刘方芳
- 作品数：8 被引量：43H指数：4
- 供职机构：广州中医药大学基础医学院更多>>
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- 广州城区大气细颗粒物对PC-12细胞凋亡的影响被引量：4
- 2017年
- 目的:研究细颗粒物(PM2.5)对PC-12细胞凋亡的影响及其信号途径。方法:从广州城区采集PM2.5,对PC-12细胞染毒,设对照组、不同浓度PM2.5组和N-乙酰基半胱氨酸(NAC)处理组,染毒24 h后用CCK-8法检测细胞存活率,H2-DCFDA探针标记法测定细胞内活性氧(ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达变化。结果:当浓度大于25μg/m L时PM2.5对PC-12细胞有较强的毒性,细胞存活率明显下降;用25、50和100μg/m L的PM2.5染毒24 h细胞内可见大量绿色荧光,说明ROS生成增多;流式细胞术和Western blot结果显示PM2.5染毒组细胞凋亡率明显增高,并伴随有Cytochrome C表达上调、Caspase 9和Caspase 3激活及PARP增多;加入抗氧化剂NAC可以抑制氧自由基生成,使细胞凋亡减少并下调相关分子的表达或激活。结论:PM2.5可通过诱导氧化应激,上调Cytochrome C表达,激活Caspase 9/3诱导PC-12细胞凋亡,这可能是PM2.5影响PC-12细胞功能的机制之一。
- 卢昕烁李岩王芳刘方芳金瑶王婴陈伟强李明
- 关键词：PM2.5PC-12细胞凋亡氧化应激
- 广州城区大气细颗粒物对PC-12细胞IL-8表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的研究广州城区大气细颗粒物（PM2．5）对PC—12细胞IL-8表达的影响，并从p38MAPK途径探索其作用机制，促进对PM2．5毒性的认识。方法采集广州城区大气中的PM2．5，对PC—12细胞染毒，设对照组、不同浓度PM2．5组和SB203580＋PM2．5组（用20μmol／L的SB230580预处理1h后再给予100μg／ml的PM2．5），Trizol法提取RNA用定量PCR法检测细胞IL-8表达情况，RIRP法提取细胞总蛋白，用Western blot法检测p38MAPK的磷酸化改变。结果定量PCR检测显示用25、50和100μg／ml的PM2．5染毒后PC-12细胞IL-8表达明显增高；Western blot结果显示PM2．5可磷酸化激活p38MAPK信号分子，加入p38MAPK抑制剂SB230580可以抑制PM2．5诱导的IL-8表达。结论PM2．5可通过p38MAPK途径诱导PC-12细胞表达细胞因子IL-8，这可能是其导致神经细胞毒性的机制之一。
- 吴彤卢昕烁李明刘方芳金瑶王婴李岩
- 关键词：PM2.5PC-12细胞细胞因子
- PM2.5对肝细胞脂质代谢和氧化应激的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨大气细颗粒物PM2.5对肝细胞脂质代谢和氧化应激的影响。方法收集2014年广州城区大气中的PM2.5,以CCK-8法分析6.25-100μg/ml的PM2.5对肝L02细胞的毒性。根据PM2.5浓度分别设立6.25μg/ml组、12.50μg/ml组和25.00μg/ml组,同时设立阴性对照组,比较各组细胞内三酰甘油和胆固醇含量、肝X受体α（LXRα）和固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）的表达水平及氧自由基水平。结果 PM2.5浓度为50.00μg/ml时,对肝L02细胞有明显毒性。各剂量组肝细胞内的三酰甘油浓度显著高于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。25.00μg/ml组的LXRα和SREBP-1c表达水平显著高于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。各剂量组的氧自由基水平显著高于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 PM2.5可通过LXRα和SREBP-1c诱导肝细胞脂质堆积,并诱发肝细胞氧化应激,这可能是PM2.5引起非酒精性脂肪肝的重要机制。
- 李明谢菁菁吴彤王婴刘方芳王芳李岩
- 关键词：PM2.5肝细胞脂质代谢氧化应激
