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张传凯
作品数:
1
被引量:10
H指数:1
供职机构:
厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤中心
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发文基金:
厦门市科技计划项目
福建省医学创新课题
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
徐毅
福建医科大学附属第一医院
李文鹏
厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤...
罗琪
厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤...
罗维远
厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤...
陈跃达
福建医科大学附属第一医院
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作者
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黄正接
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张传凯
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中华肿瘤杂志
年份
1篇
2015
共
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下调Oct4基因表达对MDA—MB-231乳腺癌干细胞生物学特性的影响
被引量:10
2015年
目的探讨下调转录因子Oct4表达水平对MDA-MB-231乳腺癌干细胞生物学特性的影响及其意义。方法应用无血清悬浮培养法从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离富集乳腺癌干细胞,流式细胞术检测CD44^+/CD24^-1/low细胞亚群的比例,小鼠皮下成瘤实验和紫杉醇抑制实验鉴定无血清悬浮培养法获得的MDA—MB-231乳腺癌干细胞,逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测MDA—MB-231乳腺癌干细胞中Oct4的表达情况,并利用小分子RNA干扰片段干扰Oct4的表达,干扰实验设空白对照组(不转染任何siRNA)、阴性对照组(转染对细胞无任何干扰作用的siRNA序列)和Oct4siRNA组(转染对Oct4基因有干扰作用的siRNA序列)。分别利用四甲基偶氮唑蓝法、Transwell小室法和紫杉醇抑制实验,检测干扰Oct4表达后MDA—MB-231乳腺癌干细胞的增殖能力、侵袭能力和对化疗药物的耐药性。结果MDA—MB-231乳腺癌于细胞以悬浮球的形式生长扩增,MDA—MB-231乳腺癌干细胞CD44^+/CD24^-/low细胞亚群的比例(92.7%)高于MDA—MB-231乳腺癌细胞(76.6%,P〈0.05)。接种0.2×10^7个/ml细胞数,MDA—MB-231乳腺癌干细胞肿瘤体积为(124.60±13.65)mm^3,大于MDA-MB-231乳腺癌细胞形成的肿瘤体积[(68.20±9.99)mm^3,P〈0.01)]。紫杉醇对MDA-MB-231乳腺癌干细胞的半数抑制浓度(IC50)为(8.20±0.34)μg/ml,高于MDA—MB-231乳腺癌细胞[(4.40±0.48)μg/ml,P〈0.01)]。MDA-MB-231乳腺癌干细胞Oct4的表达水平高于乳腺癌细胞(P〈0.05)。下调Oct4蛋白的表达后,Oct4siRNA组MDA—MB-231乳腺癌干细胞从第3天开始其增殖能力低于空白对照组和阴性对照组(均P〈0.05)。侵袭性实验结果显示,转染72h后,与空白对照组和阴性对照组比较,Oct4siRNA组MDA—MB-231乳腺癌于细胞穿膜数量为(46.52±2.58)个,少于空白对照组[(77.29±
李文鹏
罗维远
徐毅
丁伟基
陈跃达
张传凯
罗琪
黄正接
关键词:
肿瘤干细胞
RNA干扰
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