郑旭浩
- 作品数:6 被引量:35H指数:3
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- 发文基金:浙江省重中之重学科建设项目温州市科技局资助项目浙江省自然科学基金更多>>
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- 细胞自噬在糖尿病大鼠椎间盘退变中的作用
- 目的:探讨凋亡和自噬水平在糖尿病大鼠椎间盘髓核组织中的变化及其作用。 方法:2月龄SD大鼠40只,分为糖尿病组和正常组,糖尿病组通过注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)复制糖尿病模型,正常组注射相同剂...
- 郑旭浩
- 关键词:椎间盘退变糖尿病细胞自噬细胞凋亡
- 文献传递
- 细胞自噬在糖尿病大鼠椎间盘退变中的作用被引量:16
- 2013年
- 目的:探讨凋亡和自噬水平在糖尿病大鼠椎间盘髓核组织中的变化及其作用。方法:SD大鼠注射链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病模型16周后,完整获取大鼠腰椎间盘,经石蜡包埋切片、苏木素-伊红(HE)染色和阿里新蓝染色,在组织水平检测椎间盘病理变化。DNA原位末端标记法(TUNEL)检测髓核细胞凋亡率,免疫组织化学及Western blotting方法检测髓核组织凋亡和自噬水平。结果:HE和阿里新蓝染色显示糖尿病大鼠椎间盘发生退变。和正常组相比,caspase-3阳性细胞比例在糖尿病大鼠椎间盘中明显增加。TUNEL结果显示糖尿病大鼠椎间盘髓核细胞凋亡率升高。Western blotting和免疫组织化学检测发现自噬指标LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和beclin-1表达量在糖尿病大鼠组均高于正常组。结论:STZ诱导的糖尿病可加速大鼠椎间盘退变,并且提高了髓核组织中凋亡和自噬水平。
- 郑旭浩张小磊江立波胡旭琪金永龙郑亦静吴畏徐华梓
- 关键词:椎间盘退变糖尿病自噬细胞凋亡
- 低氧对脂肪间充质干细胞向雪旺细胞分化的影响
- 2014年
- 目的探讨低氧对脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向雪旺细胞(SCs)分化能力的影响。方法分离培养SD大鼠ADMSCs并用流式细胞仪、茜素红染色、油红O染色鉴定。将成功分离的ADMSCs随机分为3组:常氧诱导组,在常氧条件下(5%CO2,21%O2,37℃)诱导;低氧处理+常氧诱导组,低氧处理(5%CO2,0.5%O2,37℃)后在常氧条件下诱导;低氧诱导组,低氧条件下(5%CO2,0.5%O2,37℃)诱导。观察各组细胞形态,MTT法检测细胞增殖情况,免疫荧光染色和Western blot检测SCs标志物GFAP和S-100的表达。结果细胞分离后,经流式细胞仪分析可见细胞表面CD44阳性、CD45阳性、CD90阳性,茜素红及油红O染色均为阳性。MTT法检测结果:低氧处理+常氧诱导组A值为0.861±0.039,高于常氧诱导组0.837±0.017,差异具有统计学意义(P<0.05);低氧诱导组A值为0.931±0.041,均高于常氧诱导组和低氧处理+常氧诱导组(P均<0.05)。免疫荧光染色发现常氧诱导组和低氧处理+常氧诱导组大量细胞GFAP和S-100表达阳性,低氧诱导组仅少量细胞S-100和GFAP表达阳性。Western blot检测发现常氧诱导组S-100蛋白表达最高,低氧处理+常氧诱导组GFAP蛋白表达最高,低氧诱导组S-100蛋白、GFAP蛋白表达均最低。结论低氧抑制ADMSCs向SCs的分化,低氧处理后的ADMSCs在常氧条件下仍可向SCs分化。
- 陈鸥胡旭琪郑旭浩蒋良福
- 关键词:低氧脂肪间充质干细胞雪旺细胞
- 老年颈椎病患者颈前路次全切应用限制性与非限制性钛板的疗效对比被引量:6
- 2013年
