董飒
- 作品数:8 被引量:5H指数:1
- 供职机构:江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省农业科学院科研基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学更多>>
- 基于聚多巴胺包金及荧光淬灭双信号通道的五氯酚酸钠免疫层析试纸条
- 本申请公开了一种基于聚多巴胺包金及荧光淬灭双信号通道的五氯酚酸钠免疫层析试纸条,包括底板,样品垫、金标垫、NC膜、吸水垫、检测线和质控线,检测线由PCP‑BSA层和QDs‑OVA抗原涂层组成,质控线上设有羊抗鼠IgG抗体...
- 张存政管凌君赵赟董飒王玉龙宋明姝韩昌刘鹏琰刘贝贝李盼
- 一种单克隆抗体及其分泌该单克隆抗体的细胞株、制备方法与应用
- 本发明提供由保藏号为CCTCC NO: C201659的杂交瘤细胞株2F8分泌产生的单克隆抗体,该抗体是将2F8菌株接种于预先用石蜡油处理过的BALB/c小鼠体内,以体内诱生法制备腹水,收集后用Protein G柱纯化腹...
- 刘贤金董飒刘媛张霄
- 文献传递
- 抗Bt Cry1Ab毒素单克隆抗体及产生该抗体的细胞株、制备方法与应用
- 本发明提供一种抗Bt Cry1Ab毒素单克隆抗体及其制备方法,即将保藏号为CCTCC NO:C201658的杂交瘤细胞株2C11接种于预先用石蜡油处理过的小鼠体内,以体内诱生法制备腹水,收集后以Protein G柱纯化腹...
- 刘贤金董飒刘媛张霄胡静
- 用于Bt Cry1类毒素广谱检测的抗体及其制备方法与应用
- 本发明公开一种用于Bt?Cry1类毒素广谱检测的抗体及其制备方法与应用,该抗体是通过抗原多肽SEQ?ID?NO.2与载体蛋白KLH进行偶联后,免疫Balb/c小鼠后,获得的保藏号为CCTCC?NO:C2015145杂交瘤...
- 刘贤金董飒张霄仲建锋徐重新刘贝贝
- 抗Bt Cry1Ab毒素单克隆抗体及产生该抗体的细胞株、制备方法与应用
- 本发明提供一种抗Bt Cry1Ab毒素单克隆抗体及其制备方法,即将保藏号为CCTCC NO:C201658的杂交瘤细胞株2C11接种于预先用石蜡油处理过的小鼠体内,以体内诱生法制备腹水,收集后以Protein G柱纯化腹...
- 刘贤金董飒刘媛张霄胡静
- 鼠源噬菌体抗体展示库的构建及初步应用被引量:4
- 2017年
- 构建可用于特异性单链抗体(ScFv)筛选和应用的大容量鼠源噬菌体抗体展示库,获得拥有自主知识产权的抗体库材料。从小鼠脾脏细胞中提取总RNA,反转录成c DNA后,分别扩增抗体的重链基因、轻链基因,并设计2条互补的Linker基因。采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)法将重链-Linker和Linker-轻链拼接为完整的ScFv基因,酶切、酶连后,将ScFv基因克隆到pCANTAB-5E噬菌粒载体上,经电穿孔导入E.coli TG1感受态细胞中,过夜培养获得初级噬菌体展示库。以单克隆菌落数计算库容量大小,通过比对随机挑取的单克隆噬菌体ScFv可变区序列的差异,分析库的多样性。以Bt毒素(Cry1B、Cry1C、Cry1F)为包被抗原,从库中筛选具有结合活性的ScFv验证库的实用性。经检测,提取的总RNA条带清晰,浓度为2.76μg/μl,扩增的抗体重链基因、轻链基因条带清晰,且2条互补的Linker基因成功添加到重链基因和轻链基因上。经SOE-PCR法扩增,重链-Linker与Linker-轻链成功拼接为ScFv基因。电转化后,经PCR(Polymerase chain reaction)扩增和凝胶电泳检测,证实ScFv基因克隆成功,测得初级噬菌体抗体展示库的库容为3.67×10~8。随机挑取12个单克隆菌种进行测序和比对,证实ScFv基因为鼠源抗体基因,且12个单克隆菌种的ScFv基因可变区均有一定差异,说明ScFv基因具有多样性。以3种Bt毒素(Cry1B、Cry1C、Cry1F)为抗原,经4轮特异性富集筛选后均获得了具有抗原结合活性的噬菌体ScFv菌种,表明该库的实用性较强。
- 徐重新张霄张存政刘媛仲建锋董飒胡晓丹林曼曼刘贤金
- 关键词:单链抗体重叠延伸PCRBT毒素
- 用于Bt Cry1类毒素广谱检测的抗体及其制备方法与应用
- 本发明公开一种用于Bt Cry1类毒素广谱检测的抗体及其制备方法与应用,该抗体是通过抗原多肽SEQ ID NO.2与载体蛋白KLH进行偶联后,免疫Balb/c小鼠后,获得的保藏号为CCTCC NO:C2015145杂交瘤...
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