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刘凤欣
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解放军白求恩国际和平医院
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医药卫生
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合作作者
孙殿兴
解放军白求恩国际和平医院
杨新英
解放军白求恩国际和平医院
李海军
白求恩国际和平医院
李海军
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符合慢性乙型肝炎病毒感染免疫特点的细胞共培养体系的建立
2016年
目的研究Huh7.93细胞与慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(cPBMCs)共培养能否模拟慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒(HBV)的复制特点及免疫功能状态,为研究慢性HBV感染的免疫清除机制提供体外共培养细胞系统。方法Huh7.93细胞单独培养及分别与健康体检者外周血单个核细胞、cPBMCs共培养7d。细胞增殖与毒性检测(CCK8)试剂盒检测Huh7.93细胞的增殖活性,荧光定量PCR、Southern blot等方法检测cPBMCs中及共培养细胞中HBV复制情况。两组间比较用独立样本t检验。结果一定比例的Huh7.93细胞与PBMCs共培养后Huh7.93细胞增殖活性较高,细胞生长状态良好。HBV不能感染cPBMCs并在其内复制。Huh7.93细胞与cPBMCs共培养后细胞培养上清液中HBVDNA定量在第4天[(6.01±0.20)log10拷贝/ml]、第7天[(7.82±0.24)log10拷贝/ml]明显增加,与Huh7.93细胞单独培养[分别为(4.99±0.08)log10拷贝/ml、(6.96±0.09)log10拷贝/ml)比较,差异均有统计学意义(P值均〈0.01)。Huh7.93细胞与cPBMCs共培养后第7天细胞裂解液中HBV复制中间体均比Huh7.93细胞单独培养明显增加。HepG2.2.15细胞与cPBMCs共培养后HBV复制无明显增加。结论Huh7.93细胞与cPBMCs共培养后类似于人体感染HBV后的病毒复制规律,能够很好地模拟慢性乙型肝炎患者的肝脏微环境及免疫功能状态,为体外研究慢性HBV感染的免疫清除机制提供了新的方法。
李海军
杨新英
康畜标
刘凤欣
孙殿兴
关键词:
单核细胞
免疫
白细胞介素-21号陧性乙型肝炎的关系研究
2015年
目的探讨白细胞介素.21(IL-21)与慢性乙型肝炎(cHB)患者体内HBV复制的关系。方法选取50例未经抗病毒治疗的CHB患者为CHB组,同时选取30例HBV携带者为对照组。荧光定量PCR检测患者血清中HBVDNA载量,化学发光法检测患者血清中HBsAg、HBeAg、抗.HBc定量,ELISA法检测患者血清中细胞因子。结果CHB组患者外周血IL-21水平为(160.55±23.39)pg/mL,高于对照组(85.93±23.34)pg/mL,差异有统计学意义(t=13.828,P〈0.01)。相关分析表明,CHB患者外周血中IL-21水平与HBVDNA定量呈负相关(r=-0.381,P〈0.01),与HBeAg定量亦呈负相关(r=-0.354,P〈0.05)。HBV携带者外周血中IL-21水平与HBVDNA及HBeAg定量均无相关性。结论CHB患者体内IL-21与HBV清除相关,IL-21分泌不足与HBV持续感染关系密切。
李海军
杨新英
刘凤欣
康富标
孙殿兴
关键词:
肝炎
乙型
慢性
白细胞介素-21
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