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李洁璇
作品数:
7
被引量:1
H指数:1
供职机构:
深圳大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
康康
深圳大学
黄炼
深圳大学
苟德明
深圳大学
张利敏
深圳大学
姚丽君
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靶向性沉默ID1的shRNA序列、引物、应用、shRNA慢病毒载体及构建方法
本发明公开了一种靶向性沉默ID1的siRNA序列,及其相应shRNA双链的引物合成及退火、shRNA慢病毒载体的构建方法;所述shRNA序列包含序列5’-CCTACTAGTCACCAGAGACTT-3’。所述shID1慢...
苟德明
康康
李洁璇
黄炼
张利敏
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吴伊可
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一种诱导型慢病毒表达体系及其构建方法和应用
本发明公开了一种诱导型慢病毒表达体系,包括目的基因表达框和rtTA表达框,所述目的基因表达框包括含有四环素顺式应答作用元件的诱导型启动子及目的基因,所述rtTA表达框包括启动子、rtTA、连接肽以及筛选基因;所述连接肽为...
苟德明
康康
黄炼
李洁璇
牛燕琴
张利敏
吴伊可
姚丽君
用于制备shRNA的引物及制备方法、载体及构建方法
本发明公开一种用于制备shRNA的引物及制备方法、载体及构建方法,用于制备shRNA的引物包括引物P1、P2、P3;P1长度为34nt,从5’端开始,依次为突出的粘性末端ACCG,21nt的siRNA正向序列,loop序...
苟德明
康康
李洁璇
黄炼
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用于制备shRNA的引物及制备方法、载体及构建方法
本发明公开一种用于制备shRNA的引物及制备方法、载体及构建方法,用于制备shRNA的引物包括引物P1、P2、P3;P1长度为34nt,从5’端开始,依次为突出的粘性末端ACCG,21nt的siRNA正向序列,loop序...
苟德明
康康
李洁璇
黄炼
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丝状真菌里氏木霉中shRNA沉默红色荧光基因
被引量:1
2016年
报道了在里氏木霉中建立的一种以红色荧光蛋白(DsRed)为报告基因的RNA干扰方法。首先,将构建的表达DsRed质粒p ANRed1转化里氏木霉QM9414,得到抗潮霉素B抗性并能稳定表达DsRed的菌株DsRed-T.reesei。其次,以丙酮酸脱氢酶启动子Ppdc和纤维二糖水解酶I终止子cbh I为原件,克隆到载体p PHL上构建质粒p PHL-Ppdc-Tcbh1。根据DsRed基因序列设计特定的siRNA干扰序列和另一条无同源序列的siRNA作为阴性对照,克隆到载体p PHL-Ppdc-Tcbh1得到重组质粒。将其转化到DsRed-T.reesei中,用含有100μg/m L潮霉素B和250μg/m L腐草霉素的PDA平板筛选转化子。结果表明,约79%的转化子出现红色荧光沉默现象,其中一些转化子DsRed的表达几乎完全被抑制。荧光定量PCR和Western印迹分析显示DsRed基因的表达受到不同程度的下调。以上结果提示,在里氏木霉中可用此方法研究基因表达调控。
李洁璇
刘雯莉
梁智成
王绍文
梁秀怡
佘炜怡
刘刚
田生礼
关键词:
SHRNA
里氏木霉
靶向性沉默RhoB的shRNA序列、引物、应用、shRNA慢病毒载体及构建方法
本发明公开一种靶向性沉默RhoB的shRNA序列、引物、应用、shRNA慢病毒载体及构建方法,本发明针对Rho激酶信号通路的关键因子RhoB设计了shRNA序列,并构建了相应的shRNA慢病毒沉默载体。所述shRNA序列...
苟德明
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李洁璇
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牛燕琴
姚丽君
吴伊可
文献传递
一种诱导型慢病毒表达体系及其构建方法和应用
本发明公开了一种诱导型慢病毒表达体系,包括目的基因表达框和rtTA表达框,所述目的基因表达框包括含有四环素顺式应答作用元件的诱导型启动子及目的基因,所述rtTA表达框包括启动子、rtTA、连接肽以及筛选基因;所述连接肽为...
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