刘玉玲
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:扬州大学园艺与植物保护学院更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 椪柑体细胞胚诱导过程中生理生化研究
- 2021年
- 体细胞胚胎发生技术在植物快繁、种质资源保存、遗传转化、基因工程等领域具有广阔的应用前景和经济价值。迄今,椪柑体细胞胚胎发生的生理变化尚不清楚。本研究以椪柑胚性愈伤组织为起始材料进行体细胞胚的诱导,选取椪柑体细胞胚诱导过程中四个阶段的培养物:即刚接种的胚性愈伤组织(EI0)、转成黄色的胚性愈伤组织(EI1)、肉眼可见的胚状体(EI2)和出现50%以上的胚状体(EI3),进行可溶性蛋白含量、H2O2水平及抗氧化酶[过氧化物酶(Peroxidase, POD)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)]活力的测定。结果表明:可溶性蛋白含量先下降后逐渐升高;过氧化氢含量先逐渐上升后下降;从EI0到EI2过程三种酶活力都表现出先升高后下降的变化规律,但在EI2到EI3过程,POD、CAT活力下降,SOD活力则升高。
- 刘玉玲缪星辰顾铭洲徐小勇
- 关键词:椪柑体细胞胚胎发生
- 柑橘原生质体总RNA提取方法研究被引量:3
- 2016年
- 以悬浮培养的椪柑愈伤组织为材料,通过酶解分离原生质体;采用Trizol法、改良Trizol法、改良CTAB法和TaKaRa RNA提取试剂盒等4种方法提取原生质体的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和RT-PCR检测其质量和产量。结果表明:4种方法皆能提取出总RNA,其中Trizol法提取的总RNA有降解现象,其他方法所提取的总RNA完整性较好,且D260nm/D280nm和D260nm/D230nm值都在正常范围内;在产量方面,改良Trizol法提取的总RNA产量最高,106个原生质体达43.06μg,分别是改良CTAB法和TaKaRa RNA提取试剂盒的7.74和4.31倍;RT-PCR验证表明,以改良Trizol法提取的RNA为模板所扩增出的目的条带最清晰明亮,且与目的片段大小一致。因此,改良Trizol法是柑橘原生质体总RNA提取的最佳方法。
- 徐小勇许晓玲张一卉刘玉玲陈翔
- 关键词:柑橘原生质体总RNA