周明
- 作品数:6 被引量:5H指数:2
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- 双酚A对小鼠胚胎干细胞OCT4及SOX2基因表达的影响被引量:2
- 2013年
- 目的探讨双酚A(bisphenolA,BPA)对小鼠胚胎干细胞(mESC)的毒性特征及OCT4、SOX2基因表达的影响。方法分别以10^-8、10^-7、10^-6、10^-5、10^-4mol/L浓度的BPA及二甲亚砜(溶剂对照组,DMSO)处理mESC系(S6)细胞24h,重复处理3次,倒置显微镜下观察正常组、染毒组细胞的形态变化,CCK-8法检测BPA对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50);分别采用real—time(RT)一Q—PCR和western—blotting技术检测BPA作用下OCTg、SOX2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果BPA对mESC有一定的毒性作用,染毒浓度越大,细胞活性越小,二者呈剂量-效应关系,并通过计算得出BPA对mESC的IC50为4.3×10^-4mol/L,同时结合BPA的环境相关暴露浓度和相关资料,最终取10^-8、10^-7、10^-6、10^-5、10^-4mol/L系列浓度作为后续实验浓度;BPA处理24h后,mESC细胞形态发生改变,较高浓度组与对照组比较,细胞数量明显减少,出现少许漂浮的细胞,克隆变得不规则,分化趋势明显。BPA浓度为10^-7、10^-6、10^-5、10^-4的OCT4mRNA相对表达量分别为1.146±0.087、1.156±0.030、1.158±0.103、1.374±0.053,均高于对照组(1.000±0.000)(t值分别为-2.384、-2.953、-3.203、-4.021,P值均〈0.05);BPA染毒浓度为10^-4mol/L(1.113±0.052)的SOX2mRNA相对表达水平高于对照组(1.000±0.000)(t=-2.765,P〈0.05)。染毒浓度为10^-5、10^-4mol/L的OCT4蛋白质相对表达量分别为1.360±0.168、1.602±0.151,均高于DMSO组(1.0004-0.000),差异有统计学意义(t值分别为-3.538、-4.002,P值均〈0.05);而各浓度组SOX2蛋白相对表达水平差异无统计学意义。结论BPA对mESC具有一定的细胞毒性,在一定剂量范围内BPA可以使mESCOCT4基因表达增加,而对SOX2基因无明显影响。
- 罗凌凤杨淋清吴德生周明龚春梅刘庆成夏菠黄冠琴匡侠锋庄志雄张文昌
- 关键词:胚胎干细胞双酚A
- 烟草烟雾冷凝物对人支气管上皮细胞Rap2B基因表达的影响
- 目的观察烟草烟雾冷凝物/(cigarette smoke condensate, CSC/)对人支气管上皮细胞/(16HBE/) Rap2B基因表达的影响及其启动子区甲基化水平的变化:1、观察CSC急性染毒后16HBE细...
- 周明
- 关键词:启动子甲基化
- 文献传递
- 一种电网发展能力综合性诊断指标体系构建方法
- 本发明提供一种电网发展能力综合性诊断指标体系构建方法,包括如下步骤:步骤一、构建目标层,其为电网发展诊断指标体系;步骤二、构建控制层,包括6项指标,分别为电网规模、电网结构、利用效率、安全可靠性、设备水平、运营环境;步骤...
- 詹智民罗宾詹智红周明武强刘行波李源林严俊李春亮丁超杨洁李维良陈亚婕王正阳陈根永
- 文献传递
- 香烟烟雾冷凝物急性染毒对16HBE细胞Rap2B基因表达的影响
- 2012年
- 目的观察CSC急性染毒对人支气管上皮细胞的毒性特征及Rap2B基因表达的影响,推测Rap2B基因在急性染毒阶段的作用,为后续研究提供实验依据。方法 16HBE细胞暴露香烟烟雾冷凝物(CSC)24 h,于倒置显微镜下观察细胞形态变化,CCK-8法确定染毒剂量,荧光定量PCR检测该基因mRNA表达水平,Western Blot检测其蛋白表达水平。结果 CSC对16HBE细胞有毒性作用,半数抑制浓度(IC50)为(0.08±0.006)mg/ml;CSC染毒16HBE细胞24 h后,细胞形态发生一定改变,高剂量组细胞出现明显形态学改变;与对照组比较,1/8 IC50剂量组mRNA和蛋白表达水平上调较高(P<0.05),随剂量组浓度增高mRNA和蛋白表达下调至最低(IC50组,P<0.05)。结论 Rap2B基因的表达在一定范围随着染毒浓度的改变呈现先升高后下降的趋势,提示Rap2B基因可能作为CSC靶基因在其急性染毒过程中发挥一定的作用。
- 周明龚春梅杨淋清霍俊章庄志雄夏菠吴德生刘建军徐新云张巧
- 双酚A与苯并[a]芘联合作用对三种乳腺上皮细胞的DNA损伤效应被引量:3
- 2012年
- [目的]观察双酚A(BPA)与苯并[a]芘(BaP)联合作用对三种乳腺上皮细胞DNA损伤的影响。[方法]采用对DNA双链断裂标志pH2AX免疫荧光检测的方法,观察环境相关剂量水平(10-9,10-7mol/L)BPA、10-9mol/L17-β-雌二醇(雌激素对照)及其与10-6mol/L BaP联合作用对人乳腺上皮细胞(HMEC)、人永生化乳腺上皮细胞MCF-10A(CRL-10317)和人乳腺上皮肿瘤细胞MCF-7三种乳腺上皮细胞的DNA损伤效应(以二甲基亚砜作为溶剂对照),并应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测三种细胞雌激素受体α和雌激素受体β的基因ESR1、ESR2mRNA水平的相对表达量。[结果]BPA对三种类型乳腺上皮细胞pH2AX阳性率均无明显影响。BaP可明显增加HMEC和MCF-7两种乳腺上皮细胞pH2AX阳性率:单独染毒时两种细胞pH2AX阳性率分别由(34.7±2.2)%和(3.1±0.3)%增至(63.6±1.2)%和(13.3±0.4)%;与10-7mol/L BPA、10-9mol/L 17-β-雌二醇分别联合作用可使MCF-7的pH2AX阳性率增至(15.1±0.2)%、(17.5±1.0)%,与单独染毒组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。三种细胞内ESR1、ESR2基因表达有差异,其中ESR1基因表达差异明显,在MCF-7中的表达水平最高,为HMEC的1080倍、MCF-10A的5222倍。[结论]BPA与BaP联合作用与BaP单独作用相比,可引起MCF-7的DNA双链断裂损伤加剧,该作用可能与雌激素受体表达水平相关。
- 杨淋清龚春梅吴德生周明罗凌凤周丽黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词:双酚A苯并[A]芘DNA损伤雌激素受体
- 弯道水流的调控措施研究
- 杨玲霞张银华范如琴何杰李玉娥杨华军孟荣花吴建平李树慧牛宏伟周明张白张怀坤
- 该研究在认识弯道水流运动基本规律的基础上,首先结合马家岩水库放空洞水工模型试验,提出了在弯道底部设置导流坎和在凹壁设置垂直导向翼的两种工程措施,并进行了试验分析比较,给出了具体的布置形式和尺寸。试验证明,二者对减小弯道水...
- 关键词:
- 关键词:弯道水流弯道急流