陈小利
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：广东药科大学更多>>
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- 脂肪酶Lip906的定向进化及固定化研究
- 脂肪酶(lipase，EC3.1.1.3)是一类能够特异性催化水解三酰甘油的酶，在微生物以及动植物中广泛存在，但来源于微生物的脂肪酶由于其活性及稳定性达不到工业生产的需求而限制其应用，因此诸多蛋白改造技术应运而生。 实...
- 陈小利
- 关键词：脂肪酶基因生物信息学定向进化固定化酶学性质
- 文献传递
- 源于红树林的新型脂肪酶Lip906生物信息学分析
- 2017年
- 本研究利用生物信息学在线软件对脂肪酶Lip906的二级结构和模体信息进行预测,同时对其三级结构进行同源建模和模建结果质量评价,预测该蛋白质的活性位点信息,旨在从蛋白质序列特征和分子结构水平理解其在酯类水解过程中的作用。结果表明,模建的Lip906蛋白结构品质较高,具有7段α-螺旋和2组β-折叠结构,是一个典型的α/β类蛋白,表面呈弱负电势分布;Lip906蛋白具有5个不同模体,可能参与不同生化反应或执行不同的功能。这些研究结果对理解Lip906蛋白功能以及配基结合位点定位非常重要,也为脂肪酶Lip906的突变设计提供了理论基础。
- 陈小利张雪玲吴秀玲李志红李荷
- 关键词：同源建模活性位点
- 漆酶Lac1338的酶学特性测定及定向突变对其酶解染料影响被引量：4
- 2016年
- 为了获得表达量高、热稳定性好的漆酶,通过密码子优化合成漆酶基因lac1338、连接到pET-32a(+)载体上并在Escherichia coli BL21(DE3)中表达,获得HIS-Lac1338蛋白。酶学性质测定结果显示,以ABTS为底物时,HIS-Lac1338的比活力高达22.8 U/mg,Km和Vmax分别为567μmol/L和2.8 mmol/(L·min·g);HIS-Lac1338的最适反应温度为55℃,最适pH为6.0;在55℃以下保温2 h能保留50%的酶活性,在pH 4-8范围内孵育4 h仍保留50%以上的活性;HIS-Lac1338对Cu^(2+)抗性强,Ca^(2+)、Na^+、K^+对HIS-Lac1338有促进作用,而Co^(2+)、Fe^(2+)、Hg^(2+)、Ag^+等重金属离子对HIS-Lac1338有抑制作用。易错PCR方法得到的Lac1338的突变酶Lac16与HIS-Lac1338相比,对酸性紫7、溴酚蓝、考马斯亮蓝的降解率分别由10.9%、20%和25%提高到90.5%、67.8%和85%。结果表明,HIS-Lac1338具有较好的温度及pH稳定性,而通过易错PCR技术定向突变获得的突变酶Lac16的染料降解率大大提高。
- 张雪玲陈小利李荷
- 关键词：漆酶克隆表达定向进化染料降解