- 心理疾病患者自我污名对自尊和社会支持的影响被引量：4
- 2014年
- 目的 探究心理疾病患者的自我污名对自尊水平和社会支持的影响.方法 将心理疾病内化污名量表（ISMI）,自尊量表（SES）,领悟社会支持量表（PSSS）编制成一张问卷,选取济南、天津、哈尔滨3个医院共109名心理疾病患者进行问卷调查,所得数据运用spss18.0进行分析.结果 分别用总体自我污名和自我污名的五个维度为自变量对自尊水平做回归,建立方程Y=4.585-0.722x（F=59.508,P＜0.001）和y=4.470-0.388x1＋0.813x2-0.198x3-0.064x4-0.192x5（F=16.609,P＜0.001）,发现自我污名对自尊水平有负面影响,其中自我疏离因子的显著性意义最强,其次是社交回避和无能感知,逃避现实和歧视体验对自尊的影响不显著;分别用总体自我污名和自我污名的五个维度为自变量对社会支持做回归,建立方程Y=3.710-0.354x（F=9.116,P＜0.01）和Y=3.474-0.391x1 ＋0.301x2＋0.047x3＋0.102x4-0.301x5 （F=5.695,P＜0.001）,发现自我污名对社会支持有负面影响,其中自我疏离因子显著性意义最强,其次是社交回避、歧视体验,而逃避现实和无能感知对社会支持的影响不显著.结论 心理疾病患者自我污名对自尊和社会支持有一定的负面影响.
- 刘方芳祝卓宏
- 关键词：自尊社会支持
- 白藜芦醇对PM2.5诱导的内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用被引量：9
- 2017年
- 目的研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)对细颗粒物PM2.5诱导人血管内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用。方法体外培养血管内皮细胞株EA.hy926,分为对照组、PM2.5组(采用100μg·mL^(-1)PM2.5处理)和不同浓度RES组(采用终浓度为5,10,20μmol·L^(-1)的RES预处理2h后再给予100μg·mL^(-1)的PM2.5)。分别采用CCK-8法检测各组细胞活性;荧光染色法检测细胞内活性氧(Reactive oxidative species,ROS)水平;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western Blot法检测凋亡相关蛋白Cytochrome C和Caspase3的表达。结果与对照组比较,PM2.5对EA.hy926细胞的活性具有明显的抑制作用(P<0.01),可诱导细胞内ROS生成增多、细胞凋亡(P<0.01)并促使凋亡相关蛋白Cytochrome C表达增高(P<0.01)和Caspase3活化(P<0.05);与PM2.5组比较,不同浓度RES预处理能显著抑制PM2.5诱导的ROS生成及细胞凋亡(P<0.01),同时可见Cytochrome C表达下调(P<0.05,P<0.01)和Caspase3活化减少(P<0.05,P<0.01)。结论白藜芦醇可以降低PM2.5诱导的血管内皮细胞氧化应激和凋亡,减轻PM2.5对血管内皮细胞的毒性,对其具有保护作用。
- 刘方芳金瑶李明吴彤王芳邝枣园李岩
- 关键词：白藜芦醇PM2.5血管内皮细胞氧化应激凋亡细胞内活性氧
- 细颗粒物对血管内皮细胞炎症因子表达的影响和研究白藜芦醇的干预作用被引量：2
- 2018年
- 目的研究可入肺颗粒物(PM2.5)对白细胞介素8(IL-8)表达的影响并观察白藜芦醇的抑制效果。方法将人血管内皮细胞EA.hy926株分为5组:空白组、模型A、B、C、D组(PM2.5:25,50,100,200μg·m L^(-1))。模型制备后测得PM2.5剂量为100μg·m L^(-1)时,对血管内皮细胞IL-8的表达有显著影响,因此选取的PM2.5剂量为100μg·m L^(-1)作为后续实验的浓度。然后细胞随机分为空白组、模型组(PM2.5,100μg·m L^(-1))和低、中、高3个剂量实验组(给予低、中、高3个剂量白藜芦醇5,10,20μmol·m L^(-1)预处理1 h后,再给予100μg·m L^(-1)PM2.5);SB对照组和SP对照组(分别用终浓度为25μmol·m L^(-1)的SB203580或SP600125预处理1 h后,再给予100μg·m L^(-1)PM2.5)。