杨锐
- 作品数：11 被引量：10H指数：2
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- 活性维生素D3对Thy-1型肾炎肾小球中Ki-67、PCNA表达的影响
- 目的 探讨活性维生素D3 对大鼠Thy-1 型肾炎肾小球系膜细胞的影响,观察活性维生素D3 对Ki-67和PCNA 在Thy-1 型肾炎肾小球系膜细胞中的表达情况.方法 将清洁级SD 大鼠随机分为空白对照组(A 组)和实...
- 索洁杨锐王文正赵瑾杨晓萍
- 1,25(OH)_2D_3对人肾小球系膜细胞增殖及mTOR/p70s6K表达的影响
- 2015年
- 目的：探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25（OH）2D3]对人肾小球系膜细胞增殖的影响及其在肾小球系膜细胞调控中对mTOR/p70s6K信号通路的作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞，取传代培养至3～7代细胞分为4组：正常对照组（加含5%胎牛血清DMEM培养基），VD组[加1,25（OH）2D310-8 mol/L]，R组（加雷帕霉素5 mg/L），R＋VD组[加雷帕霉素5 mg/L及1,25（OH）2D310-8 mol/L]，干预48 h。采用细胞增殖与活性检测试剂盒CCK-8检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期时相分布，免疫荧光法检测细胞中mTOR、p70s6K的表达情况。结果正常对照组、VD组、R组、R＋VD组：（1）吸光度值（A450）依次降低，组间多重比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）；抑制率（IR）依次升高。（2）G1期细胞比例依次增加，S期、G2/M期依次减少，增殖指数（PI）依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。（3）系膜细胞中mTOR、p70s6K蛋白表达强度均依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。结论1,25（OH）2D3可显著抑制人系膜细胞增殖，且其可能通过抑制mTOR/p70s6K信号通路调控肾小球系膜细胞增殖。
- 唐玉玲马莉赵丹贾林杨锐杨晓萍
- 关键词：肾小球系膜细胞细胞增殖细胞周期1,25-二羟基维生素D3
- 1,25(OH)_2D_3对Thy-1肾炎大鼠Ki67、mTOR表达的影响
- 2015年
- 目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对Thy-1肾炎模型大鼠Ki67和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)表达的影响,并探讨其机制。方法 90只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、1,25(OH)2D3组,每组30只。模型组与1,25(OH)2D3组尾静脉注射抗Thy-1单克隆抗体建立肾炎模型,对照组给予等剂量生理盐水。建模后,1,25(OH)2D3组给予1,25(OH)2D30.5μg/d灌胃,连续给药21 d,对照组及模型组给予等体积花生油。分别于给药后第1、3、7、14、21天每组随机处死6只大鼠,处死前1 d收集24 h尿液进行24 h尿蛋白定量;取各组肾组织标本,经HE和PAS染色后进行肾脏病理损害评分,免疫组化法检测肾组织中Ki67、m TOR表达。结果模型组和1,25(OH)2D3组大鼠在建模后第1天尿蛋白水平升高,模型组第3天达高峰,至第14天恢复至正常水平,1,25(OH)2D3组大鼠第1、3、7天的尿蛋白水平均低于模型组(P<0.05)。1,25(OH)2D3组大鼠肾组织病理损害程度第3、7天较模型组减轻(P<0.05),Ki67、m TOR蛋白表达水平较模型组降低(P<0.05)。24 h尿蛋白定量,Ki67表达水平,m TOR表达水平及肾组织病理损害评分彼此间均呈正相关。结论 1,25(OH)2D3可抑制Thy-1肾炎模型大鼠肾小球系膜细胞的增殖,其作用机制可能与减少Ki67、m TOR的表达有关。
- 杨锐索洁李建锋王文政赵瑾陶林杨晓萍
- 关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白KI671,25(OH)2D3THY-1肾炎
- 医科院校内科学采用网络教学的探索与心得
- 2023年
- 网络教学已经成为信息化时代一种趋势,亦是传统课堂教学的良好互补。医科院校内科学采用网络教学形式,既有其自身优势和特色,同时存在诸多问题值得教育界思考和研究。应建立科学的内科学网络教学考、评体系,加强相应教学软件、平台建设,提升实际教学效果。内科学常规教学和网络教学相辅相成,打造面向时代的医学教育模式,全面提升内科教学水平,培养合格的医学人才。
- 赵丹罗星杨锐
- 关键词：医科院校内科学网络教学教学平台
- 1,25-二羟维生素D_3对人系膜细胞增殖作用的影响被引量：2
- 2015年
