侍坚
- 作品数：22 被引量：141H指数：6
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：军队医学科研项目上海市科学技术发展基金上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胚胎神经干细胞移植及胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤的修复作用被引量：18
- 2003年
- 将胚胎神经干细胞 (neuralstemcells,NSCs)移植至成年大鼠损伤的脊髓 ,观察移植后NSCs的存活、迁移以及损伤后的功能恢复。实验结果显示 :动物NSCs移植 4周后 ,斜板实验平均角度和运动评分结果比对照组均有明显增高 (P <0 0 5 ) ,而脊髓损伤 (spinalcordinjury,SCI)处的空洞面积显著减小 (P <0 0 5 ) ;在NSCs中加入胶质细胞源性的神经营养因子 (glialcellline derivedneurotrophicfactor,GDNF)后 ,上述改变更加显著。移植后的NSCs不仅能存活 ,而且向损伤的头端和尾端迁移达 3mm之远。这些结果表明 ,移植的NSCs不仅可以存活、迁移 ,还可减小SCI空洞面积 ,促进动物神经功能的恢复 ;此外 。
- 孙勇侍坚富赛里陆佩华徐晓明
- 关键词：脊髓损伤胚胎神经干细胞
- 注射用重组改构人肿瘤坏死因子
- 路长林何成何晓龙黄爱军王成海张伟京杜心江由振东赵小林陈非侍坚蒋春雷倪鑫娄淑杰宋朝佑林葆城
- 原型肿瘤坏死因子（TNF），虽然具有很强的杀伤肿瘤细胞作用，但因毒副反应大，限制了其临床应用。 该研究通过TNF结构与功能关系研究发现： (1)TNF N端结构与TNF抗肿瘤活性关系密切，改变N端结构可增强其抗肿瘤活...
- 关键词：
- 关键词：重组改构人肿瘤坏死因子
- 移植NT-4基因修饰细胞对大鼠前角运动神经元损伤的保护作用被引量：5
- 1999年
- 目的：观察神经营养素４（ＮＴ－４）基因修饰细胞对成年大鼠脊髓前角运动神经元损伤的保护作用。方法：应用逆转录病毒介导的体外ＮＴ－４基因转移方法，制备高表达ＮＴ－４的基因修饰细胞。离断大鼠左侧坐骨神经作为外周神经损伤模型，右侧作为对照，在离断处移植ＮＴ－４基因修饰细胞。观察大鼠脊髓前角运动神经元尼氏染色和胆碱酯酶染色的变化。结果：在移植ＮＴ－４基因修饰细胞组和对照组间，尼氏和胆碱酯酶染色有显著性差异。结论：移植ＮＴ－４基因修饰细胞对外周神经损伤所造成的运动神经元的退变有显著的改善作用。
- 侍坚路长林曲伸何小龙王成海
- 关键词：运动神经元损伤基因修饰
- 神经营养素—4基因工程细胞的构建被引量：3
- 1998年
- 构建了含有大鼠ＮＴ－４基因的双拷贝逆转病毒载体，用电穿孔方法转染ＰＡ３１７包装细胞，获得重组逆转录病毒，再用该病毒感染肌母细胞（Ｌ－６ＴＧ）筛选出表达最高的作为ＮＴ－４基因工程细胞，表达的ＮＴ－４蛋白经ＰＣ１２细胞检测具有神经营养活性，表达量为：５００Ｕ／（１０＾６ｃｅｌｌｓ／２４ｈ）。
- 侍坚何小龙
- 关键词：神经营养素-4逆转录病毒基因工程
- 脑内移植BDNF载体细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后运动机能和行为的影响被引量：6
- 2002年
