吴绍华
- 作品数：50 被引量：110H指数：6
- 供职机构：泸州医学院更多>>
- 发文基金：四川省教育厅资助科研项目四川省教育厅自然科学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学经济管理更多>>
- 小鼠精原干细胞染色体G带显示及其影响因素(英文)
- 2007年
- 背景:精原干细胞技术的快速发展为生殖工程带来了新希望,而在体外维持染色体数目及结构的稳定性是其使用的关键问题之一。目的:探索精原干细胞染色体G带显示技术及其影响因素,为如何鉴定培养状态下干细胞的染色体核型提供实验参考。设计:观察实验。单位:泸州医学院材料:实验于2004-03/2005-04在泸州医学院医学分子生物学实验室完成。生后10d左右的昆明系小白鼠(雌雄均可)由泸州医学院动物科提供(许可证号:川实动管质第17号),低糖DMEM,10mg/L丝裂霉素C,IMDM培养基,1×10-5mol/L秋水仙素(磷酸缓冲液配置),7.5mmol/L低渗氯化钾,甲醇:冰醋酸(3∶1)固定液,Giemsa染液,0.25%胰蛋白酶。方法:取小白鼠股骨骨髓,进行饲养层细胞的制备。取生后7～8d左右雄性小白鼠睾丸并制成细胞悬液,调整细胞密度为3×105L-1,接种到预先制备好的骨髓基质细胞饲养层上,细胞在37℃、体积分数0.05的CO2、70%湿度的二氧化碳培养箱中培养。待细胞生长到15～20d时,吸出克隆细胞团,吹打分散后滴加秋水仙素处理4～6h。收集细胞悬液,再经低渗处理后滴片染色。选择染色体分散良好,无重叠的分散中期的细胞进行记数,观察染色体形态。主要观察指标:骨髓基质及精原干细胞的培养及染色体显色与计数。结果:精原干细胞的核型与正常小鼠体细胞的染色体形态一致,染色体呈粒状、棒状,核型为20对,40条。在油镜下镜检可见3种染色体形态,一种呈高浓缩状态的染色体,可计数染色体总数,但不能显出带纹;第2种是已完全展开并铺于赤道板上的处于分裂中期的染色体,染色体总数和带纹显示都非常清楚;第3种是染色体已折转并向两极移动,并逐渐开始浓缩,染色体总数可以计数,带纹不能清楚显示。结论:小鼠精原干细胞染色体受到细胞所处的分裂时期、低渗处理的效果、滴片时细胞的分散程度及胰酶�
- 徐富翠梅欣明田强黄吉春吴绍华
- 关键词：精原干细胞染色体显带小鼠
- 体外全骨髓法培养人骨髓间充质干细胞的生物学性状被引量：1
- 2008年
- 目的:现阶段多以动物为材料培养观察骨髓间充质干细胞的生长特性,对人骨髓间充质干细胞培养和生长特性的研究相对较少。为此实验培养人骨髓间充质干细胞,拟建立稳定的培养方法。方法:实验于2007-03/09在泸州医学院中心实验室省级重点实验室完成。①实验材料:6个月以上流产胎儿由泸州地区妇产医院提供,产妇及家属对实验知情同意,并经医院伦理委员会批准。②实验方法:应用全骨髓培养法培养人骨髓间充质干细胞,采用差速贴壁对细胞进行纯化。③实验评估:倒置相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态及生物学特点,应用MTT法间接测定骨髓间充质干细胞活性。结果:①培养4h,见骨髓间充质干细胞已开始贴壁,胞体由圆形变为不规则形或三角型,培养第2～4天,见间充质干细胞胞体向两端伸出二三个粗短突起,此时细胞形态渐变为梭型,呈成纤维细胞样生长,并聚集成集落;随着细胞的生长,贴壁细胞逐渐表现为脊梁状、旋涡状生长,细胞突起增长、增粗,并可发出更细的分支,突起间可相互交织成网。培养7d时,见细胞铺满瓶壁面积的70%～80%,细胞排列紧密,此时骨髓间充质干细胞铺成单层。苏木精-伊红染色见细胞多为长梭型,有突起及分支,胞体较大,核一个,较大,呈椭圆,着色浅,可见多个的核仁,胞质浅红色。②骨髓间充质干细胞表面标志CD44免疫组织化学检测,可见胞膜出现棕黄色阳性反应。③MTT法分别检测结果显示,2～6代细胞于酶标仪490nm波长处吸光度值无明显差异,但均高于七八代细胞。结论:利用全骨髓培养法成功地培养出人胎儿骨髓间充质干干细胞,且第3～6代细胞纯度高、活性好。
