程蓓蓓
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
- 供职机构：四川农业大学动物医学院预防兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鹅T淋巴细胞表面分子CD4的检测方法及试剂盒
- 本发明属于分子生物学领域，具体涉及鹅T淋巴细胞表面分子CD4的检测方法及试剂盒。在本发明中，首先，提供了一种鹅CD4多克隆抗体，该鹅CD4多克隆抗体是以鹅CD4胞外区重组蛋白为抗原免疫动物而得到，特异性强；其次，提供了一...
- 陈舜程安春汪铭书程蓓蓓
- 文献传递
- 基于鹅T细胞表面CD4分子胞外区的双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2016年
- 为建立鹅CD4分子(goCD4)双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,本研究以鼠抗goCD4-exc多克隆抗体为包被抗体,兔抗goCD4-exc多克隆抗体为检测抗体,确立判定标准,优化反应条件,建立了goCD4DAS-ELISA的检测方法。试验结果显示该方法最低检出量达5 pg/mL,具有较好的灵敏度。批内批间变异系数均低于2%,具有较好的重复性。将建立的双抗体ELISA方法初步应用于检测小鹅瘟病毒(GPV)感染的鹅脾单核细胞中CD4分子表达水平变化情况,结果显示GPV感染鹅脾单核细胞中goCD4分子表达水平极其显著高于未感染组。本研究建立的检测goCD4的DAS-ELISA方法有利于进一步研究禽类细胞免疫水平变化,并对实际生产中禽病检测及防控提供技术参考。
- 张伟程蓓蓓陈舜汪铭书程安春
- 关键词：CD4分子多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 四川白鹅CD4基因胞外去信号肽区的可溶性表达及纯化被引量：2
- 2015年
- 根据Gen Bank公布的四川白鹅T细胞表面分子CD4基因序列设计特异性引物,扩增其胞外去信号肽区基因,将其构建成原核重组表达质粒go CD4-p ET-32a(+),并在大肠杆菌原核表达系统中进行可溶性表达并纯化,为进一步应用与研究提供基础。通过从成年四川白鹅胸腺组织中提取RNA,经反转录合成c DNA为模板扩增CD4基因胞外去信号肽区,并构建原核表达载体go CD4-p ET-32a(+)。在大肠杆菌Rosetta(DE3)p Lys S系统中进行原核表达,通过改变表达温度、培养基、诱导剂IPTG浓度、诱导时间以及抗性浓度等条件,最终获得可溶性表达并经NINTA亲和层析获得纯化蛋白。结果显示,鹅CD4胞外区蛋白只有在16℃的TB培养基中目的蛋白his-go CD4可表达,鉴定结果与预期相符,诱导表达成功且多以不可溶的包涵体形式存在。研究发现改变IPTG浓度对表达产物存在形式影响较大,最终筛选出以0.4 m M的IPTG条件作为可溶性表达的最佳诱导浓度。NI-NTA亲和层析获得纯化蛋白并经Western-blot验证。
- 程蓓蓓陈舜汪铭书程安春
- 关键词：CD4原核表达可溶性蛋白
- 检测鹅T细胞表面CD4与CD8α分子ELISA方法的建立
- CD4和CD8是T淋巴细胞表面的糖蛋白，与淋巴细胞的抗原识别及其自身活化密切相关。 CD4分子主要位于辅助性T淋巴细胞表面，参与细胞免疫并对体液免疫进行调控。CD8分子主要位于细胞毒性T淋巴性细胞表面，是细胞免疫的重要...
- 程蓓蓓
- 关键词：白鹅CD4分子
