张小芳 作品数:11 被引量:23 H指数:4 供职机构: 云南农业大学植物保护学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
水稻细菌性条斑病菌LAMP快速检测方法的建立 被引量:1 2016年 以SYBR Green I荧光染料为指示剂,针对水稻细菌性条斑病菌糖基转移酶,设计了4条普通LAMP引物,并在此基础上设计了2条LAMP环引物,建立了水稻细菌性条斑病菌的环介导等温扩增可视化快速检测方法。结果表明:水稻细菌性条斑病菌呈荧光的阳性反应,近缘菌株则呈橙色的阴性反应;检测灵敏度DNA为100 fg/μL,菌悬液为3×103 cfu/m L。LAMP技术的建立为现场检疫和大规模检测提供了新的方法。 张小芳 付丽娜 刘雅婷 张海燕 李雪 姬广海关键词:水稻细菌性条斑病菌 环介导等温扩增技术 一株产酶溶杆菌1‑T‑1‑4及其应用 本发明具体涉及一株产酶溶杆菌1‑T‑1‑4及其应用。该产酶溶杆菌1‑T‑1‑4可制成水剂或可湿性粉剂,作用于三七或魔芋上,用于防治三七根腐病和魔芋软腐病等病害。 魏兰芳 姬广海 付丽娜 张小芳 杨俊文献传递 生防细菌对水稻的促生性及诱导抗性研究 被引量:5 2017年 研究了4株生防菌对水稻白叶枯病的抑制作用和菌悬液浸种、浸芽、浇苗和包衣4种处理对水稻生长的促进作用,及对水稻体内过氧化物酶POD、多酚氧化酶PPO、苯丙氨酸解氨酶PAL 3种保护酶的诱导表达作用。结果表明,4个菌株均对水稻幼苗有促生及诱导抗病性的作用。其中,WY2菌株诱导水稻抗病性和对水稻的促生性都要优于其他3株菌株。水稻幼苗接种生防细菌24 h后再接种病原菌,生防细菌能促进植物体内保护酶PAL、POD、PPO活性的提高,进而诱导植物抗病性的提高。 张小芳 艾瑛 魏兰芳 史恭林 王星 李凡 姬广海关键词:生防细菌 诱导抗性 水稻细菌性条斑病 一株辣椒溶杆菌ZST1‑2及其应用 本发明具体涉及一株辣椒溶杆菌ZST1‑2及其应用;该辣椒溶杆菌ZST1‑2可制成水剂或可湿性粉剂,作用于十字花科植物或烟草上,用于防治十字花科根肿病和烟草黑胫病病害。 姬广海 魏兰芳 付丽娜 张小芳 杨俊文献传递 中华常春藤细菌性叶斑病病原菌的鉴定 被引量:4 2016年 2015年春季在昆明市区绿化带种植的中华常春藤上发现一种由细菌侵染而引起的病害,称为中华常春藤细菌性叶斑病。通过发病症状、菌落形态观察、致病性测定、Biolog分析,16S rDNA序列和核糖体DNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分析比较,对昆明地区的常春藤叶斑病病原菌及其系统进化关系进行研究。分离病原菌接种中华常春藤叶片完成科赫法则验证,发病初期在叶片表面形成带有黄色叶晕的不规则褐色斑点,后期叶片边缘形成倒V字型坏死并起皱。将菌株CCT1和CCT6测序结果与现有的黄单胞菌菌株的16S rDNA序列和核糖体DNA的ITS序列构建进化树,结果均显示病原菌与野油菜黄单胞菌的序列相似度最大,属于同一支。研究确定该病原菌为野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)。这是中国首次报道由X.campestris引起的中华常春藤叶斑病。 张小芳 付丽娜 李雪 李兴明 姬广海关键词:细菌性叶斑病 野油菜黄单胞菌 土壤中茄科雷尔氏菌实时荧光定量PCR快速检测体系的建立与应用 被引量:5 2017年 根据茄科雷尔氏菌eg1基因,设计1对特异性引物,建立并优化实时荧光定量PCR反应体系,并对土壤中的茄科雷尔氏菌进行检测和评估。对采自云南省文山州5个县的100份青枯病带菌土壤进行检测,结果表明,100份土壤样品中,广南县15、22、24号,丘北县31、35、43号,麻栗坡县62、67、68号,马关县70、74、78、79、80、83、84号,共16份土壤样品中茄科雷尔氏菌含量大于105CFU/m L,预测细菌性青枯病发病风险较高;广南县12、20、21、23、26、27、29号,丘北县30、33、34、37、38、39、46、48号,麻栗坡县50、52、54、58、59、60、61、63、64、65、66、69号,马关县71、72、73、75、76、77、81、82、85、86号,砚山县1、2、4、5、7、9号,共43份土壤样品检测出的茄科雷尔氏菌含量在104~105CFU/m L之间,预测细菌性青枯病发病风险中等;其他土壤样品检测出的茄科雷尔氏菌含量均小于103CFU/m L,预测细菌性青枯病发病风险低,其中砚山县3、10、87、88、89、90号,广南县14、19、25、28、91、92、93号,丘北县32、36、44、49、94、95、96号,麻栗坡县51、57、97、98、99、100号,共26份土壤样品中未检测出茄科雷尔氏菌。 