陈建生
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种甘蔗黄蚜室内人工饲养繁殖方法
- 本发明涉及一种甘蔗黄蚜室内人工饲养繁殖方法。甘蔗黄蚜室内人工饲养繁殖方法包括无菌无毒甘蔗组培瓶苗的培养、甘蔗黄蚜的消毒、甘蔗黄蚜无病毒、无菌化、均一化培养、甘蔗黄蚜无病毒无菌化传代培养。本发明在室内利用无菌无毒甘蔗组培瓶...
- 傅华英黄美婷高三基王锦达孙生仁陈建生
- 文献传递
- 侵染甘蔗的玉米黄花叶病毒分子检测及基因组序列分析
- 玉米黄花叶病毒（Maize yellow mosaic virus,MaYMV）是近年来在玉米上发现的一·个新的病毒,引起玉米叶片出现黄化褪绿的症状。最近,MaYMV被确定为黄症病毒科Luteoviridae马铃薯卷叶病...
- 陈建生孙生仁黄小聪黄美婷傅华英高三基
- 关键词：甘蔗基因组序列系统进化树
- 文献传递
- 甘蔗黄叶病毒P0蛋白分子特性及其抑制RNA沉默活性
- 2014年
- 【目的】甘蔗黄叶病(yellow leaf,YL)是一种主要的甘蔗病毒病害,在全球多数甘蔗种植国家或地区普遍发生,已对甘蔗生产造成严重威胁。其病原为甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,SCYLV),属于黄症病毒科马铃薯卷叶病毒属成员。研究SCYLV编码的沉默抑制子P0蛋白的分子特征、保守结构域及其在自然寄主甘蔗上抑制RNA沉默的功能,为下一步从RNA沉默水平解析SCYLV致病分子机理奠定基础。【方法】利用RT-PCR克隆技术获得SCYLV中国分离物CHN-FJ4编码的RNA沉默抑制子基因P0及其两个缺失突变体P0Δ2-15(N端缺失15个氨基酸)和P0Δ155-256(C端缺失102个氨基酸),然后定向克隆到单子叶植物表达载体p Ubi-nos(空载体)上,获得重组质粒。利用甘蔗嫩叶组织瞬时表达系统鉴定病毒RNA沉默抑制子技术,结合Image J软件定量分析P0及其两个缺失突变体抑制外源基因EYFP瞬时表达活性的变化。番茄丛矮病毒(Tomato bushy stunt virus,TBSV)编码的P19作为沉默抑制子阳性对照。【结果】P0核苷酸序列的遗传进化分析结果显示,所获得的SCYLV病毒分离物CHN-FJ4为BRA基因型,与其他BRA基因型分离物氨基酸序列一致性为96.1%—98.4%。利用MEME在线软件预测P0蛋白的保守结构域,结果表明P0蛋白含有3个显著的保守区。分别位于第1—60、76—125和161—210氨基酸残基。通过Datamonkey在线服务器(http://www.datamonkey.org)提供的5种运算方法分析P0蛋白氨基酸位点的选择压力,结果显示P0蛋白具有8个氨基酸正向选择位点。将含有P0及其缺失突变体的重组质粒连同含EYFP报告基因的p TEM12质粒采用基因枪轰击法分别导入甘蔗嫩叶组织细胞,轰击后48—120 h,P0和P19逐渐地提高EYFP荧光表达点数和荧光表达水平;在120 h,与p Ubi-nos空载体(不含沉默抑制子)对照组相比,P0和P19均显著地提高甘蔗嫩叶组织EYFP荧光表达点数和荧光表达水平,分别达1.6倍和4.0
- 林艺华肖胜华刘营航陈建生傅华英陈如凯高三基
- 关键词：甘蔗黄叶病毒RNA沉默抑制子黄色荧光蛋白
- 一种检测和鉴定甘蔗黄叶病毒基因型的试剂盒
- 本发明涉及一种检测和鉴定甘蔗黄叶病毒基因型的试剂盒。本发明试剂盒中至少包括SCYLV-P0/F3和SCYLV-P0/R2简并引物对，试剂盒内还有RT反应液、PCR反应液、限制性内切酶及其缓冲液、阳性对照RNA模板、阴性对...
- 高三基林艺华陈建生赵春慧吴小斌傅华英陈如凯刘营航
- 文献传递
