目的研究晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对体外培养的小鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGCs)凋亡及晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)表达的影响,探讨AGEs诱导SGCs凋亡的可能作用途径,分析神经型老年性聋的可能致病机制。方法运用Tunel法,采用荧光显微镜观察不同浓度、不同时间AGEs对培养的SGCs凋亡的影响,同时用Real time RTPCR方法检测RAGEm RNA表达。结果 AGEs加入细胞培养中,可明显诱导SGCs凋亡,凋亡率与剂量、时间呈正相关。发生凋亡的同时有RAGEm RNA表达增强。结论AGEs对SGCs有诱导凋亡的作用,该作用可能通过RAGE介导。AGEs促使SGCs凋亡可能是神经型老年性聋的发病机制之一。
目的探讨可溶性RAGE(soluble form of receptor for advanced glycation-end products,sRAGE)对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)-晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation-end products,RAGE)介导的C57BL/6J小鼠SGCs(spiral ganglion cells,SGCs)凋亡及RAGE受体表达的影响。方法不同浓度的sRAGE作用于培养5天后的螺旋神经节细胞和加入AGEs-BSA作用2 h后的SGCs细胞,采用免疫荧光法鉴定SGCs,通过流式细胞术检测细胞凋亡,以及RT-PCR检测RAGE的mRNA的表达,琼脂糖凝胶电泳对扩增结果进行确认,同时采用western blot技术检测凋亡相关蛋白Bax、BCL-2及caspase-3的表达情况。结果原代培养获得足够数量以及活性良好的SGCs,并用小鼠抗神经微丝蛋白抗体染色以鉴定。单纯向SGCs加入不同浓度的sRAGE,细胞凋亡无明显增加,RAGE受体的表达无明显增多;而不同浓度sRAGE加入AGEs作用的SGCs后,可见SGCs的凋亡随sRAGE浓度增加而减少,呈浓度相关性,RAGE受体的mRNA表达也随之减弱。凋亡相关蛋白中,BCL-2表达升高,Bax及cleaved caspase-3表达降低。结论 s RAGE可以减少AGEs诱导的SGCs的凋亡,并减少膜上RAGE受体的表达,可能与s RAGE竞争性结合AGEs而不产生相应生物学效应有关。
