荆哲 作品数:10 被引量:41 H指数:3 供职机构: 中国人民解放军 更多>> 发文基金: 甘肃省自然科学基金 陕西省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
糖尿病小鼠心肌组织中线粒体转录因子A的表达 被引量:2 2017年 目的观察db/db糖尿病小鼠与正常小鼠心肌组织中线粒体转录因子A(TFAM)的表达水平。方法 9只雄性db/db糖尿病小鼠,随机分为6周组(db/db 6 week),12周组(db/db 12 week),18周组(db/db 18 week);正常雄性小鼠9只,随机分为6周组(wt 6 week),12周组(wt 12 week),18周组(wt 18 week),每组3只。分别用实时定量PCR、Western blot法检测心肌组织中TFAM的表达。利用实时定量PCR检测心肌组织中线粒体拷贝数。结果 db/db糖尿病小鼠TFAM的表达及线粒体拷贝数低于正常组,且随年龄的增长表达逐渐降低,同时研究还发现,db/db小鼠心肌组织中心肌组织ATP的生成明显低于正常组水平,且随着周龄的增长,ATP的生成逐渐降低。结论糖尿病小鼠心肌组织中TFAM表达进行性降低。 周益盛 荆哲 刘峰舟 高玉婷关键词:2型糖尿病 心肌 线粒体转录因子A 线粒体 小鼠 EMRE对高糖高脂诱导心肌细胞凋亡的影响 被引量:3 2016年 目的研究EMRE分子在高糖/高脂(high glucose and high fat,HGHF)培养的大鼠胚胎心肌细胞H9C2中的表达变化及其在HGHF诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法 H9C2细胞培养分为4组:即正常+si Ctrl组(培养基中含5 mmol/L葡萄糖、20 mmol/L甘露醇和si Ctrl,培养24 h)、正常+si-EMRE组(培养基中含5 mmol/L葡萄糖、20 mmol/L甘露醇和si-EMRE,培养24 h)、HGHF+si Ctrl组(培养基中含25 mmol/L葡萄糖、500μmol/L软脂酸钠和si Ctrl,培养24 h)及HGHF+si-EMRE组(培养基中含25 mmol/L葡萄糖、500μmol/L软脂酸钠和si-EMRE,培养24 h)。用qRT-PCR及Western blot检测EMRE在各组细胞中的表达;用流式细胞术(FCM)分析各组心肌细胞的凋亡;用Western blot检测caspase3与caspase9表达;用荧光探针DCFH-DA检测各组心肌细胞内ROS水平。结果HGHF诱导心肌细胞EMRE表达升高(mRNA及蛋白水平);EMRE促进了HGHF诱导的心肌细胞凋亡及ROS的产生;用si-RNA干涉EMRE表达后,由HGHF诱导的细胞凋亡及ROS产生明显减少。结论 EMRE在HGHF诱导的心肌细胞凋亡中发挥重要的促进作用。 荆哲 刘峰舟 王炜中 李飞关键词:EMRE 高糖高脂 心肌细胞 活性氧簇 衰弱高龄高血压患者降压目标值的探讨 被引量:2 2020年 高龄人群原发性高血压(高血压)发病率越来越高,是高龄心脑血管疾病、外周动脉疾病、认知障碍等疾病发生的重要因素之一。衰弱是高龄高血压患者的独立危险因素。本文就衰弱高龄高血压患者的降压目标值的探讨作一综述,旨在为衰弱高龄高血压患者的临床诊治提供一定的帮助。 陈霞 陈永清 郭文昀 荆哲关键词:高血压 衰弱 高龄 降压 构建线粒体钙离子摄入蛋白1慢病毒表达载体及在H9C2细胞中的应用 被引量:1 2016年 背景:线粒体钙离子摄入蛋白1(mitochondrial calcium uptake 1,MICU1)是维持细胞线粒体钙稳态的重要分子,MICU1对线粒体钙稳态的调节可能在糖尿病心肌病的发生及发展中起着重要作用,但目前机制尚不明确。目的:构建MICU1基因的慢病毒表达载体,产毒感染H9C2细胞,评价MICU1基因在H9C2细胞中的表达效果,为后续在细胞水平研究糖尿病心肌病的发生及发展建立平台。方法:PCR提取H9C2细胞MICU1基因,SpeⅠ、EcoRⅠ双酶切后,将MICU1基因片段插入慢病毒载体pR RLsin.CMV.e FP中,构建慢病毒表达质粒pR RLsin.CMV.MICU1-e FP。