孟珊珊
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：河南大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：省部共建河南大学科研项目国家环境保护公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 亚硝酸盐调控人肝癌SMMC-7721细胞癌干细胞特性被引量：2
- 2017年
- 有证据表明肝癌含有一定数量的具有自我更新能力的癌干细胞亚群。然而,癌干细胞是如何被调控的还不清楚。肿瘤微环境中一些生物介质可以导致癌干细胞快速可逆性改变。本文旨在探讨,在肿瘤微环境中有较高含量,又是细胞关键的调控因子的亚硝酸盐是如何调控人肝癌干细胞样细胞表型的。用SMMC-7721细胞系无血清培养获得细胞球。流式细胞术检测细胞周期,体外克隆形成实验和球形成实验检测细胞自我更新能力,侵袭实验检测细胞侵袭能力,癌干细胞标志物检测采用流式细胞术和Westen blot方法,MTT检测细胞活力。皮下注射SMMC-7721球形成细胞建立裸鼠移植瘤模型,活性氧(ROS)检测试剂盒检测移植瘤组织内ROS水平,免疫荧光检测组织内缺氧有诱导因子-1α(HIF-1α)。结果显示,SMMC-7721细胞系来源的球细胞自我更新能力增强,干细胞标志物表达增加,耐药性增强,提示球形成细胞富集了较多的具有癌干细胞特征的细胞。用亚硝酸钠(150μmol·L^(-1))处理亲本细胞和球形成细胞后,G_0/G_1期细胞比例增加,肝癌干细胞标志物CD133、CD90和EpCAM表达增加,细胞耐药能力和侵袭能力增强。与亲本细胞相比,亚硝酸盐对球形成细胞的上述作用明显增强。体内实验结果也显示,亚硝酸盐促进球形成细胞移植瘤生长,组织内ROS水平下降,HIF-1α累积。结果表明,亚硝酸盐通过上调肝癌干细胞"干性"增强肝癌细胞侵袭能力。
- 刘良策孟珊珊归冠李鲁娟刘彬梁红霞皇甫超申
- 关键词：亚硝酸盐人肝癌细胞癌干细胞
- 亚硝酸钠通过线粒体自噬增强人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力被引量：4
- 2016年
- 亚硝酸盐对细胞具有独特的氧化还原作用,可以促进肝癌细胞侵袭和转移,但是具体机制尚不清楚。癌细胞通过线粒体自噬,清除多余的线粒体,维持细胞的恶性特征。本文旨在探讨亚硝酸盐对肝癌细胞线粒体自噬的作用以及活性氧(ROS)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在其中的作用。用系列浓度的亚硝酸钠在常氧下孵育人肝癌SMMC-7721细胞24 h,用MTT法测定吸光度值反映细胞活力,发现16 mg·L^(-1)亚硝酸钠对细胞活力的促进作用最强。Transwell小室实验显示,亚硝酸钠孵育细胞24 h,可以明显增强细胞迁移和侵袭能力;用微丝示踪剂和Mito-Tracker Red共染色,荧光显微镜下发现,亚硝酸钠促进应力纤维和伪足增加,线粒体呈现核周分布;以上现象均可以被活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)抑制。用ROS示踪剂DCFH-DA孵育,在荧光显微镜下发现,亚硝酸钠明显增强细胞内ROS水平。LC3免疫荧光和Western blot结果显示,亚硝酸钠明显增强细胞的自噬流;透射电镜观察发现,亚硝酸钠诱导细胞自噬溶酶体形成,NAC阻止自噬体降解。RT-PCR结果显示,亚硝酸钠明显降低线粒体标志分子COXⅠ和COXⅣ基因的表达;Mito-Tracker Green染色,激光共聚焦显微镜下发现,亚硝酸钠明显减少线粒体质量;Western blot结果显示,HIF-1α、线粒体自噬标志分子Beclin-1和Bnip3蛋白表达水平升高,这些现象同样被NAC所逆转。结果表明,亚硝酸钠(16 mg·L^(-1))增强SMMC-7721细胞ROS水平,通过HIF-1α诱导线粒体自噬,促进细胞迁移和侵袭。
- 归冠孟珊珊李鲁娟刘彬梁红霞皇甫超申
- 关键词：亚硝酸盐人肝癌细胞活性氧
- 亚硝酸盐和铵盐联合暴露通过ROS/ODC途径促进肝癌细胞侵袭被引量：3
- 2016年
- 最近发现肿瘤微环境内含有较高水平的亚硝酸盐和氨,但是它们对癌细胞的影响还不清楚。本研究旨在探讨亚硝酸盐和铵盐联合暴露对人肝癌细胞侵袭能力的影响及活性氧(ROS)/鸟氨酸脱羧酶(ODC)途径在其中的作用。经亚硝酸钠、氯化铵、亚硝酸钠和氯化铵混合物处理的SMMC-7721细胞,采用MTT实验检测细胞活力,transwell小室检测细胞侵袭能力,ROS检测试剂盒检测细胞内ROS水平,免疫荧光检测细胞内ODC,Western blot检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和ODC的蛋白表达。结果表明,亚硝酸钠和氯化铵混合物能够增强SMMC-7721细胞侵袭能力,促进细胞内ROS水平增加,促进ODC蛋白表达,ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以逆转上述现象;ODC特异性抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)可以增加细胞内ROS水平,降低细胞侵袭能力。综上所述,亚硝酸钠和氯化铵混合物通过增强ROS/ODC途径,促进人肝癌SMMC-7721细胞侵袭。
- 孟珊珊归冠李鲁娟刘彬梁红霞刘良策皇甫超申
- 关键词：亚硝酸盐铵盐人肝癌SMMC-7721细胞细胞侵袭
