邓博
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 供职机构：河南科技大学医学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅科学技术研究重点项目国家自然科学基金洛阳市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 5-羟色胺-7受体激动剂对帕金森病模型大鼠内侧前额叶皮层锥体神经元兴奋性的影响被引量：7
- 2016年
- 目的探讨5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)-7受体对帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型大鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,m PFC)中锥体神经元兴奋性的影响。方法以正常大鼠和6-羟多巴胺单侧损毁黑质致密部建立的PD模型大鼠为研究对象,采用在体细胞外生物电记录的方法,观察5-HT7受体激动剂AS 19对m PFC中锥体神经元电活动的影响。结果无论是体循环还是局部给予AS 19都能引起正常大鼠m PFC锥体神经元呈现兴奋、抑制和不变3种形式的反应,而总体反应是兴奋,而且AS 19引起的抑制效应能被GABAA受体拮抗剂picrotoxinin反转。对于PD模型大鼠,AS 19全身给药也能使m PFC锥体神经元产生3种反应,总体反应是兴奋,但产生兴奋所需的药物累积剂量明显比正常大鼠高,且抑制效应只能被picrotoxinin部分反转,局部应用AS 19不改变模型鼠m PFC锥体神经元的放电。结论 m PFC锥体神经元的活动直接或间接地受到5-HT7受体的调控,而黑质-纹状体通路的变性会引起这些神经元对AS 19的反应性降低。
- 范玲玲邓博闫君宝胡志红任爱红胡咏梅杨东伟
- 关键词：帕金森病锥体神经元
- 人WWP2蛋白的重组表达和多克隆抗体的制备
- 2017年
- [目的]克隆、表达并纯化人E3泛素连接酶蛋白WWP2的部分肽段(aa 324-517),制备兔源抗WWP2多克隆抗体并初步鉴定。[方法]PCR法从人胚肾细胞HEK-293T中扩增WWP2蛋白部分肽段的编码序列并构建原核表达质粒,大肠杆菌中诱导表达;GST亲和层析法纯化后进行TEV酶切,免疫新西兰兔制备多克隆抗体;间接ELISA、Western Blot、免疫荧光等方法检测抗体的灵敏度和特异性。[结果]构建了原核表达质粒pGEX-GST-WWP2(aa 324-517),原核表达并纯化了该重组蛋白。间接ELISA测定抗体效价可达1∶100 000以上,Western Blot检测该抗体可特异性识别体外纯化的WWP2蛋白和细胞内源性WWP2蛋白,细胞免疫荧光可检测到内源性WWP2蛋白。[结论]成功克隆、表达与纯化WWP2蛋白的部分肽段,制备出抗WWP2蛋白的多克隆抗体,可用于WWP2的免疫印迹和细胞免疫荧光分析。
- 牛精铃刘建成邓博马灵筠高杨王梅林
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 丘脑背内侧核损毁对大鼠内侧前额叶皮层神经元电活动的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨丘脑背内侧核(MD)损毁对大鼠内侧前额叶皮层(mPFC)中神经元电活动的影响。方法实验大鼠随机分成正常组(n=15)和MD损毁组(n=15),MD损毁后2周,采用在体细胞外生物电记录的方法,观察mPFC中锥体神经元以及中间神经元的放电频率、变异系数以及放电形式的变化。结果与正常组大鼠相比,损毁MD后,大鼠mPFC中锥体神经元的放电频率较正常组显著增加,且差异具有统计学意义(P<0.001),放电形式更趋于爆发式活动;而mPFC中间神经元的放电频率在MD损毁后明显降低,与正常组相比差异有统计学意义(P<0.05),且放电形式趋向于不规则。结论 MD损毁对大鼠mPFC锥体及中间神经元的电活动均有显著影响,表明MD对mPFC的功能活动可能起到重要的调节作用。
- 范玲玲孙保玉邓博胡志红任爱红胡咏梅闫君宝
- 关键词：电生理学
- 人Smurf1基因真核表达质粒的构建和表达
- 2019年
- [目的]构建人Smurf1基因的真核表达载体并检测其表达和细胞亚定位。[方法]PCR法从人胚肾细胞HEK-293T中扩增Smurf1基因的ORF序列,将其插入到带Flag标签的p CMV5真核表达载体,插入位点为限制性内切酶SalⅠ和XbaⅠ之间。酶切并测序鉴定该质粒的正确性。将成功构建的质粒Flag-Smurf1转染HEK-293T细胞和Hela细胞,Western Blotting检测Smurf1蛋白的表达情况;转染Mv. 1. Lu细胞,免疫荧光检测Smurf1蛋白在细胞中的亚定位。[结果]成功扩增出Smurf1基因的ORF序列;连入p CMV5中获得了质粒Flag-Smurf1;酶切鉴定得到2. 2 kb大小的片段,测序结果显示连入的是Smurf1基因的c DNA序列正确。Western Blotting结果显示该质粒可在HEK-293T细胞和Hela细胞中表达,表达大小约为80 k Da,符合预期。免疫荧光实验结果显示过表达的Smurf1主要定位在细胞膜上。[结论]成功构建了带Flag标签的人Smurf1基因的真核表达质粒,该质粒可在细胞中顺利表达。
- 李莎莎贺虹崔冠一欧丽娜邓博王梅林
- 关键词：分子克隆转染免疫荧光
