罗东
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：湖南中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 补阳还五汤对小窝蛋白-1基因敲除小鼠脑缺血后炎性因子表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的 探讨小窝蛋白-1 （Cavl）在脑缺血后炎症反应中的作用及补阳还五汤对Cav1基因敲除小鼠脑缺血后脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子^-1（ICAM-1）表达水平的影响.方法 将Cav1基因敲除小鼠（KO）60只及同源野生小鼠（WT） 60只分别按随机数字表法分为假手术组、模型组、补阳还五汤组.采用大脑中动脉闭塞（MCAO）法复制小鼠局灶性脑缺血模型;制模后2h各组分别给予灌胃预处理,补阳还五汤组给予补阳还五汤煎液（由黄芪120 g,当归尾6 g,川芎3 g,红花3 g,赤芍4.5 g,桃仁3 g,地龙3 g组成）5 g/kg（临床等效剂量）,每日2mL;其他各组动物均给予等体积无菌生理盐水.于制模后3、7、10、14 d各组处死5只小鼠取脑组织,采用免疫组化法观察脑组织TNF-α、ICAM-1蛋白表达水平.结果 TNF-α、ICAM-1蛋白阳性细胞在整个大脑组织中均有表达,但主要表达在大脑皮质和海马区,TNF-α表达在细胞核、细胞质、细胞膜等整个细胞结构中,ICAM-1表达在细胞膜上.KO和WT两个假手术组小鼠脑组织均有TNF-α和ICAM-1蛋白的低水平表达;各时间点KO和WT两个模型组TNF-α、ICAM-1阳性细胞数均较同鼠种假手术组明显增多,制模后3d均明显增加[KO组：TNF-α（个/mm^2）为102.67±22.84比38.67±8.80,ICAM-1（个/mm^2）为47.33±3.89比19.33±3.14;WT组：TNF-α（个/mm^2）为70.00±17.72比45.83±10.53,ICAM-1（个/mm^2）为46.67±5.43比20.50±3.21],7d达高峰[KO组：TNF-α（个/mm^2）为127.50±18.06比34.83±8.77,ICAM-1（个/mm^2）为76.67±14.79比20.17±3.92;WT组：TNF-α（个/mm^2）为89.67±2.58比29.67±4.80,ICAM-1（个/mm^2）为48.33±8.09比15.50±1.52],10 d逐渐下降,14d达最低[KO组：TNF-α（个/mm^2）为99.67±18.33比34.00±8.10,ICAM-1（个/mm^2）为47.50±8.20比12.83±2.71;WT组：TNF-α（个/mm^2）为59.67±17.07比31.17±9.70,ICAM-1（个/mm^2）为44.33±7.15比19.67±3.56].KO和WT两个补阳还五汤组脑组�
- 黄素芬易健周胜强罗东刘柏炎
- 关键词：小窝蛋白-1补阳还五汤细胞间黏附分子-1
- Caveolin-1基因敲除小鼠子代基因型的鉴定及繁育方法被引量：12
- 2016年
- 目的探讨小凹蛋白-1(caveolin-1)基因敲除小鼠的鉴定方法与最优繁育方式,为深入研究caveolin-1在脑缺血损伤修复中的作用提供理想的动物模型。方法将引进的caveolin-1基因敲除小鼠饲养于SPF级实验室,煮沸裂解法提取鼠尾组织基因组DNA,根据美国杰克逊实验室(Jackson Laboratory)提供的引物序列进行PCR反应检测其基因型,采用caveolin-1^(+/-)杂合子互交、杂合子与caveolin-1^(-/-)纯合子杂交(正交及反交)、纯合子互交4种不同的交配方式,观察亲代小鼠的受孕率、子代小鼠的外形特征及纯合率。结果琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物分子量大小约200 bp和661 bp,与预期的目的基因片段分子量大小一致,成功鉴定了caveolin-1基因敲除小鼠的不同基因型;不同交配方式的繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌性、雄性caveolin-1^(-/-)纯合鼠具有一定的繁殖能力,三种不同基因型小鼠的外形特征无明显差异。结论煮沸裂解法提取基因组DNA、PCR法能够快速可靠鉴定caveolin-1基因敲除小鼠的基因型;caveolin-1杂合子小鼠互交与纯合子互交相结合的繁育方法可能是短期内获得足量纯合子子鼠与同源野生子鼠的较好方式。
- 周胜强罗东黄素芬易健刘柏炎
- 关键词：小凹蛋白-1基因敲除小鼠
- 陷窝蛋白-1对永久性大脑中动脉闭塞小鼠缺血皮质白细胞介素-1β和白细胞介素-6表达的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨陷窝蛋白-1（caveolin1，Cavl）对永久性大脑中动脉闭塞小鼠缺血皮质促炎性细胞因子白细胞介素（interleukin，IL）-1β和IL-6表达的影响。方法Car1基因敲除小鼠和野生型小鼠各40只，各随机分为缺血组和假手术组（每组20只），再随机分为缺血或假手术3、7、10和14d时间点（每个时间点5只）。采用线栓制作永久性大脑中动脉闭塞模型。采用免疫组织化学法检测缺血皮质IL-1β和IL-6表达。结果Car1基因敲除小鼠缺血组各时间点缺血皮质IL-1β和IL-6表达水平均显著高于野生型小鼠缺血组（P均〈0．05）。结论Cavl基因敲除小鼠促炎性细胞因子IL-1β和IL-6表达上调，提示Cav1在减轻脑缺血后炎性反应中发挥着重要作用。
- 黄素芬周胜强罗东易健刘柏炎
- 关键词：白细胞介素-1Β白细胞介素-6
