刘亚坤
- 作品数：27 被引量：110H指数：6
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省中医药重点研究计划浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 缺血后不同再灌注时间点C57BL/6J小鼠肺未折叠蛋白反应的变化及其意义被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨缺血后不同再灌注时间点小鼠肺未折叠蛋白反应(UPR)的变化及其意义。方法:采用C57BL/6J小鼠在体单侧左肺原位缺血/再灌注(I/R)损伤模型。实验随机分为4组(每组10只),包括假手术组(Sham组)及I/R 1 h、2 h、3 h组。各组实验结束后处死小鼠,留取左肺,分别检测以下指标:肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜观察肺组织形态学改变和进行肺组织损伤评估(IQA);电镜观察肺组织超微结构改变;RT-PCR和Western blotting法分别检测C/EBP-homologous protei(nCHOP)、caspase-12、c-jun NH2-terminal kinase(JNK)和glucose regulating protein 78(GRP78)的mRNA和蛋白表达水平;原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡。结果:与Sham组相比,I/R 1 h组肺W/D、TLW、IQA、CHOP、caspase-12、JNK与GRP78的mRNA和蛋白质表达水平及肺细胞凋亡指数(AI)并无明显差异(P>0.05),光镜显示肺组织形态学和电镜显示肺组织超微结构均无明显变化,而I/R 2 h组和I/R 3 h组上述各指标与Sham组相比均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在I/R 2 h和I/R 3 h组,光镜显示肺组织形态学和电镜显示肺组织超微结构均出现明显损伤性变化,尤以I/R 3 h组损伤最为明显。肺组织细胞凋亡指数分别与CHOP、caspase-12、JNK及GRP78的基因和蛋白的表达、W/D、TLW及IQA之间呈正相关关系。结论:缺血后再灌注时间超过一定限值可引起肺组织细胞发生过度的UPR。
- 赵珊刘亚坤陈丹郝卯林陈海娥应磊马迎春王万铁
- 关键词：未折叠蛋白反应CHOPJNKCASPASE-12
- 血必净注射液对机体炎性反应抑制作用的研究进展被引量：4
- 2012年
- 血必净注射液是一种中药复方注射液,可通过抑制白细胞介素、肿瘤坏死因子、细胞间黏附分子等炎性因子的表达发挥抗炎作用;亦可通过抑制参与炎性反应的重要转录因子的活性而达到抵抗炎症的效果,从而对机体的重要脏器起到保护作用。另外,轴突导向因子作为一项新近的发现,其与血必净注射液以及炎性反应之间也存在着密切的关系。
- 刘亚坤王万铁游昕
- 关键词：血必净注射液炎性反应白细胞介素1Β核因子ΚB
- 一种骨修复支架及其制备方法
- 本发明公开了一种骨修复支架及其制备方法，涉及生物材料领域，该骨修复支架中的复合材料具体由以下重量组分的材料组成：聚已内酯90—99份，纳米氧化锌1—10份，该复合材料的制备方法包括以下步骤：步骤一、准备材料；步骤二、将步...
- 王妹梅刘亚坤杜华汪思应
- 文献传递
- 乳腺癌组织中RunX2基因的表达水平及临床意义分析被引量：4
- 2016年
- 目的探讨乳腺癌和癌旁组织中核心结合因子(RunX2)基因的表达差异及其与乳腺癌患者的临床特征和预后的关系。方法选择75例乳腺癌患者癌组织标本,所有患者术前未经放疗和化疗,采用免疫组化法检测乳腺癌组织和癌旁组织RunX2的表达情况。分析乳腺癌患者RunX2基因的表达与年龄、病理分型、术后分期、淋巴转移、肿瘤大小、雌激素受体(ER)表型、孕激素受体(PR)表型、人类表皮生长因子2(HER2)表型、ki67表达水平以及生存率的关系。结果 75例患者的癌组织中有44例乳腺癌组织高表达RunX2,31例组织低表达RunX2;而癌旁组织仅23例高表达,52例均表达较低。癌组织和癌旁组织中RunX2的表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。RunX2基因的表达高低与患者年龄、术后分期、淋巴结转移、病理类型、PR表型、HER2表型无明显相关性,但是与患者的ER表型和ki67表达相关(P<0.05),并且高表达RunX2患者术后3年的总体生存率较低表达患者差。结论乳腺癌组织中RunX2基因高表达与患者的ER表型和临床预后呈正相关性,进一步证实了RunX2在乳腺癌发生发展中起到重要作用。
- 胡滨范楚苓徐晓军赵明刘亚坤李菲菲
- 关键词：乳腺癌RUNX2雌激素受体临床预后
- 转录因子Runx2对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化能力的影响被引量：6
- 2019年
