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桦褐孔菌膜二肽酶在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达: 2019年; 本研究利用巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris蛋白表达体系表达了药用担子菌桦褐孔菌的一个二肽酶基因。该二肽酶基因编码区全长1814bp,包含6个内含子,编码465个氨基酸。生物信息学分析发现,二肽酶基因编码的蛋白中不含信号肽序列,但在第55–77位氨基酸之间存在一个跨膜结构。将含跨膜结构和去跨膜结构蛋白的cDNA序列分别克隆到酵母分泌型表达载体pPICZαA上,电转化至巴斯德毕赤酵母X-33中,用1%(V/V)甲醇诱导重组菌株表达目标蛋白,采用SDS-PAGE和Western-blot检测表达蛋白。结果显示,巴斯德毕赤酵母可表达含跨膜结构的完整基因,但目标蛋白不能分泌到胞外,存在于破碎细胞的沉淀中,且没有催化活性;而去跨膜结构的蛋白则可分泌表达到胞外,并具有催化活性。Ni-NTA纯化去跨膜结构的桦褐孔菌二肽酶浓度可达0.12mg/mL,并发现其在pH 7.3、反应温度50℃、反应时间2h的条件下,以Gly-Gly为底物时,其比活为433U/mg。同时检测到其对Ile-Leu、Trp-Trp和Phe-Phe具有较高的水解活性。; 黄金金王艳胡萍袁雯雯赵艳霞郑维发; 关键词：桦褐孔菌二肽酶异源表达

一株呋喃香豆素基因转化的杀虫工程菌株及其应用: 本发明提供了一株可大量合成呋喃香豆素的构巢曲霉重组菌株，构巢曲霉重组菌株培养方法简单，成本低廉，此外其粗提产物具有较强的杀虫效率，并且产物提取方法简单，可有效用于昆虫的防治。具有广泛的实用价值和经济价值。; 赵艳霞郑维发黄文秀袁卫华胡萍殷澜张朋黄金金; 文献传递

粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法: 本发明涉及发酵工程领域，具体涉及一种粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法。该方法利用小麦秸秆或水稻秸秆作为营养来源，该方法是粗糙脉孢菌以小麦秸秆、水稻秸秆为唯一营养源生产麦角甾醇，该方法包括：粗糙脉孢菌菌种的富集、粗糙脉...; 赵艳霞郑维发殷澜袁卫华张朋胡萍黄文秀

粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法: 本发明涉及发酵工程领域，具体涉及一种粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法。该方法利用小麦秸秆或水稻秸秆作为营养来源，该方法是粗糙脉孢菌以小麦秸秆、水稻秸秆为唯一营养源生产麦角甾醇，该方法包括：粗糙脉孢菌菌种的富集、粗糙脉...; 赵艳霞郑维发殷澜袁卫华张朋胡萍黄文秀; 文献传递

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胡萍