吴卓敏
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血清饥饿对原代人脐静脉内皮细胞周期同步化的影响
- 目的探讨人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的最佳饥饿条件,以建立高效稳定的HUVECs体外分离提取方法,并为HUVECs相关实验提供研究基础。方...
- 覃乙芯吴卓敏徐茜廖文婕贺帅岑柏宏廖路敏王震季爱民
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞原代培养血清饥饿细胞周期
- 血清饥饿对原代人脐静脉内皮细胞周期同步化的影响
- 目的探讨人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的最佳饥饿条件,以建立高效稳定的HUVECs体外分离提取方法,并为HUVECs相关实验提供研究基础。方...
- 覃乙芯吴卓敏徐茜廖文婕贺帅岑柏宏廖路敏王震季爱民
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞原代培养血清饥饿细胞周期
- 文献传递
- 血清饥饿对原代人脐静脉内皮细胞周期同步化的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的最佳饥饿条件,以建立高效稳定的HUVECs体外分离提取方法,并为HUVECs相关实验提供研究基础。方法用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注脐静脉腔消化15 min,收集细胞并用内皮细胞专用培养基(含5%内皮细胞基础培养基、1%内皮细胞生长因子、1%青链霉素),置37℃,5%CO2培养箱培养。在倒置显微镜下观察细胞形态特点,并用细胞免疫荧光方法对所得细胞进行鉴定。用流式细胞术检测所得HUVECs的纯度,并检测0%、0.1%、0.5%、1%血清浓度的培养基饥饿处理0、6、12、18、24 h对细胞周期的影响。结果 0.1%Ⅱ型胶原酶消化可以得到HUVECs,细胞培养呈典型的铺卵石状排列,细胞较密处呈涡旋状排列。免疫荧光检测细胞VIII因子相关抗原表达呈阳性。流式检测细胞纯度高达99.67%。不同血清浓度培养基培养6 h可获得70%左右的G0/G1期细胞;培养12 h可获得80%~90%的G0/G1期细胞;培养18、24 h可获得95%左右的G0/G1期细胞。结论 0.1%Ⅱ型胶原酶充盈静脉管腔可以获得高纯度的原代HUVECs。完全无血清培养基培养12 h即可获得纯度超过80%的G0/G1期HUVECs。
- 覃乙芯吴卓敏徐茜廖文婕贺帅岑柏宏廖路敏王震季爱民
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞原代培养血清饥饿细胞周期