- 目的:建立稳定敲减Runt相关转录因子2(Runx2)表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,探讨Runx2对MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化(EMT)、转移和侵袭能力的影响。方法:利用LV-Runx2-RNAi慢病毒载体感染MDA-MB-231细胞,构建稳定低表达Runx2的MDA-MB-231细胞株,检测比较Runx2表达水平对MDA-MB-231细胞的形态及E-cadherin、N-cadherin、β-catenin和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。侵袭实验和软琼脂集落形成实验分析比较抑制Runx2表达对乳腺癌细胞侵袭和非锚定生长能力的效应。结果:E-cadherin蛋白表达在敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞中明显高于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05),而N-cadherin、β-catenin和MMP-9蛋白表达在敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞中明显低于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05)。敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞侵袭和非锚定生长能力明显低于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05)。结论:在人乳腺癌MDA-MB-231细胞中抑制Runx2表达可以通过调控EMT相关蛋白的表达进而抑制乳腺癌细胞的EMT过程,从而对细胞的侵袭和转移起负调控作用。
- 张萍何晓刚徐晓丹张露刘雪刘亚坤刘亚坤姜玉汪思应
- 关键词：乳腺癌肿瘤转移上皮-间充质转化
- 姜黄素通过抑制内质网应激和JNK通路过度活化减轻小鼠肺缺血再灌注损伤被引量：28
- 2013年
- 目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)是否通过抑制内质网应激和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路过度活化来减轻小鼠肺缺血再灌注(I/R)损伤。方法:采用C57BL/6J小鼠左侧肺原位I/R损伤模型。实验随机分为6组(每组10只),包括假手术组(sham组)、I/R组、DMSO组(I/R+DMSO组)和Cur组(I/R+Cur低、中、高剂量组)。实验结束后处死小鼠,留取左肺,检测肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜、电镜观察肺组织形态结构变化,并进行肺组织损伤评估(IQA);RT-PCR检测JNK和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA表达;West-ern blotting检测磷酸化JNK(p-JNK)和GRP78的蛋白表达;原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡指数(AI)。结果:与sham组相比,I/R组和DMSO组W/D、TLW、IQA及AI均明显升高(P<0.01),JNK、GRP78 mRNA和p-JNK、GRP78蛋白表达量上升(P<0.01),光镜、电镜均显示肺组织结构出现明显损伤性变化。I/R组与DMSO组相比,上述各指标无显著差异(P>0.05)。与I/R组和DMSO组相比,I/R+Cur低、中、高剂量组各组GRP78mRNA和蛋白表达量无明显变化(P>0.05),W/D、TLW、IQA及AI下降(P<0.05或P<0.01)且肺组织损伤减轻,JNK mRNA和p-JNK蛋白质表达量亦下降,以I/R+Cur高剂量组下降最为明显(P<0.01)。结论:缺血/再灌注引发肺组织细胞发生过度的内质网应激,损伤肺组织。Cur能减轻肺缺血/再灌注损伤,其机制可能与抑制JNK信号通路的过度活化有关。
- 赵珊马迎春刘亚坤周俊辉郝卯林陈海娥孙勤王万铁
- 关键词：内质网应激再灌注损伤姜黄素
- 基于基础医学虚拟仿真实验平台的“早期临床”“早期科研”实践课程体系构建及应用被引量：6
- 2019年
- 目的:构建以虚拟仿真实验平台为基础、以早期接触临床和早期接触科研为核心思想,以临床病例、科研成果为主体,以虚拟仿真和多媒体为主要形式的基础医学实践教学模式。方法:围绕基础医学各学科的教学大纲,选取体液系统、循环系统、血液系统、心脏系统、呼吸系统等典型临床病例和科研案例,将转化成标准化的虚拟案例投入虚拟仿真平台使用。在临床医学“5+3一体化”专业中随机抽取班级进行教学实践,并通过问卷调查、成绩分析评价教学效果。结果:目前建成虚拟案例10个,问卷调查结果显示,观察组学生对教学满意度为93.3%,高于对照组的77.8%(P<0.05);在激发学习兴趣方面观察组为91.1%,高于对照组的77.5%(P<0.05);在有利于未来临床或科研工作方面,观察组为95.6%,明显高于对照组的59.1%(P<0.01);在有利于拓宽知识面、学习效率、知识获得能力、加深对课程理解方面,2组差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组学生综合性实验课期末成绩为(81.54±15.12)分,与对照组的(80.62±14.32)分差异无统计学意义(P>0.05),但观察组学生期末考试成绩优秀比例优于对照组(P<0.05)。结论:基于基础医学虚拟仿真实验平台的“早期临床”“早期科研”实践课程体系初步构建成功,通过该体系进行案例讨论教学可以实现虚拟临床场景、科研场景与理论知识的有机结合,有利于提高学习的兴趣,使学生尽早建立临床思维和科研思路,学生满意度较高,对医学教学改革有较好的推动和促进作用。
- 李菲菲刘亚坤杨帆张凤云刘珺翟凤仙贾雪梅杜鹃汪思应
- 关键词：基础医学教学
- 一种原初态纳米材料致哺乳动物癌变的方法
- 本发明公开了一种原初态纳米材料致哺乳动物癌变的方法，包括以下实验步骤：步骤一、原初态纳米材料母液的配置；步骤二、原初态纳米材料致哺乳动物细胞的恶性转化；步骤三、用原初态纳米材料诱发裸鼠成瘤；步骤四、对死亡裸鼠进行病理研究...
