张春艳
- 作品数：32 被引量：103H指数：5
- 供职机构：中山医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学自然科学总论更多>>
- 人血清载脂蛋白AI的大量分离、纯化及鉴定被引量：8
- 1996年
- 采用正常人血清为原料，利用硫酸右旋糖酐浓缩血清、密度梯度区带离、脱脂和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０柱层析技术，获得人血清载脂蛋白ＡＩ的纯品，经十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、分子量测定等证明，所提取的载脂蛋白ＡＩ为纯品，分子量为２８１８０。本方法的优点是，通过浓缩血清，减少了离心次数，缩短了制备时间，且分离效果好，为大量制备纯净的载脂蛋白ＡＩ提供了一种新的方法。
- 张春艳林学颜
- 关键词：载脂蛋白AI提纯血清
- 沙眼衣原体L2型MOMP基因真核表达载体的构建及序列分析被引量：3
- 2001年
- 目的 构建携带沙眼衣原体L2型主要外膜蛋白 (MOMP)基因的真核表达载体 ,为沙眼衣原体的DNA疫苗的研究提供材料。方法 用PCR技术扩增L2型沙眼衣原体MOMP基因片段 ,再将其定向插入到真核表达载体 pcDNA3多克隆位点中 ,构建成重组表达质粒。并用酶切分析、PCR扩增及部分序列测定等方法对重组质粒进行了鉴定。结果 MOMP基因被正确地克隆到真核表达载体 pcDNA3中。测序结果同文献报道的序列一致。 结论 真核细胞表达载体 pcDNA3 -MOMP的成功构建 ,为进一步开展沙眼衣原体的DNA疫苗的研究奠定了基础。
- 彭辉宁波冯炼强张春艳徐霖
- 关键词：沙眼衣原体主要外膜蛋白克隆DNA疫苗真核表达载体
- 单克隆抗-D细胞株的建立及抗-D抗体Fab段的基因序列分析被引量：6
- 2002年
- 目的 :建立分泌抗 -D抗体的人B淋巴细胞株 ,分析编码一株人单克隆抗 -D抗体Fab段的基因序列。方法 :以EB病毒 (EBV)转化分泌抗 -D抗体的人B淋巴细胞 ,建立分泌抗 -D抗体的淋巴细胞株。设计扩增人lgM重链Fd段及κ轻链的引物 ,以聚合酶链反应进行扩增 ,对扩增产物进行分子克隆及测序。结果 :分别用轻链引物和重链引物从一分泌lgM抗 -D的单克隆细胞株扩增出一约 650bp和 70 0bp的特异带。序列分析表明 ,其核苷酸及其所推导的氨基酸 (AA)序列符合人lgFab段的序列特征。结论 :获得了抗 -D抗体Fab段基因 ,为基因工程抗
- 付涌水曹开源李树浓张春艳
- 关键词：聚合酶链反应抗-D抗体FAB段新生儿溶血病
- 抗人CD154单克隆抗体抑制免疫应答的实验研究被引量：5
- 2002年
- 目的 :探讨抗人CD1 54单克隆抗体对免疫应答的抑制作用。方法 :①在体外进行混合淋巴细胞反应 ,研究抗人CD1 54单克隆抗体对淋巴细胞增殖反应的影响 ;②在严重免疫联合缺陷 (SCID)鼠体内重建人的免疫功能后 ,研究抗人CD1 54单克隆抗体在SCID小鼠体内对T细胞增殖的影响和对B细胞功能的影响。结果 :①双向混合淋巴细胞反应结果显示 ,抗体的 5个剂量组的 [3H] -TdR的掺入率均显著低于对照组 (均P <0 .0 1 ) ;②在输注人外周血单个核细胞第 6d、第 1 2d、第 2 1d ,实验组SCID鼠体内人T细胞占SCID鼠淋巴细胞的百分率均明显低于对照组(均P <0 .0 5) ;在输注人外周血单个核细胞后的第 1 2d、第 2 1d、第 31d ,实验组SCID鼠体内人IgG的含量明显低于对照组 (均P <0 .0 5)。结论 :抗人CD1 54单克隆抗体能够在体外抑制淋巴细胞的增殖 。
- 张春艳张志方李树浓宁波陈凤英黄文革
- 关键词：CD40配体单克隆抗体免疫应答
- SLE患者外周血淋巴细胞表达BLyS和CD86的变化被引量：2
- 2002年
- 采用FACS研究了 2 2例SLE患者外周血淋巴细胞表达BLyS和CD86的变化。结果表明 ,SLE患者外周血BLyS+ 淋巴细胞和CD19+ CD86 + 淋巴细胞显著增加 ,但二者之间无显著相关。
