袁震
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：杭州师范大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 人源色氨酰tRNA合成酶H130R突变体的酶活和初步晶体学分析（英文）
- 2015年
- 色氨酰t RNA合成酶(tryptophanyl-t RNA synthetase,Trp RS)催化色氨酸的活化及其特异性t RNA的氨酰化,为蛋白质合成提供原料。在IFN-γ刺激下,人源细胞中的Trp RS通过结合血红素增强其氨酰化活性,以调节吲哚胺2,3-双加氧酶表达水平增高所引起的色氨酸缺失。体外研究发现,锌离子和血红素竞争性结合人源Trp RS以增强其氨酰化活性。然而,由于一个氨基酸位点H130R的突变,牛和鼠的Trp RS以及人的H130R突变体都不再受锌离子和血红素的影响,并具有高氨酰化活性。H130R Trp RS模拟了一种结合着锌离子或血红素的高活性构象,但目前还没有对这种构象的结构描述。为了阐明H130R决定Trp RS氨酰化活性种属特异性的原因,以及锌离子和血红素的结合位点,作者对人H130R Trp RS进行了活性分析和初步晶体学研究,此工作将为锌离子和血红素调节Trp RS氨酰化活性的机制研究奠定基础。
- 孙晓亮刘雪梦倪晓敏王小艳袁震杨磊徐晓玲
- 关键词：锌离子血红素X射线晶体学
- 下调let－7微小RNA对卡波西肉瘤相关疱疹病毒裂解复制和丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4及其下游因子的影响
- 2016年
- 目的 探讨下调let－7微小RNA（miRNA）的表达对卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）裂解复制的影响。方法 采用miRNA海绵技术抑制let－7 miRNAs的表达，脂质体法将pEGFP－C2－let－7 sponge质粒转染到BCBL－1和293T细胞中。实时荧光定量PCR法检测let－7 miRNAs的表达，丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4（MAP4K4）、环氧合酶2（COX－2）和基质金属蛋白酶13（MMP－13）mRNA的表达以及KSHV开放读码框（ORF）50和ORF72基因DNA复制水平。Western blot法检测MAP4K4和COX－2蛋白的表达以及p38丝裂原活化蛋白激酶、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）和c－Jun氨基末端激酶（JNK）蛋白的表达及磷酸化水平。结果 在BCBL－1细胞中，let－7 sponge组中let－7 miRNAs的相对表达水平与空载体组比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）；在293T细胞中，let－7 sponge组中let－7a、let－7b、let－7c、let－7d、let－7e、let－7f、let－7g和let－7i的相对表达水平与空载体组比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。质粒转染BCBL－1细胞48 h后，空载体组和let－7 sponge组中KSHV ORF50 DNA的相对复制水平分别为1.00±0.10和2.33±0.18，差异有统计学意义（P〈0.001）; KSHV ORF50 mRNA的相对表达水平分别为1.08±0.48和3.22±0.27，差异有统计学意义（P〈0.001）。空载体组和let－7 sponge组中KSHV ORF72 DNA的相对复制水平分别为1.07±0.49和1.67±0.45，mRNA相对表达水平分别为1.01±0.19和1.54±0.11，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。转染质粒48 h后，空载体组和let－7 sponge组中MAP4K4 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.05和5.73±0.96，COX－2 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.05和2.68±0.19，MMP－13 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.02和2.69±0.25，差异均有统计学意义（均P〈0.001）。let－7 sponge组与空载体组比较，MAP4K4和COX－2的蛋白表达水平也明显提高。在BCBL－1细胞中let－7 m
- 张进霞谭晓华袁震李燕虎齐燕南希齐明键高鹤连福治杨磊
- 关键词：疱疹病毒8型卡波西肉瘤