- 目的分析老年颈椎病患者的颈前路椎体次全切除钛网植骨融合内固定术中采用限制性和非限制性钛板的临床疗效和影像学变化。方法将58例行颈前路椎体次全切除钛网植骨融合内固定术的老年颈椎病患者分为限制性钛板组(30例)和非限制性钛板组(28例),比较两组的临床疗效及影像学表现。结果非限制性组与限制性组相比,末次随访时的日本矫形外科协会(JOA)评分改善率分别为(77.7±18.6)%、(75.8±23.2)%(t=0.340,P=0.735);术后3个月,两组的融合率分别为89.3%、63.3oA(x2=5.327,P=0.021);术后3、6、12个月,非限制性组与限制性组相比,融合节段高度的丢失增大(2.42±3.05)mm和(0.98±2.86)mm、(3.95±3.65)mm和(2.34±2.97)mm、(3.60±4.33)mm和(2.40±2.96)mm,融合节段前凸角度的丢失增大(1.64±2.33)°和(O.66±2.14)°、(2.13±3.79)°和(0.70±2.99)°、(2.39±4.26)°和(0.86±3.25)°,但是差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论两种钛板的临床疗效差异无统计学意义,且非限制钛板有助于患者的椎间植骨的早期融合。但是非限制性钛板有可能加重老年患者的融合节段前凸角度和高度的丢失,因此老年骨质疏松患者应慎用。
- 江立波薛恩兴吴瑞凯郑旭浩胡旭琪吴畏徐华梓
- 关键词:颈椎病椎间盘切除术
- 脂肪干细胞与纤维环细胞共培养后的类纤维环分化效应研究
- 2013年
- 干细胞移植是治疗椎间盘退变的新方向,而对纤维环的修复是治疗椎间盘退变的前提。该研究利用Transwell共培养系统在常氧(20%)及低氧(2%)条件下探讨共培养诱导后SD大鼠脂肪干细胞向类纤维环细胞的分化能力。1,9-Dimethylmethylene blue(DMMB)检测表明,低氧组脂肪干细胞诱导7,14,21 d后及常氧组脂肪干细胞诱导14 d及21 d后与对照组脂肪干细胞相比分泌氨基聚糖明显增加(P<0.05),且共培养14 d及21 d后低氧组脂肪干细胞较常氧组脂肪干细胞分泌氨基聚糖含量明显增多(P<0.05)。qRT-PCR检测结果表明,与对照组相比,共培养14 d及21 d后常氧组及低氧组ADSCs COL I、COL II及Aggrecan mRNA表达均明显增强(P<0.05),且低氧组ADSCs表达量高于常氧组(P<0.05)。COL I、COL II免疫组化及阿利辛染色也证实了上述结果。由此说明共培养可以诱导脂肪干细胞向类纤维环细胞分化,且低氧(2%)有利于这种分化的发生。
- 胡旭琪张小磊郑旭浩吴畏江立波倪晓余洋周一飞徐华梓
- 关键词:脂肪干细胞纤维环细胞共培养椎间盘退变
- 细胞自噬对饥饿环境下椎间盘髓核细胞的保护作用被引量:18
- 2012年
- 目的:探讨饥饿条件下椎间盘髓核细胞是否发生自噬及自噬对髓核细胞的作用。方法:原代培养SD大鼠髓核细胞,对细胞表型进行鉴定后,将细胞分为正常对照组、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)加DMEM培养基组、3-MA加EBSS培养基组和EBSS饥饿组,接着用单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色、透射电镜和Western blotting观察各组细胞的自噬差异,最后采用CCK-8法测定细胞生长抑制率以及TUNEL法测定细胞凋亡率。结果:成功培养出SD大鼠髓核细胞。与对照组相比,电镜和荧光显微镜下观察到EBSS培养基诱导的髓核细胞出现自噬囊泡,但是3-MA抑制后细胞自噬泡明显减少;Western blotting检测发现LC3-II/LC3-I和Beclin-1/β-actin在EBSS处理组明显大于3-MA+EBSS处理组和对照组(P<0.05),而3-MA+EBSS处理组的细胞抑制率和凋亡率明显高于EBSS处理组(P<0.05)。结论:饥饿可以诱导大鼠椎间盘髓核细胞发生自噬,并且3-MA能抑制自噬发生。自噬对饥饿环境下的髓核细胞可能具有一定的保护作用。
- 江立波张小磊徐华梓吴瑞凯杨光永吴畏胡旭琪郑旭浩
- 关键词:髓核细胞自噬细胞凋亡饥饿