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HSV-1衣被蛋白UL7基因的克隆及其在病毒增殖中的表达分析被引量：1: 2016年; 目的：原核表达并纯化单纯疱疹病毒1型（HSV-1）UL7蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,初步分析UL7蛋白在HSV-1增殖过程中的表达特点。方法 PCR方法扩增UL7基因,构建原核表达质粒pGEX-5X-1-UL7,转化到E. coli BL21（DE3）中,经IPTG诱导表达,获得并纯化GST-UL7重组蛋白,将其作为抗原免疫ICR小鼠制备抗UL7多克隆抗体。间接法ELISA检测抗体效价,Western blot检测抗体的特异性,使用该多克隆抗体对HSV-1病毒感染Vero细胞后不同时间点的UL7蛋白表达量进行检测。结果 GST-UL7重组蛋白在E. coli BL21（ DE3）中高效表达,间接法ELISA检测抗UL7抗体效价可达1∶105以上。 Western blot试验证明抗UL7多克隆抗体可以特异性识别UL7蛋白。在HSV-1病毒感染Vero细胞后的不同时间点均检测到了UL7蛋白的表达。结论成功获得GST-UL7融合蛋白,且制备了抗UL7蛋白的多克隆抗体,利用该抗体初步确定了UL7蛋白在HSV-1增殖过程中的不同时间点均有表达。; 周洁楠徐兴丽高有张莹王晶晶刘龙丁李琦涵; 关键词：原核表达多克隆抗体

牛多瘤病毒PCR检测方法的建立及验证被引量：1: 2021年; 目的建立牛多瘤病毒(bovine polyomavirus,BPyV)的PCR检测方法,并进行验证。方法根据NCBI中登录的BPyV主要衣壳蛋白基因序列(BPyV_gp4 VP1,NC_001442.1)设计2对引物:9PF、9PR和3PF、3PR。合成BPyV主要衣壳蛋白基因序列,并与pUC57质粒构建重组质粒。以重组质粒为模板进行PCR扩增,优化退火温度。验证方法的灵敏度及特异性,并使用该方法对Vero、MDBK、KMB17和BT细胞的培养上清液进行检测。结果建立的PCR法可以BPyV-frag重组质粒为模板扩增出特异性条带,最适退火温度为60℃。2对引物的灵敏度均达2 fg/μL(558 copies/μL),引物对9PF、9PR的灵敏度略高于3PF、3PR;引物3PF、3PR和9PF、9PR以高浓度的BPV DNA(101.6 ng/μL)和BAV DNA(97.5 ng/μL)为模板时,均无扩增条带,微量BPyV-frag重组质粒产生扩增条带。Vero、MDBK、KMB17和BT细胞培养上清液中均未检出BPyV。结论成功建立了BPyV的PCR检测方法,该方法灵敏度高,特异性强,可用于检测细胞培养上清液中的BPyV。; 牛步青胡术然高有张海浩陈蕾西常亚军易力姚宇峰任芳芳; 关键词：聚合酶链反应细胞培养上清液

人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞的短串联重复序列图谱鉴定: 2021年; 目的用短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因分型法对人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞进行鉴定,确认无污染。方法选取人源细胞的20个STR位点进行等位基因PCR扩增及荧光检测,将得到的STR图谱与美国典型培养物保藏中心和德国微生物菌种保藏中心数据库比对分析。结果两株细胞均得到清晰的STR特征性图谱,未出现3单位基因,在两个数据库中均找到与其细胞分型完全匹配的细胞株。结论人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞均为正确细胞株,不存在污染和交叉污染。; 宋彩花段男任芳芳高有杨欢李娜雷银瓶蔡秋龙乔燕易力; 关键词：短串联重复序列

肠道病毒68型的研究进展: 2018年; 肠道病毒68型(enterovirus D68,EV-D68)于1962年首次分离自患有肺炎和支气管炎的住院儿童。EV-D68属于病毒科,肠道病毒属,肠道病毒D组。自被发现后有关EV-D68的报道甚少,至2005年后才开始大规模的暴发。北美于2014年暴发了有史以来最大规模的一次EV-D68流行。EV-D68感染儿童可引起咳嗽、喘息和血氧不足等急性呼吸道疾病。最近暴发的急性驰缓性麻痹也被怀疑与EV-D68感染相关。本文对EV-D68的生物学特征、流行病学、致病机制和临床特征等研究进展作一综述。; 高有高有徐兴丽; 关键词：急性呼吸道疾病

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