王芸
- 作品数：9 被引量：50H指数：4
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金青岛市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生艺术电子电信更多>>
- 慢病毒介导的热休克蛋白70基因对缺血/缺氧诱导嗜铬细胞瘤细胞内钙通道调节机制的研究被引量：5
- 2016年
- 目的：探讨慢病毒介导的热休克蛋白70（HSP70）基因表达对缺血/缺氧嗜铬细胞瘤（PC12）细胞内质网钙稳态的影响及钙通道的调节机制。方法取对数生长期的PC12细胞，分为重组慢病毒感染组〔感染含HSP70及绿色荧光蛋白（GFP）基因的慢病毒〕、慢病毒对照组（感染含GFP但不含HSP70基因的慢病毒）及未感染组。采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测PC12细胞经缺血/缺氧处理4、8、12、24h后的细胞活性，以选取最佳缺血/缺氧时间。采用实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测缺血/缺氧8h时HSP70、肌质/内质网Ca2＋-ATP酶亚型（SERCA2a、SERCA2b）、兰尼碱受体2（RyR2）、三磷酸肌醇受体1（IP3R1）的mRNA转录水平；采用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测缺血/缺氧8h时HSP70、SERCA、IP3R的蛋白表达水平；采用流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）及游离钙离子（[Ca2＋]i）水平。结果随着缺血/缺氧时间延长，各组细胞活性呈先增强后减弱的趋势，均于8h时达峰值。缺血/缺氧8h时，重组慢病毒感染组细胞活性较未感染组和慢病毒对照组均明显升高〔A值（×10-2）：20.3±2.2比14.1±2.1、15.0±1.6，均P＜0.01〕，HSP70和SERCA的mRNA及蛋白表达均明显上调〔HSP70mRNA（2-ΔΔCt）为0.785±0.018比0.428±0.019、0.423±0.023，HSP70蛋白（灰度值）为2.72±0.20比1.56±0.36、1.63±0.41，SERCA2amRNA（2-ΔΔCt）为0.971±0.037比0.367±0.014、0.347±0.012，SERCA2bmRNA（2-ΔΔCt）为8.869±0.162比3.015±0.091、2.941±0.091，SERCA蛋白（灰度值）为2.84±0.18比1.48±0.26、1.52±0.29〕，IP3R2的mRNA及蛋白表达均明显下调〔IP3R2mRNA（2-ΔΔCt）为0.183±0.020比0.439±0.020、0.433±0.040，IP3R2蛋白（灰度值）为1.15±0.12比1.91±0.20、1.83±0.19〕，差异均有统计学意义（均P＜0.01），而RyR1mRNA表达差异无统计学意义〔2-ΔΔCt（×10-3）：1.97±0.63比2.02±0.22、2.01
- 刘媛关纯郭璐璐李庆淑王芸谢春雨胡丹曲彦
- 关键词：热休克蛋白70PC12细胞
- N6-甲基腺嘌呤修饰中相关基因对肝细胞癌患者预后的影响
- 背景与目的:肝细胞癌（HCC）是常见的原发性恶性肿瘤之一,也是人类癌症相关死亡的常见原因。越来越多的证据表明,N6-甲基腺苷（m6A）甲基化的失衡与癌症的发生和发展密切相关。本文旨在研究N6-甲基腺嘌呤修饰中相关基因对肝...
