刘耀平
- 作品数：11 被引量：83H指数：6
- 供职机构：中国科学院沈阳应用生态研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程辽宁省自然科学基金辽宁省科技厅科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程环境科学与工程更多>>
- Vc二步发酵中的微生物生态调控被引量：15
- 2002年
- 研究了Vc二步混合菌发酵中氧化葡萄糖酸杆菌与巨大芽孢杆菌的生长和相互作用 .结果表明 ,2株混合菌在发酵中可形成一种协同共生 ,促进 2 酮基 L 古龙酸产生 ;二菌协同共生的过程及条件不同 ,促进产酸能力亦不同 .环境因子影响二菌协同共生 .优化环境因子可显著改善二菌协同共生效率 ,并提高醇酸发酵转化率 .
- 周彬李义刘耀平张忠泽朱可莉廖德明高永涛
- 关键词：二步发酵微生物生态调控氧化葡萄糖酸杆菌巨大芽孢杆菌
- L-山梨糖还原酶基因在大肠杆菌中的表达及融合蛋白的酶学特性
- 2004年
- 为获得L 山梨糖还原酶 (SR)整个操纵子序列 ,以 pGEM 3zf(+)作为载体构建了Gluconobactersp .S6基因文库 .结合转化子在以L 山梨糖为唯一碳源培养基上的生长情况 ,利用PCR技术筛选到一个含L 山梨糖还原酶基因的阳性克隆pGEM 3zf(+) sr3/E .coli,酶切鉴定插入片断长度约 5 .0kb左右 .以 pGEM 3zf(+) sr3/E .coli质粒DNA为模板 ,扩增SR结构基因 .PCR产物经测序验证为SR基因序列后 ,与表达载体Pet32a(+)相连 ,转化宿主大肠杆菌AD4 94 (DE3)对SR基因进行表达 ,并利用重金属离子亲和层析技术对SR融合蛋白进行了纯化 ,对其酶学特性进行了研究 .结果表明 :还原型辅酶II(NADPH)是SR酶蛋白的最适电子供体 ;SR酶蛋白的最适反应pH为 7.0 ,pH为6 .5时保持稳定 ,酶活力较高 ;最适反应温度是 5 0℃ ,30℃时热稳定性较好 .SDS PAGE电泳分析 ,SR融合蛋白的Mr 在6 5× 10 3 左右 ,由此推测出天然SR的Mr 在 5 3× 10 3 左右 ,与SR基因序列推测出的分子量大小一致 .图 13表 2参
- 刘耀平张丹周亚凤徐明凯张成刚
- 关键词：酶学特性
- VC二步发酵种液质量判定被引量：2
- 2002年
- 研究了影响种子质量的各个参数与提高种子质量的途径。结果显示 :在苏云金杆菌 (俗称“大菌”)与氧化葡萄糖酸杆菌 (俗称“小菌”)组成一新组合菌系中 ,种液中菌的浓度对发酵影响较大 ,种液中的 (大菌OD值 - 1 6×小菌OD值 )与发酵速度成正相关 ,可作为种子质量的判定指数。同时对种液的配方进行均匀设计实验 ,结果显示 :适当提高玉米浆。
- 李义刘耀平周彬冯树张忠泽
- 关键词：VC二步发酵维生素C
- VC二步发酵新组合菌系的研究被引量：5
- 2002年
- 选用苏云金芽孢杆菌与氧化葡萄糖酸杆菌组成一新组合菌系 ,其摇瓶发酵转化率较原菌系提高 4 .83% ,且具有耐受高浓度 (10 % )山梨糖的特性。在 4m3 发酵罐中 ,连续 4批发酵平均转化率较对照菌系提高 8.16 % ,周期缩短 2 3.7%。新菌组合系的发酵转化率与玉米浆浓度成正相关性 ,尿素浓度x2 =1.4 5 % (g/ 10 0mL)时 ,转化率达最大。
- 李义周彬刘耀平冯树陈宏权陈瑛耿莉
- 关键词：VC二步发酵苏云金芽孢杆菌氧化葡萄糖酸杆菌
- 人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学特性被引量：25
- 2003年
- 通过硫酸铵分级沉淀、透析和高效液相色谱等技术分别从两株黑曲霉Aspergillusniger 4 8g和A .niger 84 8g中分离纯化出了具有水解人参皂苷葡萄糖苷键的 β 葡萄糖苷酶 ,并对其酶学特性进行了研究 .结果表明 :两株黑曲霉A .niger 4 8g和A .niger 84 8g所产的 β 葡萄糖苷酶的表观分子量不同 ,分别为 34× 10 3 和 31× 10 3 kD ;两株菌所产的 β 葡萄糖苷酶的反应特性基本相同 .图 4表 4参
- 张丹刘耀平鱼红闪金凤燮陈冠雄
- 关键词：人参皂苷Β-葡萄糖苷酶纯化酶学特性黑曲霉
- Vc二步发酵新菌系B529-V6的构建及其分子生物学特性
- 从芽孢杆菌属、酵母属二十株菌中筛选到一株优良伴生菌B529,与新选育出的产酸菌V6构成一新菌系B529-V6.对新菌系生长代谢规律及调控进行了研究,4M<'3>罐和300M<'3>罐发酵实验表明:种子培养基的碳源、葡萄糖...
