赵丹丹
- 作品数:5 被引量:10H指数:2
- 供职机构:东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛骨骼肌α-actin基因5′上游调控元件及内含子功能的初步分析被引量:2
- 2015年
- 采用PCR定点突变分析法确定牛骨骼肌α-actin启动子-361^-462bp区域的调控元件Sp1/KLFs、ZF5F和Pax3结合位点的功能;利用基因重组技术,将内含子Ⅰ和内含子Ⅱ分别连在启动子缺失片段的上游和下游,构建双荧光素酶表达载体,使其转染牛骨骼肌卫星细胞和胎儿成纤维细胞,进行活性检测。结果显示,Sp1/KLFs降低牛骨骼肌α-actin基因启动子活性,ZF5F和Pax3均能增强启动子活性。内含子在启动子上游增强了启动子活性,在其下游降低了启动子活性,且顺式调控元件和内含子均具有肌肉特异性。结果表明,初步确定了参与牛骨骼肌α-actin基因转录调控的负顺式调控元件Sp1/KLFs,正顺式调控元件ZF5F和Pax3,发现了内含子插入启动子的位置很重要,为以后构建牛骨骼肌α-actin高活性的启动子奠定了基础。
- 胡倩曹允考佟慧丽张伟伟赵丹丹王彬高朋严云勤
- 关键词:启动子活性调控元件内含子
- 肌肉特异性基因启动子的上游转录调控元件研究进展被引量:6
- 2012年
- 真核生物启动子位于基因5’端上游转录起始位点附近,是包含核心启动子以及上游转录调控元件的一段DNA序列,这些转录调控元件控制着基因表达的强度和特异性。肌肉特异性启动子的上游调控元件种类、数量和排列顺序决定着基因在肌肉中的特异性表达。深入研究肌肉启动子的上游调控元件,可以进一步了解肌肉基因表达机制,从而为肌肉性状的改良、增殖分化的机理和疾病的基因治疗等研究提供重要依据。该文回顾了近年来肌肉特异性启动子研究领域中的新发现,包括肌肉特异性启动子转录调控元件的分子机制、建立人工合成肌肉启动子的方法及应用,并探讨该领域中急需解决的问题和发展前景。
- 赵丹丹刘聪聪贾明玉杨悦叶枫严云勤
- 关键词:转录调控元件
- 牛肌肉抑制素前肽对牛肌卫星细胞增殖的影响被引量:2
- 2012年
- 通过PCR扩增目的基因,构建真核表达载体,利用PEI转染牛肌卫星细胞,转染后48与72 h通过CCK-8与流式细胞术检测细胞增殖的变化,通过RT-PCR检测目的基因的表达,通过RT-PCR与Western blot检测下游基因P21,CDK2的表达变化。结果表明,在两个时间点,实验组细胞活力明显升高(P<0.01),G0/G1期细胞所占的比例明显下降(P<0.01),S期细胞所占比例明显上升(P<0.01),MSTN前肽基因有大量表达,P21表达下降,CDK2表达上升。结果揭示,在牛肌卫星细胞中,MSTN前肽通过下调P21,上调CDK2的表达量促进细胞增殖。旨在揭示牛MSTN前肽基因对牛肌卫星细胞(MDSC)增殖的影响,为后续的转基因牛试验提供理论依据。
- 贾明玉佟慧丽李树峰赵丹丹严云勤
- 关键词:流式细胞术细胞增殖
- 小鼠四倍体胚胎凋亡检测及嵌合胚胎制作
- 2013年
- 四倍体胚胎补偿技术,特别是ES细胞和iPS细胞功能验证是已成为目前干细胞研究领域热点。本试验旨在通过提高四倍体胚胎与ES细胞形成嵌合胚胎效率,为构建转基因动物模型搭建技术平台。本研究利用电融合法制作小鼠四倍体胚胎,并采用TUNEL法检测四倍体胚胎凋亡情况以对其进行质量评估,同时通过四倍体胚胎补偿法和聚合法,将小鼠四倍体胚胎与带有GFP标记ES细胞制作成嵌合胚胎,从而能够为快速、简便获得完全ES细胞发育而来生物个体提供重要技术支持,并为基因功能研究和疾病动物模型构建提供一定研究基础。
- 严云勤杨悦叶枫赵丹丹
- 关键词:胚胎干细胞四倍体胚胎电融合小鼠
- 牛MyoG基因启动子、内含子的克隆及功能初步分析
- 本研究克隆了长度为2515bp的牛MyoG基因5’侧翼序列,并对其进行了功能活性研究。主要用牛肌卫星细胞来研究牛MyoG基因启动子的功能,同时选择牛胎儿成纤维细胞进行平行实验,检测到该基因的启动子具有肌肉特异性,这与生物...
- 王秋华赵丹丹李树峰严云勤
- 关键词:MYOG启动子内含子