王晓梅
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甲钴胺对VZV病毒感染施万细胞中朊蛋白和TNF-α转换酶表达的影响被引量：1
- 2022年
- 目的:探究感染水痘-带状疱疹病毒(VZV)对人施万细胞(hSC)朊蛋白(PrP^(C))、肿瘤坏死因子-α转换酶(TACE)和肿瘤坏死因子-α受体1(TNFR1)表达的影响,及甲钴胺(MCbl)的调节作用。方法:将传代培养的hSC分为:空白对照组、VZV感染组、VZV感染加MCbl干预组、VZV感染PrP^(C)基因(Prnp)siRNA转染细胞组、VZV感染Prnp-siRNA转染细胞加MCbl干预组。设计合成Prnp的siRNA序列转染hSC,构建PrP^(C)表达下调的hSC模型。以感染复数为1.0的VZV分别感染后4组细胞3 d后,加药组分别加入250μg/ml的MCbl干预。感染7 d后采用CCK-8法评估细胞活力,real time RT-PCR检测Prnp mRNA表达,Western Blot分析PrP^(C)糖基化的变化,免疫荧光双染检测TACE和TNFR1的表达,TACE试剂盒检测其酶活性的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞上清液中可溶性TNFR1(sTNFR1)的浓度。结果:与对照组比较,感染组细胞活力明显下降(P<0.05)。感染组细胞Prnp的mRNA表达与对照组相比上调了2.7倍,PrP^(C)的单糖基化条带密度明显增加。TACE染色颗粒明显变小,TACE活性为对照组的36%,TNFR1表达与对照组比较明显增多,sTNFR1含量为(16.77±4.57)pg/ml。感染加药组Prnp mRNA表达上调3.7倍,显著高于感染组,PrP^(C)向单糖基化迁移的比例较感染组明显减少。TACE染色颗粒变大,且TACE的活性为对照组的76%,TNFR1表达较感染组减少,sTNFR1水平达到(231.23±41.04)pg/ml,较感染组明显增加。Prnp-siRNA转染细胞感染VZV后,TACE和TNFR1等表达及活性与VZV感染组比较无明显差异,sTNFR1含量与感染组比较无明显差异。Prnp-siRNA转染细胞感染VZV加药组对TACE和TNFR1的表达及活性调节作用不明显,sTNFR1含量与感染组比较无明显差异。结论:VZV可诱导hSC中PrP^(C)稳定性下降,TACE活性降低。而MCbl可稳定PrP^(C),调节TACE活性,促进TNFR1的脱落,从而增强hSC的抗TNF-α神经毒性能力。
- 许纲周朝生唐维桢张雨徐刚程超许洁王晓梅
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒甲钴胺施万细胞
- 内源性神经干细胞的调控被引量：1
- 2017年
- 随着人口老龄化程度的不断进展,脑卒中已成为致残率最高的疾病。尽可能地恢复患者的活动能力,提高患者的生命质量,一直是神经科学领域需要关注的问题。然而,损伤后的大脑修复能力有限,因此只有适度改善神经功能,加快神经再生,才能从根本上阻止神经系统疾病的发生和发展。脑卒中可导致成人死亡和残疾,但是部分患者在发病数月后可表现出脑修复能力,提示修复可能来源于内源性的神经再生。了解内源性神经再生的调控机制才能明确其再生过程。
- 楼琼王晓梅
- 关键词：神经干细胞神经再生
- 神经干细胞衰老的研究进展
- 2016年
- 神经干细胞广泛分布在哺乳动物胚胎脑内,在成人的脑内室管膜下区、胼骶体下区等均有分布。其具有分化潜能和自我更新特点,在合适条件下会转化为神经元、星形胶质细胞等,可发挥神经修复作用。而一旦神经干细胞所处的微环境发生改变,或增殖、分化等基因突变,则会引起神经干细胞的衰亡。造成神经干细胞无法发挥正常的神经保护和修复作用,故抑制神经干细胞衰老在临床上有重要价值。
- 张敏杰王晓梅
- 关键词：神经干细胞衰老
- VZV对Schwann细胞朊蛋白糖基化的影响及甲钴胺的调节作用被引量：1
- 2021年
- 目的探究水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)对人Schwann细胞(human Schwann cells,hSC)朊蛋白(cellular prion protein,PrPC)糖基化特征的影响,及甲钴胺(methylcobalamin,MeB12)的调节作用。方法以感染复数1.0的VZV感染细胞48 h,加入250μg/ml的MeB12培养48 h,用抗体3F4分别包被上清和沉淀中PrPC,凝集素-ELISA法筛查PrPC的糖基化特征,并测定上清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性与丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果VZV感染组细胞上清与沉淀中的PrPC聚糖比例与未感染组比较有明显变化,总聚糖比分别为1∶1.5和1∶2.6(F=24.18,P<0.001,LSD-t=8.27,P<0.001),提示VZV感染后PrPC稳定性下降,相应的SOD活性(4.43±2.05 U/mg)与未感染组(14.23±1.27 U/mg)比较明显下降(F=18.19,P=0.001,LSD-t=6.54,P<0.001),MDA水平(11.17±1.89 nmol/mg)与未感染组(3.73±0.35 nmol/mg)比较明显升高(F=30.70,P<0.001,LSD-t=8.25,P<0.001),差异均有统计学意义。加入MeB12后,VZV感染细胞沉淀中的聚糖较VZV感染未加药组有明显增加,总聚糖比为1∶2.4,提示MeB12增强了PrPC的稳定性,相应地SOD活性明显增高(11.07±2.07 U/mg,LSD-t=4.42,P=0.002),MDA水平明显下降(5.23±0.96 nmol/mg,LSD-t=6.58,P<0.001),与感染未加MeB12组比较差异有统计学意义。结论VZV可改变hSC中PrPC的糖基化特征,而MeB12可调节PrPC的糖基化特征,增强PrPC的稳定性,从而提高hSC的抗氧化能力。
- 许纲周朝生张雨唐维桢程超许洁徐刚王晓梅
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒SCHWANN细胞糖基化甲钴胺
