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丁豪杰

作品数：6 被引量：4H指数：2
供职机构：浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室更多>>
发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 5篇农业科学
  • 1篇生物学
  • 1篇环境科学与工...
  • 1篇医药卫生

主题

  • 3篇捻转血矛线虫
  • 3篇线虫
  • 2篇H
  • 1篇单链
  • 1篇单链抗体
  • 1篇蛋白
  • 1篇低胆固醇
  • 1篇疫病
  • 1篇原核表达
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇柔嫩艾美耳球...
  • 1篇肉鸡
  • 1篇肉用
  • 1篇肉用鹌鹑
  • 1篇提取物
  • 1篇配套系
  • 1篇球虫
  • 1篇球虫病
  • 1篇中药
  • 1篇中药提取

机构

  • 6篇浙江大学
  • 1篇宁波大学

作者

  • 6篇陈学秋
  • 6篇杜爱芳
  • 6篇丁豪杰
  • 5篇杨怡
  • 5篇黄艳
  • 3篇郑秀平
  • 1篇周前进
  • 1篇程海卫
  • 1篇陈一飞
  • 1篇卓洵辉

传媒

  • 3篇中国畜牧兽医...
  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇浙江畜牧兽医

年份

  • 1篇2017
  • 2篇2016
  • 3篇2015
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
捻转血矛线虫Hc-daf-22基因的原核表达及重组蛋白酶活性测定被引量：2
2017年
【目的】捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)是反刍动物主要的胃肠道线虫之一,该病在中国呈全国性流行。为研究捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)脂肪酸代谢相关蛋白DAF-22的生化特性,对其基因进行了克隆、原核表达,并对重组蛋白进行了体外酶活性测定。以期了解捻转血矛线虫Hc-DAF-22蛋白在过氧化物酶体脂肪酸β氧化中的作用。【方法】根据NCBI公布的H.contortus ZJ株daf-22 cDNA序列(Gen Bank:HQ738470.1)设计特异性引物,克隆Hc-daf-22基因并构建重组质粒pET-22b-Hc-daf-22,经测序鉴定正确后将其转化E.coli BL21,经终浓度为0.1 m mol·L^(-1) IPTG(isopropyl-β-d-thiogalactoside)诱导表达4h,离心菌液,50 mmol·L^(-1)浓度的PBS溶液重悬菌体溶液,冰浴超声破碎后上清沉淀分别进行SDS-PAGE分析。超声破碎后产物以镍柱亲和色谱法分离纯化重组蛋白Hc-DAF-22,并用SDS-PAGE检测蛋白纯化情况及以抗His血清作为一抗Western Blot鉴定。纯化后蛋白用超滤管浓缩除去盐分,并按照蛋白浓度测定试剂盒进行蛋白浓度测定。利用天然状态下的乙酰乙酰CoA(AcAc-CoA)分子会发生酮-烯醇互变形成烯醇化合物特性,酶活试验以乙酰乙酰辅酶a为底物建立标准曲线。硫解酶体外测活体系为(50 mmol·L^(-1) Tris-Cl pH 8.1,20 mmol·L^(-1) MgCl_2,60μmol·L^(-1)CoA,10μmol·L^(-1) AcAc-CoA,加入约0.1μg蛋白),通过记录反应过程中由于底物(AcAc-CoA)的减少而引起303 nm波长下的吸收值的变化,从而计算出硫解反应的初始反应速率,最终确定复性后的Hc-DAF-22的硫解酶活性。