郑蕊
- 作品数：56 被引量：223H指数：8
- 供职机构：宁夏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金教育部跨世纪优秀人才培养计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 宁夏枸杞果实细胞壁蛋白适宜提取方法研究被引量：1
- 2021年
- 【目的】探索适合宁夏枸杞果实细胞壁蛋白提取方法,为后续进行宁夏枸杞蛋白质组学研究提供技术支持。【方法】以宁夏枸杞果实为试验材料,采用六步洗脱法去除胞浆蛋白,然后通过定量和电泳比较氯化钙提取法、氯化锂提取法、氯化钙加氯化锂结合提取法和苯酚提取法对细胞壁蛋白的提取效果,通过双向电泳与液相色谱对所得细胞壁蛋白进行验证。【结果】六步洗脱法可较好地除去胞浆蛋白与其他干扰物质,4种方法对宁夏枸杞果实细胞壁蛋白的提取效果排序为:氯化钙提取法(272μg/g)>苯酚提取法(261μg/g)>氯化钙加氯化锂结合提取法(217μg/g)>氯化锂提取法(176μg/g)。裂解液I[7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、30 g/L 3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐(CHAPS)、50 g/L二硫苏糖醇(DTT)]溶解蛋白质效果更优,蛋白质定量浓度更高、电泳条带更多、更清晰。氯化钙提取所得蛋白质样品双向电泳结果较好,蛋白质点数较多、清晰度和分辨率较高;通过液相色谱可看出氯化钙提取的细胞壁蛋白肽段种类多,且大部分相对丰度较高,并含有低丰度蛋白质。所测蛋白质分类中有细胞壁定位的蛋白质。【结论】氯化钙单独提取蛋白质样品的方法是宁夏枸杞果实细胞壁蛋白提取最优方法,所得蛋白质样品已达到进行蛋白质组学研究的标准。
- 张琛杨建军王晨马洁杨涓刘根红郑蕊郑国琦
- 关键词：宁夏枸杞细胞壁蛋白
- 枸杞LbMYB1基因的克隆与表达分析被引量：7
- 2016年
- 在前期的枸杞花药蛋白质组学研究鉴定差异表达蛋白的基础上,采用RT-PCR技术,从宁夏枸杞"宁杞1号"花药中克隆了一个花药发育差异表达MYB类蛋白基因。生物信息学分析表明,该基因编码R2R3类MYB转录因子的典型结构域,与其他物种MYB蛋白的氨基酸的相似性达72%以上,属于R2R3类MYB蛋白基因家族。将该基因命名为Lb MYB1,Lb MYB1包含一个975 bp的开放阅读框,编码324个氨基酸残基,分子量79.2 kv,等电点为4.95。实时定量RT-PCR检测表明,Lb MYB1基因在花药四分体形成时期高丰度表达,在花中的表达量也较高,果实中表达量较低,在根、茎及叶中未检测到表达,推测Lb MYB1基因可能与花药发育中有关。本研究为后继进一步探讨Lb MYB1蛋白在枸杞花药发育过程中可能发挥的调控功能及其分子机理提供参考。
- 郑蕊岳思君王丽娟
- 关键词：枸杞LB基因克隆
- 雄性不育枸杞几种物质含量动态变化
- 2011年
- 以雄性不育株宁杞5号和可育株宁杞1号为试材,研究了花蕾发育过程中游离脯氨酸含量、游离氨基酸、可溶性糖、可溶性蛋白质和丙二醛含量的动态变化。结果显示:花蕾发育过程中,宁杞1号花蕾游离脯氨酸和游离氨基酸含量变化均呈先上升后下降的趋势,而宁杞5号花蕾游离脯氨酸含量呈先上升后下降,游离氨基酸呈含量呈持续下降趋势;在花蕾发育各时期,宁杞5号花蕾可溶性糖、丙二醛(MDA)和可溶性蛋白质含量均高于宁杞1号,几种物质含量在宁杞1号和宁杞5号花蕾发育各时期的变化趋势有所不同。
- 郑蕊岳思君韩璐刘文淼
- 关键词：枸杞雄性不育游离脯氨酸游离氨基酸可溶性糖可溶性蛋白
- 不同品种葫芦巴不同生长期POD同工酶酶谱分析被引量：2
- 2003年
- 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳 ,对葫芦巴进行了过氧化物酶 (peroxidase简称POD酶 )同工酶酶谱分析。结果表明 :不同品种葫芦巴POD同工酶存在差异较小 ,但随着生长的进程 ,各器官的POD酶同工酶变化显著 ,以根的酶带数目及酶活性较稳定 。
- 郑蕊岳思君郭云飞周平
- 关键词：葫芦巴生长期POD同工酶酶谱分析
- 枸杞雄性不育花药差异蛋白质组分析及3个相关基因的克隆
- 枸杞(Lycium barbarum L.)是一种重要的药食同源经济作物,杂种优势的利用是提高枸杞产量、缓解品质与产量矛盾、增强抗(耐)逆性的有效途径,而雄性不育是杂种优势利用的一种重要遗传工具和途径,明确枸杞雄性不育发...
