- 1例鸡安卡拉病的诊断及病原分离鉴定被引量：10
- 2016年
- 自去年6月份以来,我国河南、山东、湖北等省部分地区饲养的商品鸡发生鸡安卡拉病,该病以心包积液与肝炎为主要病变特征。解剖湖北仙桃某鸡场送检病鸡可见心包积液、肝脏出血的症状,提取病鸡组织DNA进行禽腺病毒(FAV)hexon基因的PCR扩增和克隆测序,结果表明该病毒序列同源性与FAVⅠ群4型最高。用病毒液接种9日龄SPF鸡胚,盲传3代后收集尿囊液进行PCR检测并与之前的结果进行比对。同时用其感染1日龄SPF雏鸡,能够复制出鸡安卡拉病。
- 蔡宇威刘兰梁雄燕杨玉莹李拓凡黄专顾玉芳
- 关键词：病原分离腺病毒
- 饲料中添加金荞麦对生长育肥猪生产性能和血液生理生化指标的影响被引量：8
- 2017年
- 现代药理研究表明，金荞麦在抗肿瘤及降糖、调脂、抗风湿方面作用明显，在抗菌、抗炎、镇咳、祛痰、镇痛等方面也有良好的作用。饲料中添加中草药用来饲养动物，在我国古代就有了记载。中草药饲料添加剂能增加育肥猪的食欲、采食量，对育肥猪的生长有明显的促进作用。中草药药源广，价格低，无毒副作用。金荞麦在畜牧养殖中应用很广，研究金荞麦在畜牧生产中的实际效果具有重要意义。
- 梁旭东刘兰蔡宇威梁雄燕
- 关键词：中草药饲料添加剂生长育肥猪血液生理生化指标金荞麦畜牧生产
- 基于Multi-PCR的淮南王土鸡J亚群禽白血病诊断及病原鉴定
- 2016年
- 为确诊疑似J亚群禽白血病病例,试验从湖北某养殖户送检的散养淮南王土鸡典型病变组织中,提取DNA,用分别针对A、B、J亚群禽白血病病毒(ALV)和针对马立克氏病病毒(MDV)、网状内皮增生症病毒(REV)的Multi-PCR方法进行检测,结果只扩增出与ALV-J对应的条带,而无MDV、REV、ALV-A、ALV-B对应条带,表明鸡群感染ALV-J。用DF-1细胞进行病毒分离培养,以抗ALV-J的单克隆抗体JE9为一抗进行间接免疫荧光试验结果显示DF-1细胞呈现亮绿荧光,表明从病料中分离到的病毒为ALV-J,这也是首次从淮南王土鸡分离到ALV-J。
- 梁雄燕刘兰李拓凡顾玉芳方守国杨玉莹
- 关键词：J亚群禽白血病
- 蛋鸡REV HB2015株的分离鉴定及gp90基因分析
- 2016年
- 采用Multi-PCR分别对湖北某蛋鸡场送检的腺胃肿大、出血,心、肺、脾有肿瘤结节的14周龄海兰褐蛋鸡进行A、B、J亚群禽白血病病毒、马立克氏病病毒(MDV)和禽网状内皮增生症病毒(REV)进行检测,结果表明病鸡感染REV。取病鸡肝组织制备病毒悬液接种DF-1细胞,用含1%FBS的DMEM培养7 d,传代至12孔细胞培养板培养5 d,以鼠抗REV gp90蛋白抗体为一抗,FITC标记的羊抗鼠Ig G为二抗进行间接免疫荧光试验,接毒细胞呈现亮绿荧光,表明分离到1株REV,命名为REV HB2015。用特异性引物gp90F/gp90R对分离株gp90基因进行PCR扩增和克隆测序,结果分离毒株的gp90基因全长1 191 bp,经DNAStar分析显示分离毒株的gp90与REVⅢ型代表株CSV同源性最高(98.9%),且处于进化树同一分支上,表明REV HB2015株与CSV同型,属于REVⅢ型。
- 梁雄燕刘兰李拓凡顾玉芳方守国杨玉莹
- 关键词：蛋鸡REVGP90基因
- ALV-A诱发蛋鸡髓细胞瘤和淋巴瘤混合型禽白血病自然病例初报被引量：4
- 2017年
- 湖北某蛋鸡场发生肿瘤性疾病,剖检可见病鸡肝、肾、脾肿大,肝脏表面有大小不等的灰白色结节,其中2只(2/7)病鸡肠系膜明显增厚并布满大量灰白色结节。取病变组织制备石蜡切片,HE染色,部分病鸡(4/7)可见髓细胞瘤及淋巴细胞瘤。采集病变组织进一步进行PCR、病毒分离和IFA等实验室检测,结果病料组织DNA中仅检测出A亚群禽白血病病毒(ALV-A)核酸序列,未检测出其他亚群ALV;用病料制备组织悬液接种的DF-1细胞,IFA呈ALV-A阳性、ALV-J阴性。将分离的病毒静脉接种无外源性ALV感染的13日胚龄蛋鸡鸡胚,可复制出与自然病例类似的肿瘤。结果表明,分离的病毒为ALV-A,病鸡确诊为由ALV-A引起的髓细胞瘤和淋巴细胞瘤混合型禽白血病。这是在国内首次发现ALV-A诱发蛋鸡髓细胞瘤和淋巴瘤混合型禽白血病的自然病例。