- 王芸
- 关键词：肝细胞癌预后模型
- 慢病毒介导的BAG-1L基因对缺氧状态下人神经母细胞瘤细胞的保护作用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨慢病毒介导Bcl-2结合抗凋亡基因1L（BAG-1L）过表达对缺氧／复氧诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）损伤的保护作用，研究其对磷酸肌醇-3激酶／丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K/AKT）通路的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞，取对数生长期细胞分为重组慢病毒感染组（感染携带BAG-1L基因及荧光蛋白基因的重组慢病毒）、载体对照组（感染携带荧光蛋白基因但不携带BAG-1L基因的慢病毒）及细胞对照组（未感染慢病毒）。感染48h后采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测靶细胞BAG-1L的表达；3组细胞经缺氧8h／复氧24h处理后，采用CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测细胞活性；采用别藻蓝蛋白标记的膜联蛋白V／7-氨基放线菌素D（Annexin V-APC／7-AAD）双染法检测细胞凋亡，并进行流式分析；采用Western Blot试验检测细胞BAG-1L、热休克蛋白70（HSP70）、AKT及磷酸化AKT（p-AKT）的蛋白表达。结果重组慢病毒感染48h后可观察到外源性BAG-1L特异性蛋白条带，而细胞对照组和载体对照组无此特异性蛋白条带。经缺氧，复氧处理后，重组慢病毒感染组细胞活性较细胞对照组和载体对照组均明显增高（A值：0．689±0．036比0．425±0．013、0．400±0．012），细胞凋亡明显减少[凋亡率：（26．97±1．82）％比（36．60±1．45）％、（35．77±3．74）％]，BAG-1L、HSPT0、P-AKT蛋白表达水平明显升高（BAG-1L蛋白（灰度值）：2．405±0．167比0．529±0．141、0．601±0．099，HSP70蛋白（灰度值）：0．997±0．123比0．634±0．091、0．584±0．106，p-AKT蛋白（灰度值）：1．234±0．118比0．661±0．210、0．712±0．199，均P〈0．01]；而AKT蛋白表达虽高于细胞对照组和载体对照组（灰度值：1．103±0．269比0．646±0．188、0.791±0．326），但差异无统计学意义（均P〉O．05）。细胞对照组和载体对照组各指
- 王芸李庆淑贾超谢春雨宋砚坤张楠曲彦
- 关键词：抗凋亡P13K/AKT通路
- 集束化护理在NICU医疗器械相关性压疮中的应用被引量：8
- 2018年
- 目的探讨集束化护理策略在新生儿重症监护室(NICU)医疗器械相关性压疮(MDR PU)中的防范效果。方法选取2013年1~10月的100例压疮高危患儿作为对照组,2015年3~12月的110例压疮高危患儿作为观察组。对照组采用常规护理进行护理干预,观察组采用集束化护理与常规护理相结合的方法进行干预。比较两组患儿医疗器械相关性压疮的发生情况。结果观察组医疗器械相关性压疮的发生率低于对照组,且发生时间晚于对照组。结论集束化护理能够明显降低NICU医疗器械相关性压疮的发生率和严重程度,延长压疮发生时间,有很好的临床应用价值。
- 于蓉叶蕊王芸
- 关键词：集束化护理新生儿重症监护室
- 音视自适应显著性检测模型的研究
- 人眼注意机制不仅受视觉刺激的影响也取决于音频信号的刺激,现有视频显著性检测算法仅使用视觉信号作为输入信息,很少考虑音频信号对显著性的作用。然而音频信号中包含语义丰富的听觉信息,此信息对显著性具有重要价值。因此,充分利用音...
- 王芸
- 帕博利珠单抗对晚期非小细胞肺癌患者T淋巴细胞亚群的影响及疗效观测被引量：31
- 2021年
- 背景与目的本研究旨在探究非小细胞肺癌患者应用帕博利珠单抗治疗前后外周血淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法选取2015年1月-2020年12月至青岛大学附属医院及潍坊市人民医院行帕博利珠单抗治疗的32例非小细胞肺癌的患者为观察组,另外选取同期30例健康查体者为对照组。治疗前、治疗后第1、2、4周期,采用流体细胞术检测患者外周血淋巴细胞亚群水平的变化。结果非小细胞肺癌患者治疗前的CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)指标较对照组明显下降(P<0.05),CD8^(+)水平明显升高(P<0.05);应用帕博利珠单抗治疗1个周期后,淋巴细胞亚群较免疫治疗前的变化未见明显统计学差异;治疗2周期后CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)数值较治疗前升高(P>0.05),CD8^(+)指标较治疗前下降(P<0.05);治疗4周期后CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)数值较治疗前得到显著改善(P<0.05),CD8^(+)指标较治疗前明显下降(P<0.05);疗效达到疾病稳定(stable disease,SD)/部分缓解(partial response,PR)患者在治疗过程中,第4周期的CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)数值较治疗前升高(P<0.05),CD8^(+)指标较治疗前降低(P<0.05);疗效达到疾病进展(progressive disease,PD)患者在治疗过程中,淋巴细胞亚群变化较治疗前均没有明显统计学差异(P>0.05)。同时本文通过分析显示,程序性死亡受体配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)表达与否及病理学类型对免疫治疗效果的影响不明显。通过多因素分析显示,同时观察CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)的变化对预测免疫治疗效果更有意义。结论帕博利珠单抗可以调节非小细胞肺癌患者T淋巴细胞亚群的变化,改善患者机体的免疫状态,且未见明显不良反应,同时治疗过程中监测淋巴细胞亚群变化可预测免疫治疗效果。
- 王芸王郁阳姜曼赵月妹张晓春
- 关键词：肺肿瘤免疫治疗T淋巴细胞亚群
- BAG-1L过表达对缺氧神经细胞保护作用机制的研究
- 目的： 探讨重组慢病毒介导的BCL-2结合抗凋亡基因（BCL-2 associated athanogene-1,BAG-1）过表达对缺氧诱导的人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）损伤的保护作用，并研究其与热休克蛋白7...