- 郑蕊
- 关键词：枸杞雄性不育蛋白质组查尔酮合成酶MYB转录因子
- 文献传递
- 不同树龄枸杞古树的遗传多样性研究被引量：5
- 2022年
- 通过对43份枸杞材料进行表型性状指标的测定,结合SSR分子标记技术,综合分析枸杞古树与现有宁夏枸杞品种(系)之间的群体结构和遗传多样性。表型性状主成分分析结果确定了主成分为4,累计贡献率达到78.09%,第一主成分叶片大小和第二主成分果实大小起主要贡献作用。样品变异系数范围为15%~54%,平均值为26.78%,样品遗传变异指数范围为5.26~5.41。表型性状指标通过聚类分析后分为4个类群,第Ⅰ类群3份材料,第Ⅱ类群3份材料,第Ⅲ类群8份材料,第Ⅳ类群29份材料。采用隶属函数法分析确定综合性状优良的5个材料,分别为L14、L16、L28、L40、L43。SSR分子标记遗传信息有效等位基因平均值为2.018,期望杂合度平均值为0.398,Shannon′s指数平均值为0.839。SSR分子标记确定最优K值为4,综合评价较好的5份材料中,L16表现为杂合基因型,L14、L28、L40、L43表现为单一基因型。本研究运用多种方法综合分析了不同来源、不同树龄枸杞古树的表型性状差异和遗传多样性,为后续枸杞古树种质资源的利用及枸杞品种选育提供了理论依据和实践指导。
- 胡永超马洁唐建宁朱金忠杨涓郑蕊张磊郑国琦
- 关键词：表型性状SSR标记
- 盐胁迫下宁夏枸杞Na^+吸收及Na^+/H^+转运蛋白与H^+-ATPase基因表达的研究被引量：6
- 2020年
- 为从分子水平揭示宁夏枸杞钠的吸收积累机理,本试验采用原子吸收分光光度法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法,对盐胁迫下宁夏枸杞根中Na^+、K^+含量以及质膜和液泡膜Na^+/H^+转运蛋白与H^+-ATPase基因表达水平进行测定分析。结果表明,相同胁迫时间下,随着NaCl处理浓度的增加,枸杞根系中Na^+浓度总体呈缓慢增加趋势,K^+含量呈先增加后减少趋势,Na^+/K^+比值呈先减少后增加趋势;编码质膜和液泡膜的Na^+/H^+转运蛋白基因LbSOS1、LbNHX1以及液泡膜H^+-ATPase基因LbVHA-C1表达量均呈升高趋势,质膜H^+-ATPase基因LbHA1表达量呈先升高后降低趋势。相同NaCl处理浓度下,随着胁迫时间的延长,Na^+含量总体呈增加趋势,K^+含量呈先增加后减少趋势,Na^+/K^+比值呈增加趋势。LbSOS1、LbNHX1表达量总体呈先升高后降低趋势,LbVHA-C1、LbHA1表达量总体呈降低的趋势。相关性分析显示,不同胁迫时间下,枸杞根中LbSOS1、LbNHX1、LbVHA-C1和LbHA1表达量与Na^+含量存在一定的正相关或负相关。上述结果表明,在低浓度NaCl胁迫时,维持枸杞体内较高的K^+/Na^+比值是宁夏枸杞耐盐的主要方式之一,同时也说明在胁迫初期,质膜和液泡膜的Na^+/H^+转运蛋白与H^+-ATPase参与了枸杞细胞中Na^+及时排出胞外和区隔于液泡,从而保持了根细胞内Na^+的稳定性。此外,随着胁迫时间的延长和NaCl处理浓度的增加,LbSOS1、LbNHX1、LbVHA-C1和LbHA1的表达水平均降低,而Na^+积累量大幅增加,致使枸杞抗盐性降低。本研究揭示了宁夏枸杞的耐盐机理,为利用宁夏枸杞改良宁夏大面积盐碱地提供了理论依据。
- 梁敏许兴丁向真李志英郑蕊杨淑娟毛桂莲
- 关键词：盐胁迫实时荧光定量PCRH^+-ATPASE
- 碱性盐胁迫对宁夏枸杞生长、结构及光合参数的影响被引量：20
- 2017年
