陈韵如
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：同济大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程电子电信更多>>
- 利用CRISPR/Cas9构建稳定遗传的斑马鱼WHSC1L1纯合突变体被引量：4
- 2016年
- 本研究以斑马鱼为研究对象,成功构建组蛋白甲基化酶WHSC1L1基因敲除的纯合突变体,为研究WHSC1L1在胚胎发育早期组蛋白甲基化修饰的影响提供模型。采用CRISPR/Cas9系统进行基因编辑通过http://crispr.dfci.harvard.edu/SSC/和http://crispr.mit.edu/网站分别对靶位点序列特征和脱靶可能性打分,设计高活性的single-guide RNA(sgRNA)通过TA克隆测序检测到F_0突变效率高达75%,通过F_0代雌雄交配,对得到13条F_1代成体进行逐一剪尾鳍鉴定基因型,得到6条WHSC1L1基因缺陷的纯合突变体,6条纯合体均为同一种突变类型,且突变类型为移码突变。通过设计高效率的sgRNA可以直接通过F_0代雌雄交配获得纯合突变体省去了F_0代与野生型交配确定突变率的步骤。本研究得到WHSC1L1基因缺陷的纯合体,为研究胚胎发育过程中由此基因突变引起的组蛋白甲基化修饰变化对胚胎发育的影响及机制提供了有力的帮助。
- 陈韵如王湘秀李绍娟刘桂芬
- 关键词：斑马鱼
- Using local chromatin structure to improve RISPR/Cas9 efficiency in zebrafish
- Although CRISPR/Cas9 system has been successfully applied to zebrafish studies,its efficiencies vary greatly f...
- 陈韵如曾诗扬胡瑞坤黄未来王湘秀刘江舫刘桂芬曹莹张勇
- 关键词：ZEBRAFISH