- 梁雄燕刘兰李拓凡方守国杨玉莹顾玉芳
- 关键词：蛋鸡淋巴细胞瘤
- 抗柔嫩艾美耳球虫EtRP单克隆抗体的制备及其免疫保护效果
- 2017年
- 棒状体蛋白(EtRP)在柔嫩艾美耳球虫入侵宿主细胞的过程中起重要作用。该蛋白在球虫发育阶段的早期表达,具有保护性抗原的性质,其相应抗体可抑制球虫对宿主的感染。采用纯化后的p GEX-6P-1-EtRP重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗EtRP的单克隆抗体,将不同剂量的单克隆抗体注射试验鸡群再对免疫鸡群攻虫,7 d后致死鸡群并计算卵囊减少率、相对增重率以及盲肠病变评分情况。结果表明,所制备的单克隆抗体亚型为IgG1,经Western-blot检测能特异性识别重组蛋白,经间接ELISA测定其效价大于1∶128 000。此外,单克隆抗体对鸡的被动保护性试验结果显示相对增重率、病变评分、卵囊减少率均随着免疫剂量的增加而增大,表明一定剂量的单克隆抗体可以有效减少柔嫩艾美耳球虫对鸡群的感染。
- 陈浩蔡宇威刘兰梁雄燕卢渊录
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫单克隆抗体免疫保护
- 不同精粗比日粮对鲁西黄牛犊牛血液生化指标的影响被引量：6
- 2017年
- 我国传统的肉牛饲养方法是将犊牛饲养至6-8月龄进行断奶,但在哺乳中后期母乳无法满足犊牛快速生长发育的需要。随着时代的发展,传统的断奶方案已不能满足肉牛高效生产的需要,甚至导致犊牛瘤胃和消化道发育迟缓,最终影响肉牛断奶后的生长发育。
- 吴瑜婷刘兰蔡宇威梁雄燕
- 关键词：血液生化指标犊牛鲁西黄牛精粗比日粮断奶后
- 禽安卡拉病毒Hexon蛋白多克隆抗体的制备被引量：4
- 2018年
- 为进一步建立Ⅰ群血清4型禽腺病毒（FADV-4）的特异性检测方法,根据本实验室分离鉴定的安卡拉病毒的基因组序列,设计针对六邻体蛋白（Hexon）基因的特异性引物,经PCR扩增,连接至p ET-28a中,构建原核表达载体p ET-28a-Hexon。将其转化感受态BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导,SDS-PAGE分析,获得重组蛋白大小为49 ku。Western blot分析纯化后重组蛋白能与FAd V-4阳性血清发生特异性反应。将纯化后的重组蛋白免BALB/c小鼠,制备了六邻体蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定效价表明制备的血清效价大于1∶64 000。
- 刘兰卢渊录梁雄燕蔡宇威顾玉芳
- 关键词：多克隆抗体
- 一起山羊痘的病例分析被引量：1
- 2016年
- 山羊痘是由山羊痘病毒引起的主要以病羊全身皮肤、黏膜出现大小不一的丘疹、水疱、溃疡或痂皮,以及在内脏器官特别是肺脏形成明显丘疹为症状的一种传染病。该病广泛流行于养羊地区,在我国多个省（市、区）都有发生[1]。该病传播快,发病率高,不同品种、年龄的羊均可感染,当气候突变、寒冷雨雪、霜冻及饲养管理不当都可促进本病的发生[2]。羊一旦发生该病,会给养殖户造成严重的经济损失。近期湖北某养殖户的山羊发病,死亡达一半以上,
- 李新黄专赵星蔡宇威刘兰梁雄燕顾玉芳
- 关键词：山羊痘病毒痂皮秋季气温颈背部病理学变化
- 波尔山羊肠毒血症的诊断与防治
- 2016年
- 笔者对湖北某地区羊场波尔山羊发生羊肠毒血症进行了诊断治疗和分析。结果显示,病羊发病急、死亡快,临床腹泻;消化道病变明显,整个肠管外观鲜红或暗红,高度肿胀,肠内充满气体,肠黏膜充血、出血,内容物呈棕红色稀糊状;脾脏不肿大;其他脏器未见明显病变;血涂片,肝、肾触片可见有荚膜的大杆菌。
- 方四海黄专蔡宇威刘兰梁雄燕顾玉芳
- 关键词：波尔山羊羊肠毒血症