- 目的通过观察1,25-二羟维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对Ki-67抗原表达的影响,探讨其对人系膜细胞增殖的抑制作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、表皮生长因子(EGF)组、1,25(OH)2D3组及EGF联合1,25(OH)2D3组,培养48 h后,应用免疫荧光技术和荧光定量PCR(RT-PCR)检测Ki-67抗原及其mRNA的表达。结果正常对照组、EGF组、1,25(OH)2D3组和EGF联合1,25(OH)2D3组细胞荧光强度分别为(35.958±2.563)、(49.872±2.745)、(22.415±2.277)和(36.567±2.270),4组比较差异有统计学意义(F=123.429,P<0.05)。其中,EGF组荧光强度高于正常对照组,1,25(OH)2D3组荧光强度低于正常对照组(P<0.05);1,25(OH)2D3组和EGF联合1,25(OH)2D3组荧光强度低于EGF组(P<0.05)。以正常对照组为基准,EGF组、1,25(OH)2D3组和EGF联合1,25(OH)2D3组Ki-67 mRNA相对表达量分别为(2.479±0.150)、(0.584±0.031)和(1.176±0.017),4组比较差异有统计学意义(F=51.107,P<0.05)。其中,EGF组Ki-67mRNA相对表达量高于正常对照组,1,25(OH)2D3组Ki-67 mRNA相对表达量低于正常对照组(P<0.05);1,25(OH)2D3组和EGF联合1,25(OH)2D3组Ki-67 mRNA相对表达量低于EGF组(P<0.05)。结论1,25(OH)2D3可抑制人肾小球系膜细胞的增殖,并降低EGF对人肾小球系膜细胞增殖的促进作用。
- 杨锐尹璇张昊陈建平马莉张春江杨晓萍
- 关键词：人肾小球系膜细胞1,25-二羟维生素D3KI-67抗原表皮生长因子细胞增殖
- 整合素连接激酶抑制剂在人近端小管上皮细胞转分化中的作用
- 2016年
- 目的观察不同浓度整合素连接激酶（ILK）抑制剂QLT0267对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（TEMT）的作用及其机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞（HK-2），建立TEMT模型，排除高浓度渗透压对TEMT的影响后，将HK-2细胞分为6组，分别给予不同浓度葡萄糖（GS）及QLT0267干预48h。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况，计算细胞增殖抑制率；免疫荧光法检测细胞ILK、α平滑肌肌动蛋白（d．SMA）的表达；Western印迹法检测细胞ILK、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、α-SMA、E钙黏蛋白（E．eadherin）的表达。结果（1）与对照组相比，高糖组细胞ILK、p-AKT、α—SMA表达增高（均P〈0．05），E-cadherin表达降低（P〈0．05）。（2）与高糖组相比，浓度大于5Izmol／LQLT0267处理组的细胞增殖抑制率降低（P〈0．05）。（3）与高糖组相比，随着QLT0267浓度的增加，HK．2细胞P—AKT、ILK、α-SMA表达量逐渐降低（均P〈0．05），E—cadherin表达量逐渐增高（P〈0．05）。结论高糖可诱导HK-2细胞TEMT；ILK抑制剂QLT0267可能通过阻止ILK下游蛋白活化，部分抑制细胞增殖，延缓HK-2细胞TEMT进程。
- 贾林林智峰马莉唐玉玲杨锐杨晓萍
- 关键词：糖尿病肾病细胞转分化蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
- 整合素连接激酶抑制剂QLT0267对TEMT过程中P38MAPK表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中,整合素连接激酶(ILK)抑制剂QLT0267对P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)表达的影响。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2),分10组,每组给予不同浓度葡萄糖及QLT0267,干预48h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);随后选取对照组、高糖组、DMSO组、QLT0267(IC50)组(使用QLT0267后,HK-2细胞数量减少一半所需的QLT0267药物浓度),免疫荧光法检测各组ILK、P-P38MAPK的表达;Western blot检测各组ILK、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化-蛋白激酶B(P-AKT)、PP38MAPK、P38MAPK、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,观察各组表达差异性,探讨在TEMT过程中QLT0267对P38MAPK的影响。结果 30mmol/L的葡萄糖干预48h HK-2细胞增殖显著,同时上调细胞中ILK、P-AKT、P-P38MAPK、α-SMA的表达;QLT0267在抑制HK-2细胞增殖的同时,可以通过下调ILK下游P-AKT的表达,阻止P38MAPK活化,进而减少HK-2细胞中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。结论 QLT0267可能通过部分阻止P38MAPK的活化,从而延缓HK-2细胞TEMT进程。
- 林智峰贾林赵丹马莉唐玉玲杨锐杨晓萍
- 关键词：近端小管上皮细胞转分化整合素连接激酶P38丝裂原活化蛋白激酶
- 1,25 (OH)_2D_3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响被引量：3
- 2016年