- 采用盆栽试验,对碱性盐(NaHCO_3)胁迫下枸杞生长、叶片解剖结构、超微结构以及光合参数进行了研究。结果显示:随着NaHCO_3胁迫浓度的增加,净生长量呈先增加后降低的趋势,地上部干重、地下部干重和整株干重总体呈下降趋势,根冠比呈上升趋势;叶肉栅栏组织在低浓度NaHCO_3处理(150 mmol·L-1)时排列比较紧密,随着胁迫浓度增加,栅栏组织的细胞层数逐级减少,细胞结构紧密度逐渐降低,叶片厚度、上下表皮厚度及晶体数呈现先增后降的趋势;超微结构显示,随着胁迫浓度的升高,叶肉细胞形状变的不规则,叶绿体结构变形,基粒片层排列紊乱,淀粉粒增多;净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔限制值(Ls)和气孔导度(Gs)随NaHCO_3浓度的升高呈下降趋势,胞间CO_2浓度(Ci)呈升高趋势,水分利用效率(WUE)呈先升后降的趋势;相关分析显示,盐胁迫强度与净生长量、生物量、净光合速率、蒸腾速率、气孔导度和气孔限制值呈负相关关系,与净光合速率、蒸腾速率和气孔导度呈显著负相关关系(P<0.05)。由此说明,碱性盐胁迫改变了叶片的功能性状,促使枸杞光合作用下降,直接影响干物质积累及株高的生长。
- 毛桂莲梁文裕王盛许兴郑蕊朱志明
- 关键词：碱性盐胁迫宁夏枸杞光合参数
- 发状念珠藻醛酮还原酶基因NfAKR的克隆与表达被引量：1
- 2016年
- 以发状念珠藻细胞为试材,采用PCR技术克隆了醛酮还原酶基因的开放阅读框(ORF)序列,命名为NfAKR。对基因序列特征进行了生物信息学分析,根据其编码氨基酸序列预测了NfAKR蛋白的三维结构,同时探讨了PEG-6000胁迫下NfAKR的表达特性。结果表明:NfAKR基因的编码序列长912bp,编码304个氨基酸,预测其编码蛋白的相对分子量为33.51kD,理论等电点为4.94,具有醛酮还原酶超家族保守结构域。NfAKR蛋白主要由10个α-螺旋和11β-折叠组成,中间形成一个疏水穴,作为酶的催化活性中心。NfAKR与点形念珠藻处在同一进化枝上,具有较近的亲缘关系。qRT-PCR分析显示,PEG-6000胁迫下NfAKR基因上调表达,当PEG-6000浓度为8%时,其相对表达量为5.66并达到峰值。依据NfAKR基因响应干旱胁迫上调表达的特性,推测醛酮还原酶可能参与发状念珠藻抵御干旱胁迫过程。
- 岳思君李治学范红丽周娟梁文裕郑蕊
- 关键词：发状念珠藻醛酮还原酶基因克隆干旱胁迫
- 发状念珠藻过氧化物还原酶NfPrx基因的克隆与表达分析被引量：4
- 2016年
- 过氧化物还原酶(peroxiredoxin,Prx)属抗氧化蛋白超家族,为了探究Prx在发状念珠藻抗逆过程中所具有的生物学功能,从发状念珠藻细胞中克隆了NfPrx基因的完整开放阅读框(ORF),并对基因序列特征进行了生物信息学分析,根据氨基酸序列预测了该蛋白的三维结构,在此基础上构建了基因的融合表达载体并诱导其表达,同时探讨了PEG-6000胁迫下NfPrx的表达特性。结果表明,NfPrx包含612 bp的ORF,编码203个氨基酸,NfPrx具有PRX_Typ2cys结构域,属于硫氧还蛋白超基因家族,与点形念珠藻、丝状蓝藻7507、微毛藻7126、池生念珠藻CENA21等物种的Prx氨基酸序列一致性高达94%以上。NfPrx与点形念珠藻处在同一进化枝上,具有较近的亲缘关系。利用所构建的原核表达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳,证实诱导表达的NfPrx蛋白与预期结果大小一致。qRT-PCR分析结果显示,NfPrx的表达随干旱胁迫程度的增加先增后降,PEG-6000浓度为8%时,表达量达到峰值,根据表达特性,推测过氧化物还原酶可能参与响应发状念珠藻逆境胁迫过程。
- 岳思君周娟郑蕊范红丽苏建宇
- 关键词：发状念珠藻基因克隆
