李曙晖
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- siRNA沉默livin基因对食管癌细胞生长与凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察小分子干扰RNA（siRNA）沉默livin基因在食管癌细胞中的表达情况，探讨livin基因对食管癌细胞生长、凋亡的影响。方法自行设计两条针对livin基因的siRNA：livin—sh-1，livin—sh-2，构建相应的表达载体分别转染至对数生长期的食管癌，经G418筛选后采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、MTT、TUNEL分别比较检测转染前后食管癌细胞livin基因的表达。结果siRNA对照组与空siRNA载体组的livinw／β mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）；但转染siRNA组Livinl／2mRNA表达显著降低，明显低于siRNA对照组和空siRNA载体组（P〈0．05）。细胞生长曲线测定经F检验三组间差异无统计学意义。转染siRNA载体沉默livina／β表达，细胞凋亡率显著增加。结论siRNA沉默livin基因能抑制食管癌细胞的生长，促进食管癌细胞的凋亡，livin基因有可能成为食管癌治疗的新靶点。
- 侯贺斌陈鹏朱曙光李曙晖周焕明
- 关键词：小分子RNALIVIN基因食管癌
- Livin抑制肝癌细胞增殖活性及放射敏感性的研究
- 2024年
- 目的探讨凋亡抑制蛋白Livin基因对肝癌Huh7细胞增殖活性和放射敏感性的影响,分析可能的作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测法检测不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)照射后肝癌Huh7细胞中Livin mRNA表达水平,通过慢病毒感染构建沉默Livin的肝癌Huh7细胞株,将对数期的肝癌Huh7细胞分为空白对照(Blank)组、阴性对照(si-NC)组和Livin沉默(si-Livin)组,采用qPCR和Western blot验证Livin沉默效果。将接受剂量为4 Gy照射的si-NC组和si-Livin组肝癌Huh7细胞分别记为si-NC+4Gy组及si-Livin+4Gy组,CCK-8法和集落形成实验检测细胞存活情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot分析Livin信号通路相关蛋白表达水平。结果经不同X射线照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)照射后肝癌Huh7细胞中Livin mRNA表达水平分别为1.00±0.10、1.18±0.11、1.76±0.15、2.51±0.24、3.94±0.35,与0 Gy比较,照射剂量为4、6、8 Gy时Livin mRNA表达水平显著上调,差异均有统计学意义(t=0.80、1.20、2.30,均P<0.05)。Blank组Livin mRNA和蛋白表达量分别为1.00±0.10、0.56±0.06,si-NC组Livin mRNA和蛋白表达量分别为0.95±0.11、0.55±0.05,si-Livin组Livin mRNA和蛋白表达量分别为0.24±0.02、0.20±0.02。Blank组和si-NC组Livin mRNA和蛋白表达量比较差异均无统计学意义(均P>0.05),si-Livin组Livin mRNA和蛋白表达量均明显低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=3.25、4.17,均P<0.05)。si-NC组、si-Livin组、si-NC+4 Gy组、si-Livin+4 Gy组集落形成率分别为(95.22±3.12)%、(70.28±4.06)%、(59.04±4.33)%、(37.81±3.80)%。与si-NC组比较,si-Livin组集落形成率明显降低;与si-NC+4 Gy组比较,si-Livin+4 Gy组集落形成率也明显降低,上述差异均有统计学意义(t=26.01、25.02,均P<0.05)。si-NC组、si-Livin组、si-NC+4 Gy组、si-Livin+4 Gy组细胞凋亡率分别为(4.58±1.06)%、(19.39±2.24)%、(20.18±2.11)%、(34.69±4.52)%。与si-NC组比较,si-Livin组细胞凋亡率明显升高;�
- 陈鹏侯贺斌朱曙光李曙晖崔梅
- 关键词：LIVIN基因肝癌细胞