使用pC MVDR8.91、pC MV-VSVG共转染于293T细胞中包装产毒,用于感染H9C2细胞。通过RT-PCR及Western blot检测感染后H9C2细胞中MICU1 m RNA及蛋白的表达。共聚焦显微镜检测Rhod-2染色H9C2细胞后线粒体钙水平。结果与结论:(1)MICU1基因成功插入pR RLsin.CMV.e FP慢病毒表达质粒;(2)转染pR RLsin.CMV.MICU1-e FP慢病毒表达质粒后,可见293T细胞表达绿色荧光蛋白,并且MICU1的蛋白表达明显升高;(3)病毒液感染H9C2细胞后,MICU1的蛋白及m RNA水平较未感染组及空质粒包装组明显升高;(4)Rhod-2染色后观察发现,MICU1能够明显增强线粒体钙水平;(5)结果表明,pR RLsin.CMV.MICU1-e FP慢病毒能够高效感染H9C2细胞,为构建永生化细胞系奠定基础。 荆哲 刘峰舟 刘燕 陈永清关键词:慢病毒感染 线粒体蛋白质类 H9C2细胞 Drp1在高糖高脂诱导心肌细胞凋亡中的作用及其机制 被引量:1 2018年 目的观察动力相关蛋白1(Drp1)在高糖/高脂(high glucose and high fat,HGHF)培养的心肌细胞(H9C2)中的表达及其在HGHF诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法 H9C2细胞培养分为4组:正常+空白腺病毒组(con+Ad-EV)、正常+Drp1过表达腺病毒组(con+Ad-Drp1)、高糖/高脂+Ad-EV组(HGHF+Ad-EV)、高糖/高脂+Ad-Drp1组(HGHF+AdDrp1)。分别用qRT-PCR及Western blot检测Drp1在各组细胞中的mRNA水平及蛋白水平表达;用流式细胞术(FCM)分析各组心肌细胞的凋亡;用荧光探针DCFH-DA检测各组心肌细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与正常+空白腺病毒组相比,高糖/高脂+Ad-EV组Drp1的mRNA水平显著降低(P<0.01),Drp1的蛋白表达水平也明显减少;正常+Drp1过表达腺病毒(Ad-Drp1)组的心肌细胞凋亡数量降低,ROS的水平显著减少(P<0.05);与正常+空白腺病毒组相比,高糖/高脂+Ad-EV中Drp1表达减少,心肌细胞凋亡数量增加和ROS的水平升高(P<0.01),相对于高糖/高脂+Ad-EV组,高糖/高脂+Ad-Drp1组中心肌细胞凋亡数量和ROS水平明显减少(P<0.01)。结论在高糖/高脂环境下,Drp1表达对H9C2心肌细胞凋亡及ROS生成具有抑制作用,从而保护心肌。 张玉秀 钱志鑫 郭文昀 焦丕奇 梁素梅 荆哲关键词:高糖高脂 心肌细胞 细胞凋亡 活性氧簇 老年高血压的临床特点及治疗策略 被引量:19 2019年 高血压严重影响老年人的健康,是老年人发生脑卒中、冠心病、心肌梗塞、充血性心衰、肾功能衰竭等疾病的主要危险因素之一。但我国高血压病的预防率、控制率、治疗率均较低,并且发病率、并发症及死亡率高。本文就老年高血压的特点及治疗作一综述,旨在为老年高血压患者的临床诊治提供一定帮助。 陈霞 郭文昀 荆哲 陈永清(审校)关键词:老年高血压 大蒜辣素对db/db糖尿病小鼠心肌细胞凋亡及Pink1/Parkin信号通路的影响 被引量:6 2017年 目的:观察大蒜辣素对db/db糖尿病小鼠心肌细胞凋亡及Pink1/Parkin信号通路的影响。方法:在db/db糖尿病小鼠模型的基础上,随机分为糖尿病模型组及大蒜辣素组,同时设正常对照组。连续干预21 d后处死剪取左心室组织。采用TUNEL染色法分析各组心肌细胞的凋亡水平;采用Western blot及qRT-PCR检测Pink1、Parkin及Mfn1的表达情况。结果:糖尿病模型组心肌细胞凋亡明显增多,大蒜辣素组心肌细胞凋亡改善明显;糖尿病模型组Parkin表达明显降低,大蒜辣素组表达明显增多,而Pink1的表达水平各处理组无明显差异。糖尿病模型组心肌细胞Mfn1表达明显增高;大蒜辣素组与糖尿病模型组相比,Mfn1表达明显降低。结论:大蒜辣素可有效抑制糖尿病心肌细胞凋亡,并通过激活Pink1/Parkin信号通路以保护心肌。 