刘杭
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：福建农林大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 梨休眠DELLA蛋白PpGAI基因的克隆与表达分析被引量：7
- 2016年
- 赤霉素(gibberellins,GA)通过DELLA蛋白的去阻遏作用来调控植物生命循环过程。为研究DELLA蛋白在梨花芽休眠过程表达情况及功能,以不同砂梨品种‘蜜雪梨’和‘黄花梨’为试材,分别采集整个休眠时期花芽,利用转录组测序数据、梨基因组CDS数据库筛选梨DELLA蛋白编码基因Pp GAI。分离并克隆得到两条Pp GAI基因,其开放阅读框(ORF)分别为1 743 bp和1 905 bp,命名为Pp GAI-1和Pp GAI-2,Gen Bank登录号为KU311002和KU311003,编码580和634个氨基酸,预测其均为亲水性蛋白,其蛋白分子量为62.98 k D和69.72 k D。进化树分析表明Pp GAI-1与苹果的亲缘关系最近,而Pp GAI-2与杜梨的亲缘关系最近。荧光定量研究显示在‘蜜雪梨’中两个Pp GAI基因均在休眠期出现一个表达低峰,在休眠解除临界期、休眠解除期和萌动期出现3个表达高峰;在‘黄花梨’中两个Pp GAI基因均在休眠解除临界期明显上调表达,并在萌动期达到最大表达峰值。本研究所获得梨两个编码DELLA蛋白Pp GAI基因对梨花芽休眠解除起到调控作用,且在不同砂梨品种间的休眠调控模式有所不同。
- 刘杭杨贺忠李亮王芳王芳李永裕
- 关键词：休眠赤霉素DELLA蛋白
- 不同低温需求量砂梨休眠相关基因PpMADS13的特征及表达模式被引量：4
- 2016年
- 为探究福建主栽的不同低温需求量砂梨Pyrus pyrifolia品种中休眠相关基因Pp MADS13-1和Pp MADS13-3序列及表达特征,以‘黄花’、‘蜜雪’两品种休眠时期的花芽为材料,克隆Pp MADS13-1和Pp MADS13-3基因,利用荧光定量PCR技术分析基因在休眠时期的表达变化情况。结果显示,Pp MADS13-1序列在砂梨两品种间较保守,而Pp MADS13-3序列在两品种间保守性较差;‘黄花’梨Pp MADS13-1hh和Pp MADS13-3hh在休眠期间随着休眠的解除下调表达,‘蜜雪’梨Pp MADS13-1mx和Pp MADS13-3mx在休眠期间呈现"M"型表达趋势。Pp MADS13-1和Pp MADS13-3均对砂梨的花芽休眠解除起到调控作用,在不同低温需求量品种间Pp MADS13-1和Pp MADS13-3的休眠调控模式有所不同。
- 李亮刘杭张桂池吴少华李永裕
- 关键词：砂梨
- 余甘粗多糖对HepG-2细胞氧化应激反应的影响被引量：2
- 2016年
- 为了研究余甘粗多糖对人肝癌细胞Hep G-2增殖能力及氧化应激反应的影响,将不同浓度余甘粗多糖(CEPS)作用于Hep G-2肝癌细胞,分别培养24、48、72 h后,利用倒置生物显微镜观察其细胞形态,采用MTT法检测细胞增殖抑制率并通过测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,乳酸脱氢酶(LDH)活力,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量来探讨余甘粗多糖对Hep G-2细胞氧化应激反应的影响。研究表明随着余甘粗多糖浓度的增加,细胞存活率降低,贴壁生长异常,悬浮死亡细胞数量增加,且MDA含量增加,SOD、LDH、GSH-Px活力均呈现出增强趋势,初步判断余甘粗多糖引起Hep G-2肝癌细胞受损,导致过氧化物MDA含量增加,相应的抗氧化物酶为了自我保护而增强活力,说明余甘粗多糖对Hep G-2肝癌细胞氧化应激反应产生影响,从而诱导Hep G-2细胞损伤,增殖活力下降。
- 王芳曹莉莉刘杭廖正萍王奕娜吴少华李永裕
- 关键词：HEPG-2细胞MTT法氧化应激反应
- 沙梨PpGAI3基因的分离与原核表达分析被引量：4
- 2017年
- 【目的】分离沙梨DELLA蛋白编码基因PpGAI3,探究其蛋白在花芽休眠中的表达情况。【方法】从不同需冷量沙梨品种‘蜜雪梨’和‘黄花梨’中分离PpGAI3基因,重组到p EASY-Blunt E1表达载体中,转化BL21(DE3)宿主菌后经IPTG诱导表达,并对表达菌株进行SDS-PAGE和Western blotting检测。【结果】获得2种沙梨的PpGAI3基因,分别命名为PpGAI3mx和PpGAI3hh,Gen Bank登录号为KU954535和KX078215,其开放阅读框(ORF)为1 641 bp,编码546个氨基酸,预测其为亲水性不稳定蛋白。进化树分析表明PpGAI3mx和PpGAI3hh与白梨的亲缘关系最近;成功构建了p EASY-Blunt E1-PpGAI3原核表达载体,得到蛋白分子质量约60 ku的诱导表达产物。【结论】所得沙梨DELLA蛋白编码基因PpGAI3为植物DELLA蛋白家族中的成员,在梨花芽休眠过程中具有特异表达,且表达产物大部分以不溶性包涵体形式存在。
- 刘杭王芳李亮王文婷杨贺忠马鑫瑞吴少华李永裕
- 关键词：沙梨休眠DELLA蛋白原核表达
