安建平 作品数:31 被引量:66 H指数:4 供职机构: 山东农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 长江学者和创新团队发展计划 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
苹果MdMYB2基因的克隆及功能鉴定 被引量:4 2017年 以‘嘎拉’苹果为材料,采用同源克隆和PCR技术分离了苹果基因MdMYB2(基因序列号:MDP0000823458)。MdMYB2的开放阅读框(ORF)长度为873 bp,编码含有290个氨基酸的蛋白,预测其蛋白质分子量为32.92 kD,等电点为4.91。系统进化树分析显示,苹果MYB2与梨MYBL2亲缘关系最近,同源性最高。组织表达分析表明,MdMYB2在苹果的各个组织均有表达,在茎和果实中表达相对较高。MdMYB2的表达明显受盐胁迫的诱导。构建了MdMYB2的表达载体,并通过农杆菌介导的遗传转化得到了转基因苹果愈伤和转基因拟南芥植株。抗性试验表明,过量表达MdMYB2明显提高了转基因苹果愈伤对盐胁迫的抗性。此外,异位表达MdMYB2也能提高拟南芥对盐胁迫的抗性,以上试验结果表明MdMYB2在植物盐胁迫响应中发挥重要作用。 曲丰佳 安建平 姚继芳 李浩浩 李媛媛 由春香 王小非 郝玉金关键词:苹果 基因克隆 盐胁迫 苹果乙烯响应因子MdERF3促进花青苷和原花青苷积累 被引量:11 2019年 以’嘎拉’苹果(Malus×domestica’Royal Gala’)为材料,克隆乙烯响应因子(Ethylene Response Factor 3)基因MdERF3。构建酵母载体pGBKT7-MdERF3和原核表达载体PET32a-MdERF3,酵母转化试验表明,MdERF3转录因子具有转录激活活性。电泳迁移率试验分析显示,MdERF3-HIS原核诱导蛋白能够直接结合GCC和DRE序列。构建pCAMBIA1300-MdERF3超表达载体,转化苹果愈伤组织和拟南芥植株,并瞬时转化苹果叶片,转基因材料花青苷和原花青苷积累显著高于野生型。以上结果表明MdERF3转录因子具有转录激活活性以及对GCC和DRE序列的结合能力;MdERF3在调控花青苷和原花青苷积累过程中发挥重要作用。 毕思琦 安建平 王小非 郝玉金 芮麟 李彤 韩月彭 由春香关键词:苹果 ERF 花青苷 苹果生长素响应因子MdARF5的克隆与功能鉴定 被引量:8 2018年 【目的】分离苹果生长素响应因子Md ARF5(Auxin Response Factor 5),分析其对生长素的响应,鉴定其在调节花青苷合成过程中的作用,揭示Md ARF5的生物学功能,为进一步研究生长素对花青苷的调节提供理论依据。【方法】以‘嘎拉’苹果(Malus×domestica‘Royal Gala’)为材料,利用同源克隆技术,克隆得到一个ARF(Auxin Response Factor)转录因子,并将其命名为Md ARF5。利用MEGA5.0软件构建多物种间系统进化树。通过农杆菌介导的遗传转化获得转基因苹果愈伤组织。比较野生型和转基因苹果愈伤组织花青苷积累的差异。利用烟草叶片瞬时转化试验,分析Md ARF5对Md MYB1的转录调控。【结果】克隆获得苹果生长素响应因子Md ARF5(序列号:MDP0000143749),该基因CDS为2 691 bp,编码含有896个氨基酸的蛋白。系统进化树分析表明,苹果Md ARF5与梨Pb ARF5同源性最高。基因表达分析显示,该基因响应生长素处理,并且与花青苷合成相关基因表现出相反的表达模式。在苹果愈伤组织中超表达Md ARF5,其花青苷积累较野生型显著降低,表明Md ARF5在调控花青苷积累过程中发挥重要作用。对苹果Md MYB1启动子序列进行分析,发现其序列包含一个Md ARF5的结合位点。烟草瞬时表达试验显示,Md ARF5能够抑制Md MYB1的表达。【结论】推测苹果Md ARF5可能通过直接抑制Md MYB1的表达负调节花青苷的积累。 安建平 宋来庆 赵玲玲 由春香 王小非 郝玉金关键词:苹果 生长素 花青苷 一种用于得到对盐胁迫高敏感的植物的质粒载体及方法 本发明属于植物育种技术领域,具体涉及一种用于得到对盐胁迫高敏感的植物的质粒载体及方法。该质粒载体包含MdMAX1基因表达框和筛选标记,所述MdMAX1基因表达框由包含在植物中组成型表达的强启动子和由所述强启动子控制表达的... 郝玉金 王小非 安建平 由春香苹果BTB蛋白MdBT2通过降解MdMYB9抑制花青苷和原花青苷积累 MdMYB9能够促进苹果中花青苷和原花青苷的合成.