用定量PCR法检测IL-8表达情况,用免疫印迹法分析p38 MAPK蛋白的磷酸化表达。结果空白组、模型A、B、C、D组的IL-8 mRNA的表达量分别为1.00±0.04,8.07±0.79,19.4±0.61,20.4±1.90,20.7±2.27,模型A、B、C、D组与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,SB对照组中IL-8 mRNA的表达下降了63.5%,差异有统计学意义(P<0.01);但SP组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,低、中、高3个浓度实验组IL-8 mRNA的表达分别下降15.5%,17.9%,37.5%,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。模型组的p38 MAPK磷酸化蛋白表达与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,中、高2个剂量实验组的p38MAPK的磷酸化蛋白表达分别降低了33.8%,41.5%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过p38 MAPK信号通路降低PM2.5引起的EAhy.926细胞炎症因子IL-8表达,减轻血管内皮细胞炎症反应。
- 金瑶刘方芳李明李昕倡贾真余雪松李岩
- 关键词：白藜芦醇血管内皮细胞
- PM2.5对血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响及机制被引量：18
- 2017年
- 目的:从大气细颗粒物PM2.5对血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响,研究PM2.5对血管内皮细胞的毒性。方法:体外培养血管内皮细胞株EA.hy926,用不同浓度的PM2.5染毒24 h后,用CCK-8法测细胞的活性,用DCFH-DA荧光标记法检测细胞内氧自由基生成情况,用流式细胞术检测细胞凋亡率,然后用Western blot法检测凋亡相关蛋白细胞色素C、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表达变化。结果:CCK-8法结果显示PM2.5对血管内皮细胞有明显的毒性,在浓度大于25 mg/L时可使EA.hy926细胞活性显著下降;PM2.5染毒24 h后可见DCFH-DA荧光染色增强,说明细胞内有大量的氧自由基形成;流式细胞术和Western blot检测证实PM2.5可以通过上调细胞色素C表达和活化cleaved caspase-9和cleaved caspase-3而诱导EA.hy926细胞凋亡。此外,用N-乙酰半胱氨酸抑制氧自由基生成可以抑制血管内皮细胞凋亡,提示PM2.5引起的细胞凋亡与氧化应激有关。结论:PM2.5可导致血管内皮细胞氧化应激水平增强和凋亡增加,这可能是其影响心血管系统功能的机制之一。
- 王芳李岩卢昕烁杨杰波刘方芳余雪松李明
- 关键词：PM2.5血管内皮细胞氧化应激
- 丹参酮ⅡA磺酸钠对PM2.5染毒血管内皮细胞的保护作用被引量：7
- 2017年
- 目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对PM2.5引起的血管内皮细胞EA.hy926损伤的保护作用。方法取对数生长期EA.hy926细胞分为对照组、100μg/mL PM2.5组及STS干预组(先给予12.5、25、50μg/mL STS干预后再加入100μg/mL PM2.5)。24 h后CCK8法测定细胞的存活率,荧光标记法检测细胞内氧自由基生成情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡蛋白酶Caspase-9和Caspase-3的表达变化。结果 PM2.5对EA.hy926细胞有明显的毒性,可以导致细胞内氧自由基生成增多,并引起Caspase-9和Caspase-3活化造成细胞凋亡,与对照组比较差异有统计学意义;STS可以抑制PM2.5对EA.hy926细胞的毒性,降低胞内活性氧(ROS)生成及Caspase-9和Caspase-3的活化,减少细胞凋亡数目,与PM2.5组比较差异有统计学意义。结论丹参酮ⅡA磺酸钠可以减少PM2.5引起的血管内皮细胞凋亡,其保护作用可能与抑制氧自由基生成有关。
- 王芳卢欣烁李岩董晓婷杨杰波刘方芳金瑶李明
- 关键词：PM2.5氧化应激凋亡
