目的:探讨低糖高乳酸环境对宫颈癌细胞生存的影响,以及对EGFR-m TOR通路的调节作用。方法:将Hela细胞培养于常糖(葡萄糖10mmol/L)、低糖(葡萄糖3mmol/L)、高乳酸(葡萄糖10mmol/L,乳酸2.5mmol/L)、低糖高乳酸(葡萄糖3mmol/L,乳酸2.5mmol/L)4种环境下,CCK-8法测定Hela细胞的生长抑制率,流式细胞术测定细胞周期。荧光实时定量PCR法检测EGFR和m TOR mRNA水平表达。结果:与常糖组相比,高乳酸组的细胞抑制率显著升高(P<0.01),48h细胞G1/G0期比例显著升高(P<0.01),细胞凋亡率、EGFR和m TOR mRNA表达水平均无变化。与常糖组相比,低糖组的细胞抑制率显著升高(P<0.01),48h细胞凋亡率显著降低(P<0.01),细胞各周期比例变化与常糖组无差异,EGFR表达水平降低(P<0.05)。与常糖组相比,低糖高乳酸组的细胞抑制率显著升高(P<0.01),但低于低糖组(P<0.01)和高乳酸组(P<0.05),48h G1/G0期比例显著升高(P<0.01),细胞诱导凋亡率显著升高(P<0.01),EGFR和m TOR mRNA表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:Hela细胞在低糖高乳酸环境中的存活状况好于单纯低糖和单纯高乳酸环境,且伴随着EGFR和m TOR基因表达水平上升。
目的探讨低糖高乳酸微环境对表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)抑制He La细胞的影响和可能机制。方法 He La细胞在常糖(葡萄糖10 mmol/L)和低糖高乳酸(葡萄糖3 mmol/L+乳酸2.5 mmol/L)环境下培养,并分别给予2.67μmol/L吉非替尼干预。采用CCK-8法测定He La细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期,荧光定量RT-PCR检测EGFR和m TOR m RNA水平的表达。结果与常糖组比较,低糖乳酸组24 h和72 h细胞抑制率均显著升高(P<0.01),48 h细胞抑制率略高于常糖组。与吉非替尼阴性组比较,常糖+吉非替尼组和低糖乳酸+吉非替尼组在24、48、72 h三个时点细胞抑制率均显著上升(P<0.01)。与常糖组相比,低糖乳酸组48 h细胞诱导凋亡率显著上升(P<0.01),低糖乳酸+吉非替尼组细胞诱导凋亡率较低糖乳酸组显著降低(P<0.01)。与常糖组比较,低糖乳酸组存活细胞的EGFR和m TOR m RNA表达水平上调(P<0.05)。常糖+吉非替尼组的EGFR和m TOR m RNA水平均上调(P<0.05)。与低糖乳酸组比较,低糖乳酸+吉非替尼组的EGFR和m TOR m RNA上调水平有显著差异(P<0.01)。结论高乳酸低糖环境下吉非替尼可大幅度上调存活He La细胞EGFR和m TOR表达水平,可能是诱导He La细胞抵抗EGFR-TKI的机制。
