王鑫
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:四川大学华西第二医院更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家级大学生创新创业训练计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 泛素结合酶RAD6多克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2016年
- 目的为了给RAD6参与的泛素化修饰相关领域的研究提供参考,在大肠杆菌中原核细胞表达GST-RAD6重组蛋白并通过免疫家兔制备其多克隆抗体。方法以c DNA文库作为模板,构建重组载体p ET41a-GST-RAD6,转化至大肠杆菌表达菌株BL21中,诱导表达并纯化GSTRAD6融合蛋白,免疫家兔后制备其多克隆抗体,通过Western-Blot检测及染色质免疫共沉淀鉴定其特异性及效价。结果成功构建了p ET41aGST-RAD6重组载体,得到了高纯度的重组蛋白,Western-Blot检测及染色质免疫共沉淀鉴定显示获得的血清抗体效价高,特异性强。结论成功制备的高效价兔抗人RAD6血清抗体可为RAD6调控的泛素化修饰相关领域的研究奠定基础。
- 郭莲娣王鑫王小军
- 关键词:重组蛋白多克隆抗体
- 非小细胞肺癌细胞A549对紫杉醇耐药机理研究被引量:1
- 2016年
- 目的利用非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol,研究其对紫杉醇耐药性的分子机理.方法通过长时间低浓度的紫杉醇处理A549细胞的方法获得其耐药细胞株A549/taxol,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR观察其凋亡基因的表达情况,并通过不同siRNA处理细胞进行基因沉默,研究其在不同遗传背景下对紫杉醇的耐受情况.结果发现非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol的基因表达紊乱,表现为ING5的高表达抑制了凋亡基因Bcl-2的表达水平,而Bcl-2是紫杉醇诱导细胞凋亡所必需的.结论以上结果初探了A549对紫杉醇耐药性的机制,为探寻紫杉醇化疗新策略提供了新的思路.
- 郭莲娣王丹李佳川王鑫王小军
- 关键词:非小细胞肺癌紫杉醇BCL-2