目前,对其转录后调节缺乏了解.本文中.我们发现苹果BTB蛋白MdBT2抑制花青苷和原花青苷生物合成.进一步研究表明,MdBT2能够与MdMYB9互作,并且可以通过26S-... 安建平 李睿 曲丰佳 由春香 王小非 郝玉金关键词:泛素化 苹果 苹果6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因Md6PGDH1的克隆和功能分析 被引量:3 2016年 以‘嘎拉’苹果为材料,克隆了6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因Md6PGDH1(序列号:MDP0000279299)全长。序列分析显示,该基因包含一个长为1 047 bp完整的开放阅读框,编码347个氨基酸,分子量为36.430 k D,预测等电点为9.24。同源性分析表明Md6PGDH1还有另外3个同源基因;功能域分析表明Md6PGDH蛋白含有两个保守的绑定域;亚细胞预测表明Md6PGDH定位存在差异。分析Md6PGDH1启动子发现存在多个响应非生物胁迫的顺式作用元件。定量分析显示,Md6PGDH1在苹果的不同组织中都有表达,且受非生物胁迫诱导。原核诱导Md6PGDH1蛋白并进行蛋白酶活的测定,为后续蛋白功能鉴定奠定了基础。Md6PGDH1在苹果愈伤组织中过量表达,提高其抗盐胁迫的能力。 苏玲 刘鑫 安建平 李浩浩 赵锦 郝玉金 王小非 由春香关键词:苹果 愈伤组织 一种苹果抗逆基因MdoCKX7及其应用 一种苹果MdoCKX7基因及其应用,所述MdoCKX7基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示,利用强启动子驱动原理的转基因技术,将MdoCKX7基因的超量表达载体转入拟南芥中,获得转基因拟南芥。本发明首次通过植物基... 郝玉金 王小非 安建平文献传递 苹果细胞分裂素响应因子基因MdCRF4的分离与功能鉴定 被引量:2 2017年 以‘嘎拉’苹果(Malus × domestica‘Royal Gala’)为研究材料,利用同源克隆和PCR技术,分离了苹果细胞分裂素响应因子(cytokinin response factor)基因MdCRF4。该基因开放阅读框(ORF)为1077 bp,编码含有358个氨基酸的蛋白。保守结构域和系统进化树分析显示,MdCRF4蛋白包含一个保守的CRF结构域和一个保守的AP2/ERF结构域,与梨PbCRF4同源性最高。基因表达分析显示,该基因主要在苹果根和叶中表达并且响应细胞分裂素。EMSA试验显示MdCRF4原核表达蛋白能够绑定DRE(ACCGAC)序列。在‘王林’苹果愈伤组织中超表达MdCRF4,其花青苷积累显著增加,表明MdCRF4在调控花青苷积累中发挥重要作用。 安建平 宋来庆 赵玲玲 由春香 王小非 郝玉金关键词:苹果 花青苷 激素和环境信号调控苹果花青苷生物合成的机理研究 果实的色泽是苹果重要的商品性状,它直接影响苹果的商品价值。苹果果实的颜色是由花青苷决定的。花青苷是一类重要的次生代谢物质,参与植物生长发育的许多方面,包括吸引动物取食果实,进而促进种子和花粉的传播,提高植物对紫外线和干旱... 安建平关键词:苹果 花青苷 生物合成 环境胁迫 文献传递 苹果愈伤组织超表达MdNAC029促进花青苷积累 被引量:10 2018年 以‘光辉’海棠(Malus spectabilis‘Guanghui’)与‘王林’苹果(Malus×domestica‘Orin’)杂交后代中分离出来的红肉苹果果实为试验材料,克隆得到1个NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)转录因子基因,命名为MdNAC029。该基因开放阅读框(ORF)为843 bp,编码含有280个氨基酸的蛋白。保守结构域分析显示,MdNAC029蛋白在N端包含1个保守的NAC结构域。基因表达分析显示该基因在红肉苹果果实中表达量较非红肉果实高。在‘王林’苹果愈伤组织中超表达MdNAC029,其花青苷积累显著增加,表明MdNAC029在调控花青苷积累过程中发挥重要作用。对MdMYB1启动子序列进行分析,发现其序列包含1个MdNAC029转录因子的结合位点。同时,烟草瞬时表达试验显示,MdNAC029能够激活MdMYB1基因的表达。由此推测,MdNAC029可能通过直接促进MdMYB1基因的表达,正向调节花青苷的积累。 安建平 宋来庆 赵玲玲 由春香 王小非 郝玉金关键词:苹果 NAC转录因子 花青苷