- 刘耀平
- 关键词：基因文库酶学特性
- OLAND生物脱氮系统中硝化菌群16S rDNA的DGGE分析被引量：23
- 2003年
- 为了考察生物脱氮系统中硝化菌群 (氨氧化菌和亚硝酸氧化菌 )的种群多样性及硝化菌群随溶解氧降低的种群变化规律 ,并建立一套行之有效的用于自养生物脱氮系统中功能微生物菌群的快速分子检测技术 ,采用DGGE (变性梯度凝胶电泳 )分子检测技术对硝化菌群的 16SrDNA的特异性PCR扩增产物进行了分析 ,结果表明 :OLAND生物脱氮系统中氨氧化菌和亚硝酸氧化菌随溶解氧的降低表现出了不同的种群变化规律 ,氨氧化菌种群多样性受溶解氧的影响非常大 ,而亚硝酸氧化菌的种群多样性比较单一 ,且不受溶解氧的影响。结合FISH (全细胞荧光原位杂交 )分析结果表明 ,在OLAND限氧稳定运行后期 ,亚硝化单胞菌属 (Nitrosomonas)是主要的氨氧化菌 ,占OLAND限氧亚硝化阶段反应器中总细菌数的 72 .5
- 张丹刘耀平徐慧张颖陈冠雄
- 关键词：生物脱氮硝化菌群
- Vc二步发酵新菌系生长代谢的调节被引量：6
- 2002年
- 研究了培养基和培养条件对新菌系大、小菌生长地代谢的影响 .结果表明 :培养基的碳源、葡萄糖 /山梨糖浓度比、氮源、生长因子以及起始 pH值、通气量等 ,可以有效地调节 2 酮基 L 古龙酸的代谢产生数量 ,规范新菌系B5 2 9-Go .V .6的行为、生理状态 ,促进大小菌之间的协调 ,使其达到最佳状态 .图 2表 6参
- 刘耀平李义周斌张成刚张忠泽陈宏权高永涛廖德明
- 关键词：二步发酵生长代谢
- Vc二步发酵一株新产酸菌的分子生物学特性被引量：1
- 2003年
- 对最近分离到的一株能合成维生素C前体 - 2 -酮基 -L -古龙酸 (2 -KGA)的新产酸菌V6生物学和分子生物学特性进行了初步研究。该菌株为革兰氏阴性菌 ,细胞为短杆状 ,菌体大小为 0 .8- 1.0× 0 .4 - 0 .6 μm ,菌落为淡黄色 ,好氧 ,最适生长温度为 2 8～ 30℃ ,最适pH为 7.0～ 7.8,GCmol%含量为 5 3.1% ,不含质粒 ,能氧化葡萄糖、山梨醇和山梨糖合成 2 -KGA。 16SrDNA同源性分析发现 ,该产酸菌与以前报道的能合成 2 -KGA的三个属Ketogulonigenium属、Gluconobacter属和Acetobacter属的同源性分别是 98.9～ 99.3%、82～ 83%和 81～ 82 %。基于以上特性分析 ,该产酸菌在分类发育学上宜归为Ketogulonigenium属。
- 刘耀平张丹徐明凯周亚凤张成刚
- 关键词：VC二步发酵产酸菌分子生物学特性维生素C
- 适合东北种植的垦啤2号大麦制麦工艺被引量：7
- 2000年
- 为使啤酒原料国产化 ,以黑龙江农垦总局新开发的适合种植于我国东北土壤气候的东北垦啤 2号大麦为原料 ,通过酶活分析和传统制麦方法相结合 ,研究了新品种大麦的最佳制麦工艺 ,并探讨了大量推广应用的可能性。按最佳制麦工所得成品麦芽各项指标均优于一级品 ,其中 ,糖化力、糖化时间、α 氨基氮。
- 刘耀平赵常新王培忠金凤燮
- 关键词：制麦工艺酶活啤酒