- 韩济南徐富翠侯艳秋吴绍华
- 关键词：体外培养骨髓间充质干细胞纯度
- 小鼠精原干细胞生物学特征的研究被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨培养状态下精原干细胞的生物学特征,为体外鉴定精原干细胞及认识精原干细胞在体内的生物学行为打下实验基础。方法:在预先制备的骨髓基质饲养单层上接种生后6￣10天雄性小鼠生精细胞,于IMDM培养基及37℃下培养,倒置显微镜观察细胞增殖行为并对增殖后的细胞进行组织学、细胞化学、免疫组化及遗传学检测。结果:培养状态下的精原干细胞增殖经历了短暂增殖期、静止期和分离增生期三个阶段,且增殖细胞呈簇、团状生长,细胞间可见明显的胞质间桥,细胞核大,核/质比高,碱性磷酸酶及C-KIT受体阳性,染色体核型为20对(40条)。结论:精原干细胞具有典型的生物学行为和特征,结合行为及生物学特征可对增殖的精原干细胞进行鉴定。
- 徐富翠吴绍华郭勇梅欣明
- 关键词：小鼠精原干细胞生物学特征体外培养
- 一般本科医学院校医学教育改革发展趋势的思考被引量：12
- 2006年
- 高等医学教育大发展的新形势下,根据医学教育的特征和规律,就一般医学院校的医学教育存在的问题和社会对医学教育的要求,对医学教育改革发展趋势提出自己的意见,以寻求更为合理、可行的高等医学教育培养模式。
- 何红媛吴绍华曾晓荣
- 关键词：高等医学教育教育改革
- 人原始生殖细胞的研究现状
- 2007年
- 薛清彩吴绍华
- 关键词：胚胎生殖细胞体外分离培养精原干细胞生殖干细胞细胞来源睾丸肿瘤
- 干细胞调控机制的研究进展
- 2002年
- 何红媛夏冬王萍吴绍华
- 关键词：干细胞自我更新分化
- 为民族地区培养医学人才的总结与思考
- 1997年
- 总结我院为民族地区培养医学人才的经验,探索适应社会主义市场经济的培养模式,以期进一步挖掘我院的办学潜力,为民族地区培养更多的应用型和技能型的医学人才。
- 陈明模吴绍华汪强李文崇李以樟
- 关键词：民族地区
- 电化教学在基础医学教育中的应用与发展
- 1997年
- 近10年来,我院电教工作得到了较快的发展,在基础医学教育中,各种电教手段正进入各课程理论和实验教学的各环节中,教学效果和教学质量得到一定的改善和提高。1 开展电化教学工作的措施和办法1.1 建设一支开展电教工作的教学队伍开展电教工作要打破传统的教育观念、教学模式和方法。
- 吴绍华
- 关键词：基础医学教育电教工作电化教学电教手段教学工作电教教材
- 哺乳动物精原干细胞技术的研究进展被引量：5
- 2006年
- 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)具有高度的自我更新能力和分化潜能。其体外培养以及近年来兴起的移植、基因转染的深入研究,为探讨精子的发生机制、重建不育个体的精子发生、生产转基因动物提供了新的途径。本文对SSCs技术的研究进展作一综述。
- 周燕吴绍华
- 关键词：精原干细胞转基因
- 无钙及不同钙浓度对培养大鼠心肌细胞膜钙通道活动的影响
- 1997年
- 无钙及不同钙浓度对培养大鼠心肌细胞膜钙通道活动的影响郭勇吴绍华胡礼振谢华福张玉曾晓荣余华刘智飞（泸州医学院组胚教研室）作者应用膜片钳技术对无钙和不同钙浓度孵育的培养乳大鼠心肌细胞膜Ｌ型钙通道活动进行了研究。选用胰酶分离５天的心肌细胞进行实验。研究发现...
- 郭勇吴绍华胡礼振谢华福张玉曾晓荣余华刘智飞
- 关键词：钙通道心肌细胞膜钙浓度培养大鼠细胞外液关闭时间