- 目的观察1,25-二羟维生素D_3〔1,25（OH）_2D_3〕对人系膜细胞（HMC）增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25（OH）_2D_3对HMC增殖调控中的作用。方法体外培养HMC,取传代培养至第3~7代细胞分为4组：正常对照组（N组）、1,25（OH）_2D_3组（10-8mol/L,VD组）、PI3K抑制剂干预组（LY294002 2μg/ml,LY组）,LY294002（2μg/ml）联合1,25（OH）_2D_3组（10-8mol/L）组（LY＋VD组）,干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况。结果各实验组吸光度值（A值）比较,差异有统计学意义（F=281.641,P〈0.01）,其中VD组、LY组和LY＋VD组A值均低于N组,LY＋VD组A值均分别低于VD组和LY组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。各实验组G_2/M期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。各实验组G_1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;其中VD组、LY组和LY＋VD组G_1期均高于N组,S期和PI均低于N组,LY＋VD组G1期均高于VD组,S期和PI均低于VD组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。各实验组Akt/β-actin、mTOR/β-actin灰度值比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;其中VD组、LY组和LY＋VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于N组,LY＋VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于VD组和LY组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论1,25-（OH）_2D_3可通过PI3K/Akt信号通路抑制体外培养HMC的增殖。
- 唐玉玲张春江马莉贾林杨锐杨晓萍
- 关键词：骨化三醇AKT肾小球系膜细胞细胞增殖
- 活性维生素D3对大鼠Thy-1型肾炎肾组织中Akt及pAkt表达的影响
- 目的： 探讨活性维生素D3对大鼠Thy-1型肾炎系膜细胞中Ki67、Akt/pAkt的影响，以及可能的机制。 方法： 清洁级SD雄性大鼠90只，随机分为三组：空白对照组（对照组）,肾炎模型组（模型组），活性维生素D...
- 杨锐
- 关键词：活性维生素D3系膜细胞
- P38MAPK抑制剂SB203580对高糖诱导HK-2细胞转分化的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨不同浓度P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)抑制剂SB203580在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的机制及其较佳作用浓度。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2)并分为对照组(5.5 mmol/L GS)、DMSO组(5.5 mmol/L GS+30μmol/L SB203580等体积的DMSO)、高糖组(30mmol/L GS),以及30 mmol/L GS+5、10、20、30μmol/LSB203580处理的S5、S10、S20及S30组,干预48 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);选取对照组、高糖组、S30组,Western blot法检测P38MAPK、P-P38MAPK及α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达、免疫荧光法检测α-SMA的表达。结果 (1)与对照组相比,DMSO对HK-2细胞增殖无显著抑制作用(P>0.05);高糖组、S5组HK-2细胞增殖增多(P<0.05);S20、S30组HK-2细胞增殖减少(P<0.05)。与高糖组相比,S5、S10、S20、S30组细胞增殖均受到抑制(P<0.05)。(2)与对照组相比,高糖组、S30组P-P38MAPK表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组P-P38MAPK的表达量降低(P<0.05)。3组P38MAPK表达量无显著差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,高糖组、S30组α-SMA表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组α-SMA表达量降低(P<0.05)。结论 30 mmol/L GS可以诱导HK-2细胞TEMT;30μmol/L SB203580是抑制HK-2细胞TEMT的较佳抑制浓度,SB203580可能通过下调P-P38MAPK表达,从而抑制HK-2细胞增殖及胞浆中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。
- 贾林林智峰马莉唐玉玲杨锐杨晓萍
- 关键词：上皮间质转分化P38丝裂原活化蛋白激酶SB203580
