynP组、Tat-FynP组和mTat-FynP组分别鞘内注射FynP、Tat-FynP、mTat-FynP各15μl.每组取10只大鼠,分别于造模前和造模后1、3、5、7、10、14d时测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）.鞘内给药后1d时每组取6只大鼠,采用Western blot法测定脊髓磷酸化含2B亚基的NMDA受体（p-NR2B）的表达水平.结果 与C组比较,IP组、FynP组、Tat-FynP组和mTat-FynP组造模后各时点MWT降低,TWL缩短,脊髓组织p-NR2B表达上调（P＜0.01）;与IP组比较,Tat-FynP组造模后3～14d时MWT升高,TWL延长,脊髓组织p-NR2B表达下调（P＜0.01）,FynP组和mTat-FynP组上述各指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 鞘内注射细胞穿膜肽Tat-FynP可减轻大鼠炎性痛.
- 马彤彤杨秀环何洹陆建华
- 关键词：炎症疼痛