- 王芸
- 关键词：神经母细胞瘤抗凋亡基因热休克蛋白70
- 文献传递
- Bcl-2结合抗凋亡基因沉默对缺氧状态下人神经母细胞瘤细胞凋亡及热休克蛋白70表达的影响被引量：5
- 2017年
- 目的探讨Bcl-2结合抗凋亡基因（BAG-1）对缺氧／再复氧损伤后人神经母细胞瘤细胞（SH—SY5Y）的保护作用，以及对热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。方法取对数生长期的SH—SY5Y细胞，采用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）技术抑制BAG-1表达。将筛选好的细胞分为细胞对照组、慢病毒对照组（仅含荧光蛋白的慢病毒感染组）、BAG-1小干扰RNA（siRNA）组（即BAG-1基因沉默组，感染含BAG-1基因干扰序列及荧光蛋白的慢病毒），根据沉默序列不同分为BAG-1 siRNA—α组、BAG-1 siRNA-β组。感染重组慢病毒后72h采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测SH—SY5Y细胞中BAG-1和HSP70蛋白表达；缺氧处理后采用CCK-8测定各组细胞活性；用流式细胞仪检测细胞凋亡情况；用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT—qPCR）检测各组细胞HSP70转录水平。结果慢病毒感染后72h，Western Blot检测结果表明BAG-1 siRNA—β组干扰效果优于BAG-1 siRNA-α组。各组细胞活性均随缺氧时间延长而呈先增强后减弱的趋势，且于8h时达峰值。经缺氧处理8h后，BAG—1 siRNA—β组细胞活性[吸光度（A）值]明显低于细胞对照组、慢病毒对照组及BAG-1 siRNA-α组（0．59±0．09比0．94±0．12、0．90±0．11、0．91±0．14，均P〈0．01）；BAG—1 siRNA-β组凋亡细胞率明显高于细胞对照组、慢病毒对照组及BAG-1 siRNA-α组[（34．63±3．46）％比（14．83±3．75）％、（19．93±6．49）％、（16．40±1．18）％，均P〈0．01]。BAG-1 siRNA—β组HSP70蛋白及mRNA转录水平与细胞对照组、慢病毒对照组及BAG-1 siRNA-α组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论BAG-1基因在缺氧神经细胞中能够发挥保护作用，减少细胞凋亡，其保护作用可以独立于HSP70基因。
- 宋砚坤李智王奉涛刘海燕曲彦王芸谢春雨胡丹
- 关键词：热休克蛋白70细胞凋亡
- HSP70沉默表达对缺氧状态下SH-SY5Y细胞凋亡的影响及机制研究
- 2017年
- 缺氧性脑病是人类死亡的重要原因，且发病呈逐年增高的趋势。虽然对缺氧性脑病的研究已涉及多方面，但因其发病机理复杂、部位特殊，仍无理想治疗药物。因此，寻求防治缺氧性脑病的方法已成为刻不容缓的任务。有研究表明，外源性HSP70表达可有效减轻神经元缺氧再复氧损伤的程度，但其作用机制尚不明确。本实验采用RNA干扰技术沉默HSP70，观察其对缺氧状态下神经细胞凋亡及BAG-1、Caspase-3、NF—κB表达的影响，进一步探讨HSP70在缺氧性脑病中的保护作用及机制。
- 谢春雨谢伟峰李庆淑王芸宋砚坤张楠胡丹曲彦
- 关键词：HSP70表达缺氧状态SH-SY5Y缺氧性脑病缺氧再复氧损伤RNA干扰技术