- 张志方张春艳杨岫岩周毅梁柳琴潘敬运
- 关键词：SLE患者外周血淋巴细胞BLYSCD86发病机理
- 甲胺磷单克隆抗体制备及鉴定被引量：26
- 2003年
- 目的 制备并鉴定甲胺磷农药单克隆抗体。方法 用 5 0 0mg/mLPEG 4 0 0 0作融合剂进行细胞融合 ,HAT(H ,次黄嘌呤 ;A ,氨基喋呤 ;T ,胸腺嘧啶 )培养基选择性培养 ,自制的显微操作装置进行亚克隆。用间接ELISA(酶联免疫吸附测定)和间接竞争ELISA方法对 2株细胞进行鉴定 ,并测定与其它农药的交叉反应率。结果 得到 2株稳定分泌甲胺磷抗体的单克隆细胞株 ,命名为 1C3和 2C6 ;间接ELISA法表明 2株细胞与载体牛血清蛋白质 (Bovineserumalbumin ,BSA)和卵清蛋白质 (Oval bumin ,OVA)反应成阴性 ;间接竞争ELISA法表明 2株细胞上清液内的抗体可以竞争性地与甲胺磷结合 ;2株单克隆细胞均系IgG1亚类 ;1C3细胞诱导腹水纯化后的抗体与其它有机磷农药几乎没有交叉反应。结论 成功制备 2株分泌抗甲胺磷抗体的单克隆细胞株 。
- 赵肃清孙远明张春艳
- 关键词：甲胺磷单克隆抗体农药中毒
- 兔血浆α_2－巨球蛋白的分离纯化被引量：1
- 1996年
- 本研究从家兔血浆中分离纯化了α＿２－巨球蛋白。首先用利凡诺法从血浆中提取出α＿２巨球蛋白粗制品，然后上ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ＿（４００）凝胶柱过滤后，用琼脂糖凝胶电泳即可得到电泳纯的。α＿２巨球蛋白。结合胰蛋白酶活力测定结果表明，α＿２－巨球蛋白活性峰与ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ＿（４００）凝胶过滤的第一洗脱峰完全重合；ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示出一条单一条带；家兔α＿２－巨球蛋白的亚基分子量经测定为１７８．９４ＫＤ，与人的α＿２－巨球蛋白亚基分子量１８０ＫＤ基本相同。说明用这种方法提取纯化α＿２－巨球蛋白是一种切实可行的方法。
- 鲍玉洲杨丙辛张春艳
- 关键词：血浆Α2-巨球蛋白提纯
- 用多聚赖氨酸作载体制备抗甲胺磷抗体的研究被引量：3
- 2002年
- 赵肃清孙远明张春艳黄晓钰雷红涛
- 关键词：多聚赖氨酸
- 人CD134L基因原核表达载体的构建、鉴定及序列分析
- 2002年
- 【目的】克隆人CD134L的cDNA ,构建人CD134L的原核表达载体pGEX 4T 1/hCD134L ,并进行序列分析。【方法】以EB病毒转化健康人外周血B淋巴细胞 ,从激活的EB病毒转化的B细胞中提取总RNA ,采用RT PCR方法扩增出人CD134LcDNA ,经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后 ,克隆入原核表达载体pGEX 4T 1,构建高效表达载体pGEX 4T 1/CD134L ,经限制性内切酶酶切分析和cDNA序列分析鉴定重组质粒。【结果】人CD134LcDNA已正确克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,测序结果表明中国人CD134LcDNA与GenBank国外报告的完全一致。【结论】本研究成功构建人CD134L的原核表达载体 ,为下一步进行人CD134L与自身免疫性疾病的关系奠定基础。
- 张强张春艳宁波陈琼玲
- 关键词：RT-PCRDNA序列分析
- GST-hBLyS融合蛋白基因的构建及其在大肠杆菌中的表达
- 2002年
- 根据hBLyS (humanBlymphocytestimulator)基因序列设计合成特异性引物 ,用RT_PCR从人外周血淋巴细胞扩增出 85 8bp的hBLyS基因 ,并将其插入到融合蛋白原核表达载体 pGEX_4T_1中 ,得到重组表达质粒pGEX_4T_1/hBLyS。把此重组质粒转化大肠杆菌BL2 1,经用IPTG诱导 ,表达出了GST_hBLyS融合蛋白。
- 张志方张春艳付涌水林学颜潘敬运
- 关键词：大肠杆菌自身免疫性疾病重组质粒