- 目的 探讨脑内移植脑源性神经营养因子 (BDNF)载体细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后存活、运动机能和行为的影响。方法 7d龄新生大鼠一侧颈总动脉结扎联合低氧吸入法制成缺氧缺血性脑损伤模型。在损伤后即刻 ,于单侧皮层内植入构建的可稳定表达和分泌BDNF的大鼠成肌细胞 ,观察植入 4周后大鼠存活、运动机能和行为的变化。结果 BDNF载体细胞可稳定表达BDNFmRNA ,其分泌上清液可维持PC1 2细胞存活、促进突触生长 ,脑内移植后 42d ,移植组动物死亡率显著降低 (2 8.6 % ,对照值为 57.7% ) ;倾斜临界角度虽仍低于假伤组 ,但显著高于移植不含BDNF载体细胞的对照组 ;开场行为的水平、垂直运动值均显著高于对照组 ,多数时间点上显著低于假伤组。结论 脑内移植可稳定表达和分泌活性BDNF的载体细胞可显著降低新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的死亡率 ,对运动机能和行为的恢复有良好的促进作用。
- 洪新如曲伸侍坚陈新民
- 关键词：新生儿缺血缺氧性脑病脑内移植BDNF脑缺氧
- 脑内移植脑源性神经营养因子载体细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用被引量：22
- 2002年
- 目的 观察脑内移植脑源性神经营养因子 (BDNF)载体细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的疗效。方法 7日龄新生大鼠随机分为三组 :缺氧缺血 +对照细胞移植组 (A组 )、缺氧缺血 +BDNF载体细胞移植组 (B组 )和假手术组 (C组 )。A、B组分别在缺氧缺血性脑损伤后即刻脑内植入不含BDNF的对照细胞和构建的BDNF载体细胞 ,C组于假手术后相应时间注射等量载液 ,48h观察脑含水量及细胞凋亡的变化 ;2 1d测定脑重量 ,并观察脑大体、脑区和神经细胞的损伤状况。 结果(1)脑缺氧缺血后 48h ,左侧大脑含水量A、B组均显著高于C组 ,B组 [(88 4± 1 4) % ]显著低于A组[(89 9± 1 5 ) % ](P <0 0 1) ;细胞凋亡检测表明 ,B组左侧皮层、海马和纹状体细胞凋亡率 [分别为(2 1 4± 4 8) %、(2 4 6± 4 8) %和 (2 7 1± 5 1) % ]均非常显著低于A组 [分别为 (4 4 3± 6 6 ) %、(4 9 6±8 7) %和 (38 9± 6 3) % ](P <0 0 1)。 (2 )缺氧缺血后 2 1d ,A、B组左侧大脑半球明显萎缩 ,其重量均低于C组 ;B组左脑萎缩比A组减轻 15 6 % ,差异有显著性 (F =2 2 148,P <0 0 1)。 (3)缺氧缺血后2 1d ,B组左右侧皮层、海马和纹状体体积比 [分别为 (88± 10 ) %、(79± 12 ) %和 (75± 10 ) % ]显著高于A组 [分别为 (4 5± 8) %、(35±
- 洪新如侍坚郑铃任榕娜
- 关键词：脑源性神经营养因子新生大鼠脑保护作用BDNA缺氧缺血性脑损伤
- 脑源性神经营养因子载体细胞治疗新生大鼠低氧缺血性脑损伤的阿片机制被引量：1
- 2002年