在相同条件下,取AcAc-CoA底物浓度为10μmol·L^(-1)的反应体系(50 mmol·L^(-1) Tris-Cl pH 8.1,20 mmol·L^(-1)MgCl_2,60μmol·L^(-1) CoA,10μmol·L^(-1) AcAc-CoA,加入约0.1μg蛋白于室温起始反应),分别调节反应体系的温度及pH梯度,确定Hc-DAF-22最佳酶活反应温度及pH条件。【结果】成功克隆Hc-daf-22基因,测序结果与NCBI已公布的H.
郑秀平丁豪杰郭筱璐杨怡黄艳陈学秋周前进杜爱芳
关键词：捻转血矛线虫原核表达酶活测定
Hc-fau基因结构域功能及Hc-FAU天然融合蛋白现象的初步研究
捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)为吸血性寄生虫,能够在L4早期阶段进入滞育状态来躲避不利于自身生存的恶劣条件。本研究旨在研究Hc-fau基因各结构域所发挥的功能以及Hc-FAU天然融合蛋白特性分析...
郭筱璐闫宝龙杨怡黄艳丁豪杰郑秀平陈学秋杜爱芳
关键词：捻转血矛线虫
鹌鹑常见疫病及防控对策
2016年
鹌鹑肉和鹌鹑蛋具有高蛋白、低脂肪、低胆固醇等特点,营养价值高,具有＂动物人参＂的美誉. 早在20世纪,鹌鹑养殖就已成为养殖业热点,目前我国已成为鹌鹑养殖业最发达的国家之一,养殖的商品鹌鹑主要有蛋用型鹌鹑和肉用型鹌鹑,其中蛋用鹌鹑主要有日本鹌鹑、中国白羽鹌鹑、黄羽鹌鹑、朝鲜鹌鹑、自别雌雄配套系鹌鹑;肉用鹌鹑主要有法国迪法克肉用鹌鹑、中国白羽肉用鹌鹑、法国菲鹌鹑、美国加利福利亚鹌鹑、法拉安肉用鹌鹑、莎维麦脱肉用鹌鹑等.
黄艳丁豪杰杨怡陈学秋杜爱芳
关键词：鹌鹑蛋防控对策常见疫病自别雌雄配套系肉用鹌鹑低胆固醇
鸦胆子提取物BJ-1抗鸡球虫病作用研究
鸦胆子提取物BJ-1具有抗多种原虫的作用,但是关于其潜在的抗球虫作用尚未有研究报道.为研究BJ-1对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)引起的肉鸡球虫病的治疗作用,我们制备了BJ-1饲料预混剂.将SPF级肉鸡分为6组,分...
蓝丽华左保杏子丁豪杰黄艳陈学秋杜爱芳
关键词：中药提取物抗球虫肉鸡柔嫩艾美耳球虫
捻转血矛线虫-胃癌细胞共培养模型的建立及互作研究
捻转血矛线虫早期感染会引起宿主胃组织的病理反应，诱发宿主的早期免疫应答，如表达分泌警报因子，敦促宿主尽快建立完整的Th2型免疫保护力。本试验旨在建立捻转血矛线虫体外培养模型，并在此基础上研究体外线虫感染早期免疫应答。使用...
杨怡郭筱璐丁豪杰郑秀平黄艳陈学秋杜爱芳
关键词：捻转血矛线虫MGCBGC细胞坏死
大容量天然鼠源核糖体展示单链抗体文库的构建与鉴定被引量：2
2016年
为了构建大容量、天然鼠源核糖体展示(ribosome display,RD)单链抗体(single-chain fragment variant,scFv)文库。通过提取SPF级小鼠脾脏总RNA,反转录为cDNA,利用引物分别扩增鼠抗体的VH、VL和Cκ基因,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法,通过Linker((Gly4Ser)3)相互拼接,构建单链抗体scFv基因文库和核糖体展示基因文库;经连接转化,对所构建基因文库进行菌落PCR鉴定和序列测定分析。所构建核糖体展示基因文库库容量约为5.6×1013,基因片段全长大小约为1 100bp,基因文库序列具有较好的完整性和多样性。本试验成功构建了一个大容量、天然鼠源核糖体展示单链抗体文库,为进一步筛选单链抗体奠定基础。
程海卫陈一飞丁豪杰杨怡卓洵辉郭筱璐陈学秋杜爱芳
关键词：核糖体展示基因文库单链抗体
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