- 王妹梅杜华汪思应曹瑞刘亚坤姜玉
- 文献传递
- 用CRISPR/Cas9技术编辑KLF4基因对GES-1细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2017年
- 目的采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建靶向KLF4的基因编辑质粒,建立CRISPR/Cas9-sg KLF4人正常胃黏膜GES-1细胞株,观察KLF4基因敲除效果及其对细胞生物学行为的影响。方法设计靶向KLF4基因的sgRNA序列,将合成的片段插入到CRISPR/Cas9质粒骨架载体p X459中,再将重组后的质粒做转化,挑取克隆,扩增后提质粒进行测序验证正确性。将构建好的重组质粒体外转染入人胃黏膜细胞GES-1中,利用嘌呤霉素进行筛选获得KLF4敲除的克隆细胞,应用Western blot技术检测未转染细胞和克隆细胞中KLF4蛋白的表达情况,平板克隆实验检测KLF4敲低后克隆形成能力,MTT实验检测其增殖能力,Transwell实验检测其迁移能力。结果经测序验证,成功构建了靶向KLF4的重组质粒p X459-KLF4-sgRNA,经Western blot方法验证,转染该重组质粒后人胃黏膜上皮细胞株GES-1的KLF4蛋白表达量明显降低,行为学实验结果表明,GES-1细胞敲低KLF4基因后克隆形成能力、增殖能力以及迁移能力都明显增强。结论成功构建了靶向KLF4的CRISPR/Cas9基因编辑质粒载体及KLF4基因敲低的稳定细胞株GES-1,KLF4基因敲低后GES-1细胞生物学行为的改变证实其抑癌基因活性。
- 赵荣荣任海风宋乐张倩范楚苓刘亚坤姜玉汪思应魏道严
- 关键词：KLF4胃癌GES-1
- 三七皂苷单体Rb_1在低氧高二氧化碳肺动脉收缩中的保护作用及机制被引量：6
- 2012年
- 目的探讨三七皂苷单体Rb1在低氧高二氧化碳性肺动脉收缩(hypoxia hypercapnia-induced pulmonary vasoconstriction,HHPV)中的保护作用及机制。方法原代培养健康雄性SD大鼠肺动脉平滑肌细胞,取第2～5代细胞至低氧高二氧化碳(1%O2,6%CO2)条件下继续培养,并分别用8、40、100mg/LRb1孵育24h后收集细胞,分别采用Westernblot测定磷酸化细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达,半定量RT-PCR检测ERK1和ERK2mRNA表达。结果常氧组p-ERK蛋白及ERK1、ERK2mRNA表达均呈弱阳性,低氧高二氧化碳组p-ERK蛋白及ERK1、ERK2mRNA表达均明显增加(P<0.01);经不同浓度Rb1干预后,p-ERK蛋白及ERK1、ERK2mRNA表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖关系,以100mg/L效果最好。Rb1各浓度组p-ERK蛋白表达与ERK1和ERK2mRNA表达均呈显著正相关(r分别为0.500、0.977,P<0.01)。结论 ERK1/2信号通路可能介导大鼠HHPV;三七皂苷单体Rb1可能通过抑制ERK1/2通路减轻HHPV。
- 宋张娟唐兰兰黎关龙赵珊王园园刘亚坤王淑君周俊辉王万铁