- 目的 探讨 β 内啡肽及阿片 μ受体在脑内移植脑源性神经营养因子 (BDNF)载体细胞治疗新生大鼠低氧缺血性脑损伤 (HIBI)中的作用。方法 7d龄新生大鼠随机分为HIBI+BDNF组 (A)、HIBI +BDNF +DAMGO组 (B)、单纯HIBI组 (C)和假手术组 (D)。左侧颈总动脉结扎联合低氧吸入形成新生大鼠HIBI,伤后立即脑内植入BDNF载体细胞 (A、B)或空白细胞 (C) ,植入后延髓池内注射阿片 μ受体激动剂DAMGO (0 2 μg ,B) ,观察处理后 0、 1、 3d左侧皮层和海马 β 内啡肽免疫活性物质 (ir β ΕΡ)含量的变化及处理后 1d脑含水量、丙二醛 (MDA)含量和细胞凋亡情况。结果 (1)ir β ΕΡ含量 ,左侧皮层A组显著低于C组 (0d) ,B、C组显著高于D组 (0、 1d) ,海马A、B、C组均显著高于D组 (0d) ,C组显著高于A组或D组 (1d)。 (2 )左脑含水量C组显著高于A、B或D组 ,MDA水平A、B、C组均显著高于D组 ,A组显著低于B或C组。 (3)细胞凋亡百分率 ,左侧皮层B、C组显著高于D组 ,C组显著高于A或B组 ,A组显著低于B组 ;海马A、B、C组显著高于D组 ,A组显著低于C组。结论 β 内啡肽参与HIBI病理生理过程。脑内植入BDNF载体细胞影响HIBI的作用环节之一 ,是抑制了 β 内啡肽与其特异性阿片
- 洪新如郑铃侍坚陈新民
- 关键词：脑源性神经营养因子新生大鼠
- 神经营养因子与神经干细胞被引量：36
- 2002年
- 生长因子在神经干细胞的增殖、分化和存活过程中有重要作用。神经营养因子是其中的一类,它包括神经生长因子(NGF)家族、胶质源性神经营养因子(GDNF)家族和其它神经营养因子。NGF家族包括NGF、BDNF、NT-3、NT-4/5和NT-6。这一家族可促进 epidermic growth facter (EGF)反应性海马及前脑室管膜下区神经干细胞的存活和分化。GDNF家族包括GDNF、NTN、PSP和ART。GDNF家族促神经发育的作用主要在外周,它促进肠神经嵴前体细胞的存活和增殖,且对外周感觉神经的发育至关重要。其它生长因子如bFGF和EGF,它们能促进神经干细胞增殖和存活;CNTF和LIF等在神经干细胞的分化中也有重要作用。
- 孙勇侍坚陆佩华
- 关键词：神经营养因子神经干细胞神经发育
- 慢性应激对大鼠海马神经元睫状神经营养因子及其mRNA表达水平的影响被引量：9
- 2002年
- 目的 观察慢性应激对大鼠海马神经元CNTF及其mRNA表达水平的变化。方法 采用慢性不可预见性中等强度应激 ,运用旷场实验观察大鼠行为 ;运用免疫组化和原位杂交的方法 ,观察大鼠海马神经元CNTF及其mRNA表达水平的变化。结果 与对照组相比 ,慢性应激组大鼠海马CNTF免疫阳性颗粒数目减少 ,着色浅淡 ;CNTFmRNA杂交阳性信号减少。
- 王雪琦路长林侍坚邓小华何成
- 关键词：慢性应激海马神经元睫状神经营养因子海马原位杂交技术
- 脑室注射脑源性神经营养因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响被引量：7
- 2002年
- 为探讨脑源性神经营养因子 (BDNF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响 ,以 7天龄大鼠一侧结扎颈总动脉联合低氧吸入形成缺氧缺血性脑损伤模型 ,伤后向脑室注射不同剂量 (0 2、0 5和 2 0 μg)BDNF ,观察对脑水肿、脑内脂质过氧化物 (MDA)水平和细胞凋亡的影响。结果表明 ,给药后 2 4h0 5 μg组脑水肿程度显著降低 ;左脑MDA含量 2 0 μg组显著高于单纯损伤组和 0 5 μg组 ;3种不同剂量BDNF组细胞凋亡不同程度降低 ,其中 0 2 μg和 0 5 μg组降低更明显。提示BDNF对缺氧缺血性脑损伤后的皮层和海马具有显著的保护作用 。
- 洪新如郑铃侍坚陈新民
- 关键词：脑室注射脑源性神经营养因子HIE新生儿缺氧缺血性脑病