荆哲 刘峰舟 郭文韵 焦丕齐 陈永清关键词:大蒜辣素 心肌细胞 凋亡 DB/DB小鼠 PARKIN 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征对高血压Ⅰ级患者进驻高原后血压的影响 被引量:1 2017年 目的研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)对于短期进驻高原地区驻训的高血压Ⅰ级青年官兵血压的影响,并分析其机制。方法试验组测定9名高血压Ⅰ级并发OSAHS青年官兵的基础血压和高原驻训期间(10,30和60 d)血压、心率,并采集相应时间点外周血氧饱和度(SO2)、睡眠时间、睡眠呼吸暂停低通气指数(apnea-hypopnea index,AHI)、神经内分泌激素[肾素-血管紧张-醛固酮系统(RAAS)、皮质醇];对照组测定4名高血压Ⅰ级无OSAHS青年官兵的基础血压和高原驻训期间(10,30和60 d)血压、心率,并采集相应时间点SO2、睡眠时间、AHI、神经内分泌激素(RAAS、皮质醇)。结果试验组官兵进驻高原后收缩压和舒张压均较基线水平显著升高(P<0.05),以舒张压升高为主。SO2下降显著(P<0.05),睡眠时间显著缩短(P<0.05),AHI显著增加(P<0.05),神经内分泌激素水平(RAAS及皮质醇)显著升高(P<0.05)。对照组官兵进驻高原前后血压、外周血SO2、睡眠时间、AHI及神经内分泌激素均无显著差异。结论高原地区可导致高血压Ⅰ级的青年患者短时间血压持续升高,其机制可能与OSAHS引起血SO2下降、睡眠时间缩短、AHI增加及神经内分泌系统激活相关。 剡冬冬 焦丕奇 荆哲 郭文昀 陈永清关键词:阻塞性睡眠呼吸暂停综合征 血氧饱和度 糖尿病小鼠心肌组织中动力相关蛋白1的表达变化 被引量:1 2016年 目的观察db/db糖尿病小鼠与正常小鼠心肌组织中动力相关蛋白1(Drp1)表达水平的变化。方法 9只雄性db/db糖尿病小鼠,随机分为6周组(db/db 6week),12周组(db/db 12week),18周组(db/db18week);另设健康组雄性小鼠9只,随机分为6周组(wt 6week),12周组(wt 12week),18周组(wt 18week),每小组3只。分别利用实时定量PCR,Western Blot,免疫组织化学的方法检测心肌组织中Drp1的表达和定位。结果db/db糖尿病小鼠分组中Drp1的表达低于健康组,且随年龄的增长表达逐渐降低。结论糖尿病小鼠中Drp1表达进行性的降低,引起线粒体分裂异常从而导致线粒体的生物功能障碍,可能是糖尿病心肌病发生及发展的重要机制之一。 荆哲 刘峰舟 陈永清 刘燕 陈冲 景策关键词:心肌 EMRE在小鼠心肌缺血损伤中的作用及其相关机制的研究 被引量:6 2017年 目的:研究调节线粒体钙单向转运体活性所必须的蛋白(essential MCU regulator,EMRE)在小鼠心肌缺血损伤中发挥的作用及其相关机制。方法:利用心肌点注射EMRE腺病毒(Ad-EMRE)上调心肌组织的EMRE分子表达水平,对照小鼠心肌点注射增强绿色荧光蛋白腺病毒(Ad-eGEP),48 h后,采用结扎小鼠左冠状动脉前降支方法建立心肌梗死(MI)模型。实验设置三组:假手术组(给予Ad-eGFP);心肌梗死对照组(给予Ad-eGFP);心肌梗死处理组(给予Ad-EMRE)。三周后,利用小动物超声系统测定小鼠心脏功能;Western blot及免疫组化检测EMRE分子的表达;麦胚凝集素(WGA)染色检测心肌细胞肥大程度;马松(MASSON)染色检测心肌组织胶原含量;原位末端标记法(TUNEL)检测心肌组织的细胞凋亡;Western blot检测心肌组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的表达;MitoSOX荧光探针检测线粒体ROS水平。结果:与心肌梗死对照组相比,心肌梗死处理组的心功能明显变差,心肌肥厚明显加重,心肌组织胶原纤维含量更高。另外,心肌梗死处理组的心肌细胞凋亡明显增多,Caspase-3和Caspase-9表达明显升高,线粒体活性氧簇产生也明显增多。结论:EMRE过表达可增加线粒体ROS生成,诱导心肌细胞凋亡,加重心肌缺血损伤。 刘峰舟 荆哲 刘明莉 张恩尉 宁江华 牟佼关键词:心肌缺血