张海燕 张小芳 魏兰芳 李雪 艾瑛 姬广海关键词:实时荧光定量PCR检测 细菌性青枯病 一株辣椒溶杆菌ZST1-2及其应用 本发明具体涉及一株辣椒溶杆菌ZST1‑2及其应用;该辣椒溶杆菌ZST1‑2可制成水剂或可湿性粉剂,作用于十字花科植物或烟草上,用于防治十字花科根肿病和烟草黑胫病病害。 姬广海 魏兰芳 付丽娜 张小芳 杨俊文献传递 云南番茄细菌性疮痂病病原菌鉴定及其生防研究 被引量:5 2016年 从番茄病叶上分离到7株病原细菌菌株,采用柯赫氏法则确定为该病的病原。经培养性状观察、生理生化特性分析(Biolog系统)和16S r DNA序列分析,以及病原菌的寄主范围测定,确定该病原菌为疱斑黄单胞菌Xanthomonas campestris pv.vesicatoria(Dye)。依据室内平板抑菌试验初筛选结果,选取7株生防细菌进行温室复筛试验。温室试验中病原菌采用喷雾法接种,生防菌采用喷雾法和浸种法接种。研究测定7株生防细菌对番茄疮痂病的防治效果,同时比较两种接种方式对生防菌防治病害效果的影响。结果显示:生防菌菌株C3(解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens)、R^2-2(甲基营养型芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus)、HY(抗生素溶杆菌Lysobacter antibioticus)对番茄疮痂病的防效较高,两种接种方法处理下对该病的防效始终高于65%;生防菌采用浸种法处理时,生防菌C3对番茄苍痂病的防效最好,为83.36%;生防菌采用喷雾法处理时,生防菌HY对番茄苍痂病的防效最好,为76.18%;两种不同的接种方法对菌株1-7影响最大,对M3的影响最小。 张海燕 张小芳 刘雅婷 周丽洪 杨云丽 姬广海关键词:番茄疮痂病 BIOLOG RDNA 生防细菌 防效 Xanthomonas oryzae pv.oryzae LAMP可视化检测方法的建立 2021年 由Xanthomonas oryzae pv.oryzae引起的水稻白叶枯病严重影响我国水稻安全生产,尤其在杂交稻上,损失高达40%~60%,在水稻种子市场监管过程中由于缺乏快速检测手段,造成带菌种子在市场中流通。利用SYBR Green I作为荧光指示剂,建立了水稻白叶枯病菌的环介导等温扩增(LAMP)可视化快速检测方法。以水稻白叶枯病菌为对象,通过Primer Explorer V4.0软件一共设计出四条特异性的LAMP引物以及两条环引物,优化并建立了水稻白叶枯病菌的可视化快速检测方法。结果表明:在65℃恒温条件下反应1 h,LAMP检测特异性和灵敏度,加入SYBR Green I荧光染料,水稻白叶枯病菌呈现荧光绿色,对照菌株则保持不变,依然呈橙色。LAMP反应检测灵敏度DNA的浓度大小为为100 fg/μL,菌悬液为3×103 cfu/mL。应用LAMP技术检测水稻白叶枯病菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae具有特异性强、灵敏度高、操作简单快捷的特点,可用于市场监管过程中快速检测水稻白叶枯病菌。 王星 柴文栋 杨俊 张小芳 姬广海关键词:水稻白叶枯病菌 环介导等温扩增 魔芋软腐病菌血清学检测方法的建立 被引量:3 2017年 【目的】魔芋软腐病是魔芋生产中的一个重要细菌性病害,严重威胁着魔芋产量。【方法】本实验拟利用血清学技术建立快速检测魔芋细菌性软腐病菌的方法。【结果】采用棋盘滴定法确定抗原和抗血清的最适工作浓度分别为106CFU/m L和1∶10000;病原菌检测灵敏度为103CFU/m L;抗血清与其它细菌标准菌株的交叉反应结果均呈阴性,结果表明该方法具有较高的特异性。将该方法检测了24份魔芋种球、病土和带病植株,检出率高达91.67%。【结论】该技术可以有效的检测魔芋软腐病原菌胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovora subsp.carotovora,p.c.c.),为生产上魔芋种球快速检测软腐病菌提供了方法。 张小芳 张海燕 王永吉 魏兰芳 姬广海关键词:魔芋软腐病 细菌性病害 血清学检测